王卫华
- 作品数:88 被引量:387H指数:11
- 供职机构:宁波大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金:宁波市医学科技计划项目宁波市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 泛耐药肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药机制研究被引量:4
- 2014年
- 目的通过检测一株泛耐药肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物耐药相关基因表达状况,分析该菌泛耐药的原因及其机制,为临床资料提供参考依据。方法回顾性分析2012年1月住院患者经API 20E系统初步鉴定菌种并经基因扩增与测序进一步确认的一株泛耐药肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)法分别检测β-内酰胺酶编码基因与膜孔蛋白编码基因、氨基糖苷类修饰酶编码基因和16SrRNA甲基化酶编码基因、拓普异构酶Ⅱ(DNA旋转酶)A亚单位和拓普异构酶ⅣC亚单位编码基因(gyrA、parC)突变分析以及可移动遗传元件标记基因。结果在该泛耐药肺炎克雷伯菌株中分别检出TEM、SHV、CTX-M-1群、KPC、DHA等5种β-内酰胺酶编码基因、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ等3种氨基糖苷类修饰酶编码基因、intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、IS903、ISEcp1、ISKpn6、trbC等8种可移动遗传元件标记基因,并发现gyrA和parC基因存在突变,但膜孔蛋白编码基因检测呈阴性。结论借助于可移动遗传元件而获得广泛耐药基因并表达5种β-内酰胺酶编码基因和3种氨基糖苷类修饰酶编码基因、且存在gyrA基因与parC基因的有义突变,是该菌株泛耐药的主要原因与机制。
- 陈众博马红映邓在春汪丽吕丹孙士芳舒丽华王卫华
- 关键词:肺炎克雷伯菌泛耐药
- 108株铜绿假单胞菌的耐药性分析
- 2006年
- 目的了解近年我院铜绿假单胞菌对15种常用抗生素的耐药情况。方法对VITEK 32型全自动细菌仪鉴定的108株铜绿假单胞菌(PA)用GNS-120药敏检测卡进行药敏分析,药敏检测卡中没有的抗菌药物头孢哌酮-舒巴坦用标准K-B法进行检测。结果对108株PA敏感率居前三位的分别是亚胺培南(79.6%)、哌拉西林-他唑巴坦(75.9%)、环丙沙星(70.4%),其次为左旋氧氟沙星(68.5%)、头孢哌酮-舒巴坦(68.5%);108株PA对氨苄西林及1、2代头孢菌素的耐药率达100%,对3代头孢菌素和氨基糖苷类也有较高的耐药率。结论可作为PA经验用药的抗生素已越来越少,故应重视PA的感染与耐药性监测,指导临床合理使用抗菌药物。
- 吕婉飞王卫华
- 关键词:铜绿假单孢菌抗生素耐药性
- 克雷伯菌属基于管家基因及水平转移基因的菌株亲缘性分析被引量:1
- 2013年
- 目的对多药耐药克雷伯菌属进行基于管家基因与水平转移基因的菌株亲缘性分析,有助于医院感染的监测。方法采用聚合酶链反应(PCR)法对20株多药耐药克雷伯菌属分别检测与耐药相关的管家基因和水平转移基因,并对检测结果进行样本聚类分析。结果 20株克雷伯菌属中2株植生克雷伯菌与18株肺炎克雷伯菌处在两个不同的簇群中,18株肺炎克雷伯菌可分为A与B两个簇群,10、12、15、17、18号株及6、8、20号菌株分别为同一克隆菌株。结论耐药基因的样本聚类分析可识别出具有相同耐药特征的菌株,具有一定的流行病学意义,为追溯耐药菌传播途径提供方便。
- 邓在春马红映王翎汪丽吕丹孙士芳舒丽华王卫华
- 关键词:克雷伯菌属管家基因
- 非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测HBV P区rt204位点耐药突变
- 2013年
- 目的 建立一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线技术(HRM)检测HBV P区rt204位点耐药突变的方法.方法 构建野生株rt204M、突变株rt204I和rt204V的质粒,设计、优化探针.利用质粒作为标准品建立HRM特征性解链图谱.收集2010年5月至2012年5月宁波大学附属医院诊治的185例慢性乙型肝炎患者外周血样本共185份,用HRM技术检测所有样本,并与特征性解链图谱比对,筛选出rt204位点的突变,再经基因测序验证.采用配对x2检验比较两种方法的变异检出率.结果 突变株rt204I、rt204V和野生株rt204M的熔解温度(Tm)分别为58.0℃、60.6℃和62.5℃;185份样本中,HRM技术成功分析168份(90.8%),基因测序成功分析155份(83.8%),二者差异有统计学意义(P<0.01);同时被两种方法检出的155份临床样本中,非标记探针HRM技术检测到野生株75份(rt204M),变异株80份(55份rt204I、25份rt204V),变异检出率为51.6%(80/155);基因测序法检测到野生株110份(rt204M),变异株45份(30份rt204I、15份rt204V),变异检出率为29.0% (45/155),两种方法差异有统计学意义(P<0.01).结论 非标记探针HRM技术是一种简单、灵敏、快速、特异的HBV P区rt204位点耐药突变检测方法.
- 毛雄英陈洁王卫华陈辉
- 关键词:聚合酶链反应突变
- 多重耐药鲍曼不动杆菌的分子流行病学及耐药机制研究被引量:16
- 2011年
- 近年来,随着广谱抗菌药物的广泛应用,多重耐药鲍曼不动杆菌(multi-drug resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)的分离率日益增加。该菌在干燥物体表面生存时间可长达25d以上,极易造成医院内播散流行。
- 汪丽王峰王卫华吕婉飞邓在春
- 关键词:多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学耐药机制广谱抗菌药物分离率医院内
- 金黄色葡萄球菌血液分离株毒力与耐药编码基因研究被引量:2
- 2015年
- 目的分析医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)血液分离株临床特征及菌株分子生物学特征,了解MRSA耐药机制以控制其传播。方法对医院2012年4-12月自血液分离的19株MRSA和14株MSSA的临床特征及耐药性进行分析;采用聚合酶链式反应(PCR)对33株菌株进行23种毒力基因(sasX、fnbA、clfA、clfB、icaA、efb、cna、hla、hlb、hld、hlg、hlg2、pvl、lukE、lukM、psm-mec、ssp、eta、tst、sea、seb、cap5、cap8)与7种耐药基因[mecA、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ermA、ermB、ermC、tetM]检测。结果 MRSA感染患者年龄(78.5±7.6)岁,高于MSSA感染患者的(67.6±15.3)岁,差异有统计学意义(P<0.05);MRSA检出时间为入院后(9.84±4.11)d,晚于MSSA检出时间的(6.93±3.26)d,差异有统计学意义(P<0.05);19株MRSA对万古霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶及利福平的耐药率较低,分别为0、21.1%及26.3%,14株MSSA对青霉素和红霉素的耐药率较高,分别为78.6%和42.9%;19株MRSA除hlg、lukM、eta3种毒力基因未检出外,其余20种毒力基因均有检出,耐药基因检测示MRSA阳性率高于MRSA,与抗菌药物敏感性试验相符;MRSA与MSSA均存在克隆现象。结论 MRSA与MSSA黏附素基因检出率高,提示菌株的定植特性,真性毒力基因检出率高,提示菌株具有宿主组织损伤特性,在临床处置中要特别注意医院感染的控制手段以降低感染风险。
- 虞亦鸣马红映王翎汪丽吕丹孙士芳舒丽华王卫华邓在春
- 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子生物学
- 胎盘组织中柯萨奇B组病毒基因检测的临床意义
- 2003年
- 王卫华段秋林王望东陈洁
- 关键词:胎盘组织柯萨奇B组病毒基因检测自然流产
- 前列腺液中NAP积分和Hs-CRP的测定对各种慢性前列腺炎诊断的应用
- 目的检测前列腺液中碱性磷酸酶(NAP)积分以及超敏C反应蛋白(Hs-CRP)在诊断各种慢性前列腺炎中的应用。方法对收集的标本分成四组:慢性细菌性前列腺炎组、慢性非细菌性前列腺炎(支原体感染)组、慢性非细菌性前列腺炎组和正...
- 赵枫王峰张步荣王卫华侯列军杨后猛
- 关键词:碱性磷酸酶超敏C反应蛋白慢性前列腺炎
- 文献传递
- 引物延伸/变性高效液相色谱检测HBV拉米夫定耐药突变被引量:5
- 2010年
- 目的建立引物延伸/变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测HBV拉米夫定耐药突变的方法。方法本法只需单条引物一次延伸反应便可检测野生株YMDD型、突变株YIDD和YVDD型。其中,突变株YVDD型被延伸1个碱基(G),突变株YIDD型被延伸4个碱基(ATTG/ATCG),野生株YMDD型被延伸3个碱基(ATG),延伸产物用DHPLC检测长度;构建野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型质粒,对方法进行检验;用商品试剂和临床标本对方法进行验证。结果野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型克隆质粒验证结果完全符合;临床56例标本的检测结果与商品化试剂(熔解曲线法)结果完全符合。结论引物延伸/DHPLC检测HBV基因拉米夫定耐药突变是一个高特异性、高可靠性的方法。
- 毛雄英王卫华沈广宇张建英陈辉
- 关键词:变性高效液相色谱突变检测拉米夫定耐药
- 医院内嗜麦芽窄食单胞菌肺部感染的耐药性分析被引量:2
- 2006年
- 吕婉飞王卫华
- 关键词:嗜麦芽窄食单胞菌肺部感染耐药性分析非发酵革兰阴性杆菌感染病原体多重耐药性