王岩
- 作品数：13 被引量：43H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市高等教育教学改革研究项目重庆市教育科学规划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 三七皂苷R_1通过雌激素受体调节ATF6/Akt信号通路减轻OGD/R所导致的神经元损伤被引量：21
- 2017年
- 三七皂苷R_1(notoginsenoside R_1,NGR_1)是传统中药三七的重要活性成分,也是雌激素受体激动剂。因其蕴含抗炎、抗氧化、抗凋亡等多种功能,故在疾病治疗中被普遍运用。为阐明NGR_1在缺血缺氧性脑病(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)中的潜在神经保护作用机制,该研究采用原代皮层神经元建立氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型,并且给予NGR_1及雌激素受体阻断剂ICI-182780处理,然后分别采用MTT,LDH和Hochest 33342染色检测神经元存活率、细胞膜完整性和凋亡,Western blot检测抗凋亡通路ATF6α,p-Akt,Akt蛋白及凋亡相关蛋白Bax,Cleaved Caspase-3的表达。结果显示:神经元在OGD/R损伤后,其细胞存活率明显下降(P<0.05)、细胞膜相对完整性显著降低(P<0.05)、细胞凋亡加重(P<0.05),ATF6α,p-Akt表达下调且促凋亡蛋白Bax,Cleaved Caspase-3表达增加(P<0.05)。NGR_1处理后能够减轻OGD/R造成的神经元细胞损伤,上调ATF6α表达、促进Akt磷酸化并且减少Bax,Cleaved Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),但是,NGR_1的这些神经保护性作用能够被雌激素受体阻断剂ICI-182780阻断。研究结果证实:NGR_1在缺血缺氧情况下对神经元具有保护性作用,该保护作用可能是NGR_1通过雌激素受体调控ATF6/Akt信号通路实现的。
- 侯倩伶王岩李英博胡雪莲王莎莉
- 关键词：三七皂苷R1缺血缺氧性脑病
- 4-苯基丁酸钠通过抑制内质网应激减轻皮层神经元氧糖剥夺/再灌注损伤被引量：4
- 2018年
- 4-苯基丁酸钠(4-phenylbutyric acid,4-PBA)是协助内质网中蛋白质转录后修饰和折叠的分子伴侣,故可减轻非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)及其介导的细胞凋亡。既往研究表明,4-PBA可以减轻脑组织的缺血性损伤,但采用原代皮层神经元构建氧糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型,来研究4-PBA对神经元损伤的保护作用及其机制尚未见报道。本文采用原代培养的皮层神经元OGD/R损伤模型,同时给予4-PBA处理,探讨4-PBA对OGD/R诱导的神经元内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的作用及其机制。分别采用MTT、LDH和Hoechst 33342染色法检测神经元存活率、细胞膜完整性和细胞凋亡情况。Western印迹检测ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78),以及肌醇必需酶1(inositol-requiring enzyme 1,IRE1)通路相关蛋白质的表达。Western印迹结果显示,在OGD/R后0~48 h,GRP78的表达较对照组明显升高。MTT、LDH漏出率和Hoechst 33342染色法检测显示,4-PBA显著改善OGD/R所导致的神经元存活率下降、LDH漏出率升高和细胞凋亡增加,且具有明显的剂量依赖性。通过Western印迹检测发现,4-PBA显著逆转OGD/R所致GRP78蛋白表达水平的上调。此外,对肌醇必需酶1通路相关蛋白质的检测显示,4-PBA下调氧糖剥夺/再灌注组神经元p-IRE1和p-JNK的表达,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达。上述研究结果表明,4-PBA在氧糖剥夺/再灌注情况下对神经元具有保护作用,该保护作用可能是通过抑制肌醇必需酶1信号通路介导的非折叠蛋白反应和内质网应激实现的。
- 谭婷王岩涂柳陈笛
- 关键词：内质网应激
- VPA诱导的自闭症青年小鼠海马中PLCγ1/IP3R/CaMKⅡ蛋白表达和树突棘密度的变化被引量：2
- 2020年
- 目的探讨丙戊酸钠(VPA)诱导的自闭症模型小鼠大脑海马区磷脂酶C-γ1(PLCγ1)/肌醇三磷酸受体(IP3R)/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)表达的改变和树突棘密度的异常。方法 C57孕小鼠于孕10、12 d分别腹腔注射丙戊酸钠300 mg/kg或生理盐水,其仔鼠分别为自闭症谱系障碍模型鼠(VPA组)或正常对照鼠(CON组)。Western blot检测两组仔鼠大脑海马区PLCγ1、IP3R、CaMKⅡ和突触后致密物-95(PSD95)的表达水平。高尔基染色法检测2组仔鼠大脑海马区树突棘的变化。结果 Western blot检测结果显示:与正常对照组相比,VPA组小鼠大脑海马区PLCγ1,IP3R,CaMKⅡ和PSD95的表达均下降(P<0.01)。高尔基染色结果显示:与正常对照组相比,VPA组小鼠大脑海马区树突棘密度减少(P<0.01)。结论 VPA诱导的自闭症模型小鼠大脑海马区的PLCγ1/IP3R/CaMKⅡ表达下降,同时伴随着海马CA1区锥体神经元树突棘密度降低,PSD95的表达减少。
- 赵雨王岩郑文霞胡宇玲汪小青陈笛李英博杨戎王莎莉
- 关键词：自闭症磷脂酶C-Γ1树突棘
- 未成熟钠通道调控大鼠胚胎神经干细胞分化被引量：1
- 2015年
- 钠通道在各类神经元上高表达,参与细胞多种生理功能的调节,是神经元实现功能活动的基本单位.未成熟神经元上钠/钙通道所诱发和自发的电位活动对后期的发育成熟至关重要.然而,发育中的钠通道是否参与神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化的调控尚不清楚.本研究证明,未成熟的钠通道参与NSCs分化调控.Western印迹结果显示,在分化第1,3,5,7 d的NSCs上钠通道和胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白表达与分化时间正相关.免疫组化结果发现,与对照组比较,加入电压门控钠通道阻断剂TTX可明显下调Neu N、GFAP和Gal-c在NSCs中的表达(P<0.05),提示钠通道参与NSCs分化的调控.当采用veratridine激动钠通道后,激光共聚焦检测到细胞内Ca^(2+)浓度明显升高,免疫组化和Western印迹结果显示细胞内Ca^(2+)浓度明显升高,p-ERK表达量明显上调;相反,TTX可明显阻断Veratridine所引起的细胞内Ca^(2+)浓度上调,并使p-ERK峰值明显降低和延后(P<0.05).研究结果表明,未成熟钠通道可通过激活ERK信号途径促进NSCs的分化.钠通道的这种作用可能是由钙离子介导的,其详尽机制有待进一步研究.
- 李文晶王岩姜英虹赵香琴王亚平王莎莉
- 关键词：钠通道神经干细胞分化
- CTNND2基因敲除对小鼠学习记忆的影响被引量：4
- 2021年
- 目的:探讨连环蛋白δ2(CTNND2)基因敲除对小鼠学习记忆功能的影响及可能机制。方法:聚合酶链式反应(PCR)验证野生型(WT)和CTNND2^(-/-)两组小鼠基因型。Morris水迷宫检测两组小鼠空间学习记忆功能。高尔基染色法检测两组小鼠海马区神经元树突棘密度的变化。Western Blot检测两组小鼠海马突触相关蛋白磷酸化突触素蛋白(P-Syn)、富含谷氨酸/亮氨酸/赖氨酸/丝氨酸蛋白(ELKS)和突触后致密蛋白95(PSD95)的表达水平。结果:与WT小鼠相比,水迷宫实验结果显示CTNND2^(-/-)小鼠逃逸潜伏期明显延长(P<0.05),通过平台的次数显著减少以及停留在目标象限的时间明显缩短(P<0.05),但是游泳速度不变(P>0.05)。高尔基染色结果显示CTNND2^(-/-)小鼠海马区神经元树突棘密度降低(P<0.05)。Western Blot检测结果显示CTNND2^(-/-)小鼠海马区突触相关蛋白p-Syn、ELKS、PSD95表达均下降(P<0.05).结论:CTNND2基因敲除后,可能通过p-Syn、PSD95和ELKS蛋白表达下调阻碍了小鼠海马区神经元树突以及突触发育,诱发其结构和功能障碍,这可能是CTNND2^(-/-)小鼠学习记忆功能损伤的机制之一。
- 徐蔓王潇娅王路义邓静王岩李英博王莎莉
- 关键词：学习记忆树突棘突触小鼠
- 阻断TRPC3通道加重新生大鼠缺氧缺血性脑损伤
- 2017年
- 经典瞬时受体电位3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)通道是胎儿期和围生期中枢神经系统中广泛表达的非特异性阳离子通道,参与体内众多生理和病理过程。有研究证明,TRPC3通道是细胞内钙稳态的重要调节者,调节包括细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)通路在内的多条钙敏感胞内信号转导通路的活性,最终影响神经元的生存或死亡。但TRPC3通道在新生动物缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型中的作用及其机制尚未见报道。本研究取新生7 d的SD大鼠,采用右侧颈总动脉结扎和缺氧(8%O2)2.5 h制备HIBD模型,观察腹腔注射选择性TRPC3阻断剂pyr3(5 mg/kg和20 mg/kg)对缺氧缺血处理后,急性期和长期神经行为学及脑组织损伤程度的影响。神经功能缺损评分和平衡木实验结果显示,用pyr3特异性阻断TRPC3可恶化缺氧缺血大鼠的神经行为学障碍;脑组织含水量检测、TTC染色和患/健侧脑重比等结果显示,pyr3可加重脑水肿,增加脑组织梗死区体积和加重脑萎缩程度。Western印迹实验显示,缺氧缺血可以导致患侧脑组织ERK1/2磷酸化水平一过性升高,阻断TRPC3可以显著抑制ERK1/2的磷酸化,并可上调促凋亡蛋白BAX和下调抗凋亡蛋白BCL-2的表达。上述结果证明,阻断TRPC3通道可以加重新生大鼠的缺氧缺血性脑损伤,其机制可能与其对ERK信号通路活性的调节作用有关,因此可能成为HIBD治疗的潜在作用靶点。
- 赵琪涂柳王岩陈笛
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤细胞外信号调节激酶凋亡
- TRPC通道对PC12细胞缺氧缺糖再灌注后氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 瞬时受体电位C通道(transient receptor potential canonical,TRPC)属于瞬时受体电位(TRP)离子通道家族成员之一,与Ca2+调控及氧化应激关系密切.然而,TRPC通道在缺血缺氧性脑损伤中的作用仍有争议.本实验采用MTT法、台盼蓝排斥实验、LDH漏出实验联合Annexin/PI染色流式分析等显示,当采用通道阻断剂—SKF96365特异阻断TRPC通道时,PC12细胞对缺氧缺糖再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD-R)引起的损伤变得更敏感,细胞凋亡增加.尽管同时采用SKF96365、NMDA受体、AMPA受体和L-型钙通道阻断剂可引起细胞损伤和死亡减弱,但仍呈现明显的SKF96365浓度依懒性,提示TRPC通道参与细胞对缺氧缺糖再灌注耐受的调节,具有保护作用.钙指示剂Fluo-3AM荧光标记结合激光共聚焦显微镜分析显示,SKF96365可明显降低缺氧缺糖再灌注后细胞内的Ca2+浓度.总之,实验结果提示,TRPC通道对缺氧缺糖再灌注引起的细胞损伤和凋亡具有保护作用,其机制可能涉及TRPC通道对细胞内钙浓度的调节,详尽机制有待进一步研究.
- 王岩王莎莉赵香琴陈笛
- 关键词：PC12细胞
- 混合式教学在实验动物福利教学中的应用被引量：3
- 2022年
- 医学实践中会使用大量的实验动物,如何将动物福利相关知识与理念扎根于学生心中,并使之在实验课堂中遵循动物福利是当前实验动物教学中的关键点。我们针对动物福利采取线上线下混合式教学模式,通过多种教学改革手段,建立行之有效的教学策略,实现专业课程和课程思政的有机融合,从而培养学生善待动物、尊重生命的科学素养。
- 吕明其余丽娟王岩赵婷婷廖红师海蓉李英博
- 关键词：混合式教学动物福利实验动物
- TRPC通道经Ca2+调控mTOR信号通路减轻OGD神经元的损伤
- 新生儿缺氧缺血性脑病（Hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是指各种围生期窒息引起的部分或完全缺氧，脑血流减少或暂停而导致胎儿或新生儿脑损伤。HIE最直接和最严重的后果是神经元死亡，保护...
- 王岩
- 关键词：缺血缺氧性脑损伤MTOR信号通路
- 基于虚拟仿真系统构建的新型评价体系在机能学实验教学中的应用被引量：4
- 2022年
- 目的探索基于虚拟仿真系统的新型评价体系在机能学实验教学评价中的应用效果。方法收集2019至2020学年学生学习数据,对比分析在新型教学评价标准下,使用虚拟仿真教学系统对教学目标达成的影响;问卷调查学生对虚拟仿真教学系统的评价。采用SPSS 22.0进行卡方检验。结果使用新型评价标准的学生虚拟学习成绩优秀比率为75.49%(308/408),而未使用学生的成绩优秀率仅为32.22%(135/419),差异有统计学意义(P<0.01)。不同教学目标要求学习虚拟仿真项目数为4、11、14,对应的学生虚拟仿真系统成绩优秀率分别是99.19%(246/248)、93.14%(380/408)、84.72%(488/576),差异有统计学意义(P<0.01)。93.8%(348/371)的学生认为虚拟仿真系统的学习可帮助提高实验成功率,93.26%(346/371)的学生认为提高了实验课上分析和处理突发问题的能力。结论基于虚拟仿真系统构建的新型评价体系可促进机能学实验教学质量的提高。
- 赵婷婷余丽娟王岩耿艳清余华荣刘利舲刘利舲
- 关键词：机能学
