王冬艳 作品数:30 被引量:145 H指数:8 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省杰出青年科学基金 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
5-Fu抑制增生性瘢痕成纤维细胞生长与cyc1inD1、CDK4、TGF-β1的关系 目的研究5-Fu抑制增生性瘢痕组织成纤维细胞的生长与细胞因子cyclinD1,CDK4,TGF-β1的关系及其分子作用机制。方法组织块法培养增生性瘢痕组织及正常皮肤组织的成纤维细胞。用不同浓度的5-FU作用于体外培养的人... 陈天新 武凤莲 王冬艳文献传递 手先天性并指畸形的治疗 被引量:38 2003年 目的 介绍手先天性并指畸形的治疗。方法 42例先天性并指畸形患者中 ,2指并指 3 6例 ,多指并指 6例 ;软组织并指 3 0例 ,远节指骨骨性并指 12例。均采用并指间背侧矩形皮瓣形成指蹼 ,指间掌背侧锯齿状皮瓣进行分指。皮瓣移位后指部外露创面用游离植皮覆盖 ,指端骨外露者用局部皮瓣覆盖。结果 3例的游离植皮部分坏死 ,创面经换药后愈合 ;3 9例的创面均Ⅰ期愈合。术后 1年 12例失访 ,3 0例的指蹼坡度良好 ,指尖部软组织饱满 ,手术指的外展良好。 12例术毕因指间关节侧弯 ,术后用支架纠正畸形 ,效果满意。结论 并指畸形的治疗关键是指蹼的形成 ,指间关节侧弯术后使用支架纠正为一良好的方法。 关德宏 焦尔康 韩竹 李贵东 王新涛 吕松岑 王冬艳 刘锋 张建权关键词:外科治疗 手术方法 功能锻炼 5-FU对增生性瘢痕中cyclinD_1、cdk4及p53基因表达的影响 被引量:9 2006年 目的探讨5-FU对增生性瘢痕组织的成纤维细胞中细胞周期蛋白因子(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk4)及抑癌基因(p53)的mRNA表达的影响,以阐明5-FU对病理性瘢痕的作用机制。方法组织块法培养增生性瘢痕组织及正常皮肤组织的成纤维细胞。用不同浓度的5-FU作用于体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞,检测MTT值;利用半定量RT-PCR分析用药前后cyclinD1、cdk4、p53的mRNA表达的变化。结果5-FU在体外能明显抑制人增生性瘢痕组织中成纤维细胞的增殖及cyclinD1、cdk4的mRNA表达;对p53的mRNA表达无影响。结论5-FU抑制病理性瘢痕成纤维细胞的机制与其抑制cyclinD1、cdk4的表达有关,而与p53表达无关。 陈天新 武凤莲 王冬艳 关德宏关键词:5-FU CYCLIND1 CDK4 增生性瘢痕 载脂蛋白Eε4等位基因与急性脊髓损伤预后的相关性 2016年 目的:探讨中国汉族人群中载脂蛋白Eε4等位基因与急性脊髓损伤(ASCI)预后的相关性。方法:采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)方法,检测2012年5月-2015年10月就诊于哈尔滨医科大学附属第二医院脊柱外科的50例(男性患者35例,女性患者15例)颈段(C3-C8)脊髓损伤的中国汉族患者载脂蛋白Eε4等位基因的遗传学状态,并以ASIA脊髓损伤神经学分类标准为患者神经功能恢复情况进行评估,分析中国汉族人群中载脂蛋白Eε4等位基因与急性脊髓损伤预后的相关性。结果:在运动方面,载脂蛋白Eε4阴性的患者恢复情况显著强于载脂蛋白Eε4阳性的患者恢复情况(mean 6.1vs 3.7,P=0.04)。而在针刺觉方面,载脂蛋白Eε4阴性的患者恢复情况显著弱于载脂蛋白Eε4阳性的患者恢复情况(mean 4.0 vs 6.1,P=0.03)。在轻触觉方面,载脂蛋白Eε4阴性和阳性患者的恢复情况没有显著的差异(mean 7.4 vs 5.9,P=0.28)。结论:中国汉族人群中载脂蛋白Eε4等位基因与ASCI的预后密切相关:载脂蛋白Eε4阳性不利于患者运动的恢复,利于患者针刺觉的恢复。 乔久涛 刘艾芸 孙崇毅 陈天新 孙崇然 李明 王冬艳关键词:载脂蛋白E 脊髓损伤 基因多态性 软骨脱细胞基质对软骨细胞生物学功能的影响 2010年 目的 检测软骨脱细胞基质(ACM)对软骨细胞的生物学作用,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.方法 切取健康的雄性日本大耳白兔膝关节的软骨,经低温粉碎成软骨颗粒,通过多步骤酶方法将软骨颗粒行脱细胞处理,并用含20%胎牛血清的DMEM研磨制成ACM液.再切取兔膝关节的软骨,制成碎屑后分离培养软骨细胞.取培养第2、3代的软骨细胞,分成对照A组和B、C、D3个实验组(分别加入0.5、1.0、5.0ms/ml的ACM液).采用MTT法检测软骨细胞的活力,测定糖胺多糖的含量,以及H-胸腺嘧啶(3H-TdR)和3H-脯氨酸(3H-Pro)掺人法测定软骨细胞的增殖情况和胶原的合成能力.结果 ACM扫描电镜观察软骨巢内软骨细胞消失.软骨细胞在ACM液中生长良好,形态正常.B、C、D与A组相比,软骨细胞的生长活力分别增加了7.73%、13.50%、16.5%(P〈0.05或P〈0.01).糖胺多糖的含量在B组与A组相比其差异无统计学意义(P〉0.05);而C、D组比A组增加了51.15%、62.68%(P〈0.05或P〈0.01).软骨细胞3H-TdR和3H-Pro掺入后,在B、C、D组中细胞的增殖及合成的胶原与A组相比,其差异均有统计学意义(P〈0.01).结论 ACM能够提高软骨细胞的生长活力,增加糖胺多精的含量,刺激软骨细胞的增殖和胶原的合成,是可供选择的组织工程支架材料之一. 王冬艳 杨大平 关德宏 陈天新 肖志波关键词:软骨 生物学功能 小腿开放性骨折中软组织缺损的一期修复 被引量:9 2019年 目的探讨小腿开放性骨折中软组织缺损一期行骨折固定联合皮瓣修复的临床疗效。方法回顾性分析2011年1月至2018年1月哈尔滨医科大学附属第二医院骨外科收治的34例小腿开放性骨折伴软组织缺损患者资料。患者男31例,女3例;年龄13~54岁,平均35岁。根据Gustilo分型:ⅢA型31例,ⅢB型3例;软组织缺损6 cm×3 cm^25 cm×10 cm,所有患者急诊一期做骨折固定同时行皮瓣修复。32例行接骨板内固定,2例行单臂外固定支架固定;34例均用游离股前外侧皮瓣修复。术后观察皮瓣存活情况,有无血管危象发生和骨感染发生。结果本组34例游离皮瓣全部成活,无血管危象发生。所有患者均获随访,时间6个月至3年(平均10个月)。皮瓣愈合良好,质地柔软,外形满意。缺损部位无骨感染发生。所有患者经过术后康复膝关节伸直160°~180°,屈曲90°~110°;踝关节背伸90°~110°,跖屈100°~120°。结论小腿开放性骨折伴软组织缺损经彻底清创,一期行骨折内固定同时行皮瓣修复软组织缺损,创口一期愈合,避免了感染的发生,皮瓣成活良好。 关德宏 王冬艳 贾涛 陈天新 赵东波 乔久涛关键词:软组织损伤 外科皮瓣 修复外科手术 小腿 脱细胞血管基质与血管平滑肌细胞的体外相容性 被引量:2 2006年 目的:酶-化学除垢剂制备脱细胞血管基质,检测其与平滑肌细胞的相容性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法:实验于2003-12/2005-12在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。①脱细胞血管基质制备:在37℃水浴振荡条件下,犬总动脉先后用1g/L胰蛋白酶+0.2g/L乙二胺四乙酸钠和1.0%TritonX-100进行脱细胞处理24h和176h,充分漂洗,冷冻干燥后备用。②平滑肌细胞的提取:应用组织块贴壁法体外培养扩增犬隐静脉的平滑肌细胞。③四甲基偶氮唑盐法测定脱细胞血管基质浸提液对平滑肌细胞的毒性:设浸提原液、75%、50%和25%浸提液组,阴性对照组(DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清培养液)。以阴性对照组的吸光度作为100%细胞增殖率,增殖百分率(P%)=犤实验组A值/阴性对照组A值犦×100%,按ISO和医学生物材料标准评定材料毒性。④急性毒性试验:取成年大鼠8只,将备用脱细胞血管基质研磨成粉末,生理盐水配成2g/L的混悬液,无菌条件下向大鼠腹腔内注入1mL脱细胞血管基质混悬液,观察72h,记录动物有无死亡及不良反应。⑤亚急性毒性试验:取成年大鼠12只,随机分成2组。实验组用脱细胞血管基质混悬液灌胃,剂量为500mg/kg质量,隔日1次,共10次;对照组给等量生理盐水灌胃。实验期间观察记录体质量变化及动物活动情况。21d取血检查血常规。⑥溶血试验:取抗凝兔血8mL,加入生理盐水10mL,稀释备用。取脱细胞血管基质粉末,加生理盐水中,再加入稀释兔血离心后取上清测定545nm处的吸光度。阴性对照为生理盐水10mL加入稀释兔血;阳性对照为蒸馏水加入稀释兔血。溶血率=犤(试验材料的吸光度-阴性对照的吸光度)/(阳性对照的吸光度-阴性对照的吸光度)犦×100%。⑦凝血试验:血库健康献血员新鲜血浆,用自动血液凝固测定仪进行凝血酶原凝固试验、测定部分凝血活酶凝固时间、凝 郭铁芳 杨大平 韩雪峰 王冬艳 郝晨光 马辉 许杰关键词:生物相容性材料 细胞外基质 金属硫蛋白抑制同型半胱氨酸诱导的大鼠血管成纤维细胞激活 被引量:11 2003年 目的 :观察外源性金属硫蛋白 (MT)和ZnCl2 诱导内源性MT生成对同型半胱氨酸 (HCY)激活大鼠血管成纤维细胞增殖的影响 ,以探讨MT拮抗HCY血管损伤的可能机理。方法 :采用 [3 H]-胸腺嘧啶 ([3 H]-TdR)和[3 H]-脯氨酸 ([3 H]-Pro)掺入法测定细胞增殖及胶原生成 ,自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量 ,台盼蓝排斥法计算细胞存活率 ,并用 [10 9Cd]-血红蛋白饱和法检测细胞MT的含量。结果 :HCY 5 0、10 0、5 0 0 μmol/L呈浓度依赖性刺激血管成纤维细胞增殖 ,胶原合成和分泌 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,5 0 0 μmol/LHCY使细胞LDH漏出量增多 ,细胞存活率降低。MT 1× 10 -5mol/L、1× 10 -4mol/L与 5 0 0 μmol/LHCY共孵育组与单纯HCY组比较 ,[3 H]-TdR、[3 H]-Pro掺入、胶原分泌降低 ,LDH漏出量减少 (P <0 0 5或P <0 0 1)。ZnCl2 预处理诱导细胞MT含量增加 (P <0 0 5 ) ,而ZnCl2 处理与HCY 5 0、10 0、5 0 0 μmol/L共孵育组 [3 H]-TdR和 [3 H]-Pro掺入 ,胶原分泌、LDH漏出量都明显低于单纯HCY组细胞 ,且细胞存活率高于单纯HCY组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :HCY刺激血管成纤维细胞增殖与胶原合成 ,MT无论外源应用或内源性诱导生成均能有效拮抗HCY的上述作用。MT对HCY作用的拮抗效应可能是其血管细? 王冬艳 郭杰 李夏 李扬 唐朝枢 李菊香关键词:金属硫蛋白 成纤维细胞 金属硫蛋白对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的影响及意义 目的:在大鼠缺血再灌注损伤模型上观察皮瓣组织中金属硫蛋白(MT)含量变化.探讨大鼠继发静脉缺血再灌注损伤皮瓣中脂质体包裹金属硫蛋白(Lipo-MT)的保护作用.方法:建立大鼠缺血再灌注损伤皮瓣模型,测定皮瓣在缺血8h、再... 王冬艳关键词:皮瓣 缺血再灌注损伤 金属硫蛋白 脂质体 文献传递 联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞增殖和形态的影响 被引量:4 2005年 目的探索体外培养和扩增同一来源内皮细胞和平滑肌细胞的有效方法,研究联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞形态和增殖的影响。为研究内皮细胞和平滑肌细胞相互关系和体外构建组织工程血管提供理论和实践基础。方法在体外用酶消化法和组织块贴壁法分别建立内皮细胞和平滑肌细胞的原代,并应用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸钠传代培养。应用光镜、透射电镜、细胞计数和MTT法对内皮细胞和平滑肌细胞的形态和代谢进行研究。模拟血管壁的内层结构及内皮细胞和平滑肌细胞间的相互影响途径,建立以聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜为介质的内皮细胞与平滑肌细胞联合培养模型。分3组:内皮细胞,平滑肌细胞、平滑肌细胞/平滑肌细胞和空白/平滑肌细胞,应用3H-TdR掺入法研究联合培养的内皮细胞对平滑肌细胞增殖的影响。结果酶消化法和植块培养法可以有效地建立起内皮细胞和平滑肌细胞的原代。内皮细胞对联合培养的平滑肌细胞早期增殖有促进作用,晚期则增殖缓慢。结论以PET膜为介炙联合培养同一来源的内皮细胞和平滑肌细胞的新模型是研究两者间相互影响的良好模型。内皮细胞和平滑肌细胞作为血管构成的基本细胞,对于它们的形态学、体外培养和扩增以及相互关系的研究具有重要的意义。 郭铁芳 杨大平 韩雪峰 王冬艳 郝晨光 马辉关键词:内皮细胞 平滑肌细胞 血管 形态学