王宏
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
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- 35ku的PF18-3分子在小鼠胸腺细胞凋亡亚群上的特异表达
- 1999年
- PF1 8 3抗体是一株大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体 .在以往的共培养研究中发现该抗体可抑制小鼠胸腺树突状细胞系 (MTSC4)诱导的胸腺细胞凋亡作用 .目的是观察PF1 8 3抗体识别分子 (PF1 8 3分子 )的特点及其在MTSC4诱导的胸腺细胞凋亡中的作用 .利用流式细胞仪对PF1 8 3分子的表达进行了特性分析 ,发现PF1 8 3分子除表达于MTSC4表面外 ,还表达于ConA活化的胸腺细胞上 ,但新鲜胸腺细胞表面无表达 .胸腺细胞与MTSC4共育 48h后 ,PF1 8 3分子表达上调 .流式细胞仪分析PI染色检测凋亡相关亚二倍体及PF1 8 3抗体染色的结果表明 ,PF1 8 3分子特异表达于高亚二倍体含量的凋亡胸腺细胞 .经免疫共沉淀和Westernblotting鉴定 ,凋亡胸腺细胞表达的PF1 8 3分子的分子量为 35ku .该分子可能参与胸腺细胞凋亡过程 .
- 王宏李燕庞学文陈慰峰
- 关键词：胸腺细胞细胞凋亡单克隆抗体
- 离子交换柱层析法纯化重组人IL－4被引量：1
- 1995年
- 用离子交换层析法一步纯化重组人白细胞介素４，该方法简单易行，对样品不产生稀释作用；所得产品具有高纯度（≥９５％），高生物学活性（≥１０ＭＵ／ｍｇ）和低毒性（内毒素含量≤０．５ＺＵ／Ｌ）的特点，可满足实验室工作的需要．当与凝胶过滤法结合使用时，所得产品纯度可达９８％，生物学活性进一步提高．
- 王宏王锦娟李燕刘洁陈慰峰
- 关键词：提纯离子交换
- 重组人IL-4 cDNA及纯化蛋白的鉴定被引量：1
- 1995年
- 构建了重组人白细胞介素4(rhIL—4)表达质粒pBV220/rhIL—4a,并在E.coli中高效表达。经核苷酸序列分析,测出rhIL—4cDNA全序列与国外发表的hIL—4cDNA序列完全相同。其纯化蛋白产品经分子量测定,Western印迹分析,等电点分析,N—端氨基酸序列测定,比活性等测定证明,均符合rhIL—4。
- 张凤蕴余青李晨戴燕王宏姚智庞学文刘洁陈慰峰
- 小鼠胸腺基质细胞单抗PF18-3的凋亡抑制作用及其识别分子的特征分析被引量：2
- 1997年
- 目的：观察单抗PF18-3对小鼠胸腺树突状细胞系（MTSC4）增强胸腺细胞凋亡作用的影响并对PF18-3识别分子进行特征分析。方法：用DNA梯度断裂片段电泳检测PF18-3对凋亡过程的抑制作用；用膜蛋白斑点杂交和免疫共沉淀对其识别分子进行特征分析。结果：PF18－3抑制MTSC4对胸腺细胞凋亡的增强作用。其识别分子为分子量31000的膜蛋白，在不同胸腺基质细胞系分布不同，与其凋亡介导增强作用一致。结论：PF18－3识别分子参与凋亡介导增强过程，为非凋之介导分子CD95／配体（Fas/FasL）分子，值得进一步研究。
- 王宏董海东王芳陈慰峰
- 关键词：胸腺间质细胞单克隆抗体
- 疏水层析纯化人重组白细胞介素－4被引量：1
- 1996年
- 应用疏水层析对大肠杆菌表达的人重组白细胞介素－４（ｒｈＩＬ－４）进行了纯化，含有ｒｈＩＬ－４的包涵体，经洗涤、变性、复性后，以Ｂｕｔｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ层析，得到了高纯度的ｒｈＩＬ－４．纯度达９７％；回收率为３２％；比活性为２×１０~７Ｕ／ｍｇ，讨论了ｒｈＩＬ－４疏水层析的条件，并对不同的方法纯化白细胞介素－４进行了比较．
- 戴燕李燕刘洁王宏陈慰峰
- 关键词：白细胞介素-4疏水层析
- 人PBL及CTLL-2/HIL-4R细胞系对人IL-4增殖应答的特性
- 1996年
- 本文分析了３０例正常人ＰＲＬ经ＰＨＡ活化的Ｔ细胞对ＩＬ－２及ＩＬ－４的增殖应答特点；及整合有人ＩＬ－４受体ｃＤＮＡ的ＣＴＬＬ－２／ＨＩＬ－４Ｒ细胞系对人ＩＬ－４的特异增殖应答特点。结果表明，正常人经ＰＨＡ活化的ＰＢＬ对ＩＬ－２有良好增殖应答曲线者占９３％，而对ＩＬ－４有良好增殖应答者只占２０％。 ＣＴＬＬ－２／ＨＩＬ－４Ｒ细胞系对人ＩＬ－４呈规律性增殖应答曲线，且应答敏感性高，可测出０．０９ｕ／ｍｌ，可推荐作为测定人ＩＬ－４生物活性的一种准确方法。
- 李洁徐华刘洁王宏陈慰峰
- 关键词：白细胞介素4细胞系PBL
- 胸腺细胞发育中的凋亡调控被引量：4
- 1999年
- 王宏陈慰峰
- 关键词：胸腺细胞细胞发育细胞凋亡
- 高比活性重组人IL-6的纯化与鉴定
- 1998年
- 目的制备高纯度、高比活性重组人ＩＬ－６。方法对已建立的重组表达载体ｐＢＭｈＩＬ－６进行温度诱导表达，包涵体提取洗涤和变性复性处理，复性的重组人ＩＬ－６蛋白经ＳＰ－ＦＦ强阳离子交换柱一步纯化。结果所得目的蛋白纯度＞９７％，经Ｎ末端氨基酸测序确证为ｈＩＬ－６，其比活性高达４．５×１０８Ｕ／ｍｇ。结论本研究的纯化工艺简便易行，所得产品纯度高。
- 王宏陈慰峰李燕钱晓萍
- 关键词：白细胞介素6色谱柱纯化
- 凋亡相关分子PF18-3在ConA诱导活化后胸腺细胞凋亡中的表达特性分析被引量：1
- 1999年
- 对抗体PF18-3识别分子(PF18-3分子)在胸腺细胞活化后凋亡过程中的表达特性进行了观察分析,结果表明:经ConA活化后胸腺细胞经历活化后凋亡,表现为DNA梯状片段产生的时相后移,活化后期细胞TUNEL染色阳性。经FACS门技术分析确认,PF18-3分子在亚二倍体高含量的凋亡胸腺细胞亚群特异表达。与凋亡相关的Fas和膜磷脂易位表达的动态比较提示,PF18-3分子与前两类分子不同,可能为新型胸腺细胞凋亡相关分子。
- 王宏肖士云庞学文陈慰峰
- 关键词：胸腺细胞
- 小鼠胸腺基质细胞诱导早期T细胞株分化的研究被引量：3
- 1998年
- 利用 1株处于CD3-CD4-CD8-阶段的病毒转化早期T细胞株C32 0研究了体外胸腺基质细胞系对早期T细胞TCR CD3复合体表达的诱导作用 ,并对参与此作用的细胞表面信号分子进行了初步鉴定 .结果显示 :在体外胸腺基质细胞系通过与C32 0细胞 细胞间相互作用 ,诱导其表面TCR_CD3分子的表达 .进一步的研究表明 ,对TCR的诱导主要作用于其转录后阶段 ;对CD3的诱导涉及转录前后两个阶段 .单抗阻断实验显示 ,抗基质细胞单抗RS2 1_C6对C32 0的上述分化表达有明显阻断作用 ,说明其识别分子参与诱导分化过程 .免疫共沉淀和蛋白印迹杂交鉴定此分子为 42ku 。
- 余青王宏陈慰峰
- 关键词：诱导分化免疫
