王建波
- 作品数：10 被引量：40H指数：4
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家自然科学基金山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病视网膜病变与细胞凋亡关系的研究进展被引量：7
- 2005年
- 糖尿病视网膜病变与细胞凋亡的研究近几年有许多相关文献发表，研究结果表明，糖尿病视网膜病变的发生发展与细胞凋亡有着密切的联系。在细胞凋亡方面的研究，大体可以分为内皮细胞、周细胞、神经细胞三大研究方面。细胞凋亡的研究为从根本上了解糖尿病视网膜病变的发病机制提供了新的思路及方法，为治疗糖尿病视网膜病变开辟了新的途径。
- 李光达王建波牛膺筠
- 关键词：糖尿病视网膜病变细胞凋亡发病机制内皮细胞神经细胞
- 低氧预适应对新生大鼠视网膜神经元谷氨酸损伤的保护作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨低氧预适应对大鼠视网膜神经元谷氨酸损伤的保护作用。方法建立视网膜神经元低氧预适应模型和谷氨酸损伤模型。Westernblot、免疫荧光检测低氧预适应后不同时段HIF-1α、EPO蛋白表达情况;MTT比色法评价正常对照组、低氧预适应组、谷氨酸组、低氧谷氨酸组神经元活力改变。结果低氧预适应后HIF-1α、EPO蛋白表达一过性增高。免疫荧光染色显示低氧预适应后神经元呈现HIF-1α、EPO蛋白的阳性表达。MTT法测定细胞活力结果显示,视网膜神经元经谷氨酸损伤后细胞活性降低,而低氧谷氨酸组细胞活性显著高于谷氨酸组(P<0.01)。结论低氧预适应能够上调神经元HIF-1α、EPO蛋白的表达,从而增强神经元对谷氨酸损伤的耐受能力,起到神经保护作用。
- 曲虹牛膺筠王建波
- 关键词：低氧预适应视网膜神经元谷氨酸
- 糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及氨基胍的作用被引量：2
- 2006年
- 目的:观察糖尿病大鼠视网膜组织学变化、神经细胞凋亡现象以及氨基胍的治疗作用。方法:实验于2003-09/2004-06在青岛大学医学院附属医院眼科病理室进行。①取健康成年Wistar大鼠60只单纯随机分为正常对照组和糖尿病组各30只。糖尿病组30只大鼠一次性左下腹腔内注射60mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病模型,有24只大鼠模型建立成功并随机均分为糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组(造模后氨基胍按1g/L加入大鼠饮水中,给药量150mg/(kg·d))。②于饲养1,3,6个月时,随机选取糖尿病未治疗组、氨基胍治疗组各4只和对照组大鼠10只处死,光镜下观察视网膜厚度和神经节细胞数目变化。以TUNEL法荧光显微镜下观察进行视网膜神经细胞凋亡的原位检测。结果:54只大鼠进入结果分析。①视网膜厚度:饲养1个月时3组差异不显著(P>0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组视网膜变薄,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组(P<0.001)。②神经节细胞数目:饲养1个月时3组差异不显著(P>0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组细胞数目少,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组[3个月:(273.88±1.28),(261.83±1.34)个/mm2;6个月:(231.95±1.36),(207.40±1.57)个/mm2,P<0.001]。③TUNEL阳性细胞数:饲养1个月时3组未发现有凋亡细胞的阳性表达。饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组阳性细胞数增加,但氨基胍治疗组少于糖尿病未治疗组[3个月:(60.13±0.40),(67.95±0.50)个/mm2;6个月:(105.15±0.43),(125.08±0.27)个/mm2;P<0.001]。结论:早期糖尿病大鼠视网膜出现光镜组织学改变,细胞凋亡是糖尿病大鼠视网膜病变神经细胞丧失的主要方式,氨基胍可抑制神经细胞的凋亡。
- 曲虹牛膺筠刘夫玲李光达王建波
- 关键词：糖尿病视网膜病变细胞凋亡
- 低氧诱导因子-lα在Rb中的表达及与肿瘤血管形成的关系被引量：2
- 2007年
- 目的探讨低氧诱导因子-lα(HIF-1α)在视网膜母细胞瘤(Rb)中的表达及其与血管生成的关系。方法利用免疫组织化学方法检测60例Rb、10例正常视网膜组织中HIF-1α的表达,并用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞,计数Rb中微血管密度(MVD)。结果HIF-1α在正常视网膜组织中未见表达,主要表达于Rb细胞浆及胞核。HIF-lα在Rb组中阳性表达率为56.7%(34/60),明显高于正常对照组(P<0.01);Rb组中MVD平均为33.59±1.15,正常对照组为7.42±0.95(t=17.499,P<0.01)。HIF-lα与MVD的表达呈显著正相关(r=0.439,P<0.01)。结论HIF-lα在视网膜母细胞瘤中的表达与肿瘤的新生血管形成有关。提示HIF-lα的表达水平可用于预测Rb的生物学行为,可作为Rb治疗的新靶点。
- 汪晓磊牛膺筠刘夫玲王建波
- 关键词：视网膜母细胞瘤低氧诱导因子-1Α微血管密度
- 大鼠糖尿病视网膜病变模型建立及超微结构观察被引量：13
- 2007年
- 目的建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变模型并观察视网膜微血管及视细胞的超微结构,评价其应用价值。方法选择健康成年雄性清洁型SD大鼠60只,随机分为正常对照组、糖尿病1个月组、糖尿病3个月组、糖尿病6个月组。大鼠一次性腹腔注射STZ诱发糖尿病模型,观察各组大鼠的生理指标,并对糖尿病模型大鼠进行视网膜组织学检查及微血管超微结构观察。结果STZ腹腔注射糖尿病大鼠成模率为100%,死亡率为4.4%。早期糖尿病大鼠视网膜厚度变薄,视细胞数目随月龄增加而逐渐减少。毛细血管内皮细胞水肿,线粒体肿胀。毛细血管基底膜增厚,管腔狭窄,甚至闭塞。视细胞外节膜盘间隙扩大,排列紊乱。内节线粒体水肿,排列不规则。结论STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜病变模型成模率高、方法可靠;糖尿病大鼠视网膜病变在发生发展、病理变化等方面与人类糖尿病视网膜病变具有相同或相似的特征,应用此模型可对糖尿病视网膜病变的病理学、发病机制和药物治疗等多方面进行研究。
- 孟旭霞牛膺筠曲虹王建波
- 关键词：糖尿病视网膜病变
- 新生大鼠视网膜神经元的原代培养与观察被引量：4
- 2006年
- 目的：建立新生大鼠视网膜神经元体外培养的有效方法。方法：取出生后1～3d的Wistar大鼠视网膜，胰蛋白酶＋依地酸（EDTA）消化制成单细胞悬液，接种于置有包被多聚赖氨酸（poly-L-lysine）玻片的24孔培养板中培养，利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察；并以免疫细胞化学技术对视网膜神经元进行染色。结果：在多聚赖氨酸上培养的视网膜神经元生长良好，部分细胞伸出突起，且有些突起相互连接。免疫细胞化学染色显示，培养的细胞大多数抗神经丝蛋白（NF）抗体反应阳性。胰蛋白酶＋EDTA联合消化能使视网膜细胞很好得分离，获得视网膜单细胞悬液。结论：酶消化法原代培养视网膜神经元有较好的视网膜神经元生长率；胰蛋白酶＋EDTA联合消化较单独用胰蛋白酶消化效果好。
- 刘夫玲牛膺筠王建波曲虹张蕾
- 关键词：视网膜神经元细胞培养神经丝蛋白
- 缺氧对视网膜Müller细胞促红细胞生成素mRNA和蛋白表达的影响被引量：4
- 2006年
- 目的探讨缺氧条件下促红细胞生成素(EPO)mRNA及蛋白在体外培养的Müller细胞的表达情况。方法胰酶消化新生大鼠视网膜组织制成单细胞悬液,机械震荡、吹打法分离纯化视网膜Müller细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学方法对缺氧条件下视网膜Müller细胞EPO基因和蛋白的表达进行测定。结果成功获得视网膜Müller细胞,传代后95%以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性。EPO蛋白的阳性染色位于视网膜Müller细胞的细胞浆及突起上。在正常的视网膜Müller细胞中仅见微弱的EPO mRNA和蛋白表达,而缺氧后表达明显上调,且呈时间依赖性。结论Müller细胞在缺氧条件下EPO mRNA和蛋白表达增强,EPO表达水平的升高可能是缺氧性视网膜病变的神经保护因素之一。
- 刘夫玲牛膺筠周占宇王建波赵宝春张蕾
- 关键词：红细胞生成素细胞低氧逆转录聚合酶链反应
- 氨基胍对糖尿病大鼠视网膜神经细胞改变及caspase-3表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察早期糖尿病大鼠视网膜神经细胞结构变化、caspase-3表达及氨基胍的治疗作用。方法健康成年Wistar大鼠50只,12只作为正常对照组,其他大鼠链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射建立糖尿病(DM)大鼠模型,并随机分为氨基胍治疗组及DM模型组,每组又按时间分为1、3、6个月组。透射电镜下观察视网膜超微结构改变,免疫组织化学法检测视网膜组织caspase-3蛋白的表达变化。结果电镜变化:模型1个月组内核层细胞胞质出现不均匀现象;3个月组内核层细胞核个别染色质出现浓缩现象,神经节细胞亦出现超微结构的变化;6个月组上述变化进一步加重,并可在内核层及神经节细胞层发现个别凋亡小体,氨基胍治疗组变化较糖尿病组轻微。免疫组织化学表达:模型3个月组caspase-3蛋白开始表达,主要见于神经节细胞层;模型6个月组阳性表达进一步增加,扩展到内核层。氨基胍组caspase-3表达变化规律与模型组基本一致,治疗组3个月、6个月阳性表达均分别低于未治疗组(P<0·05)。结论早期DM大鼠视网膜出现了电镜组织学改变,caspase-3参与了糖尿病视网膜病变的发病机制。氨基胍对糖尿病视网膜病变有一定的治疗作用。
- 曲虹牛膺筠王建波李光达刘夫玲
- 关键词：糖尿病视网膜病变电镜氨基胍
- 过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞转录和表达促红细胞生成素的研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究不同浓度的过氧化氢诱导人视网膜色素上皮（RPE）细胞转录和表达促红细胞生成素（EPO）的现象并探讨其发生机制。方法原代培养人胚胎RPE细胞，经鉴定后，分别应用0、200、400、600、800μmol／L浓度的过氧化氢作用6h，造成RPE细胞不同程度的氧化应激，测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量；采用半定量RT-PCR法检测RPE细胞氧化应激中EPO在转录水平的表达变化；免疫组织化学法检测EPO在RPE细胞中的表达部位和表达变化。结果过氧化氢导致RPE细胞内SOD含量下降，MDA含量升高。半定量RT-PCR法检测结果显示过氧化氢诱导EPOmRNA表达量增加，并在一定范围内随着过氧化氢浓度的增高而增加，在600μmol／L过氧化氢组EPOmRNA表达量达最高值，之后随着浓度的上升而下降。免疫组织化学染色法检测结果显示过氧化氢可以诱导人RPE细胞EPO表达增强，并在一定范围内随着过氧化氢浓度的增高而增强，在600μmol／L过氧化氢组EPO表达量达到高峰。结论过氧化氢导致的氧化应激可以诱导人RPE细胞转录和表达EPO，EPO的表达量与RPE存活和耐受程度有关。
- 赵颖牛膺筠周占宇刘夫玲王建波徐静公慧敏
- 关键词：色素上皮细胞氧化性应激红细胞生成素
- rhEPO对光损伤诱导的RPE细胞Caspase-3表达的作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)抗光损伤的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的具体作用机制。方法取成人ARPE-19细胞株传代培养的2～5代细胞建立光损伤模型,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组织化学法定量检测不同含量EPO干预治疗前后RPE细胞Caspase-3表达的变化,并添加特异性Jak2激酶抑制剂AG490和PKB抑制剂CTMP,检测RPE细胞Caspase-3表达的变化。结果重组人促红细胞生成素(rhEPO)可明显减少RPE细胞光损伤后Caspase-3的表达,以40U/mlEPO组结果最明显;加入AG490,EPO对Caspase-3的抑制作用被阻断;加入CTMP,Caspase-3的表达又增强。结论rhEPO抗光损伤诱导的RPE细胞凋亡作用机制之一可能是抑制Caspase-3的表达,Jak2的PIK3/PKB途径可能是EPO抑制Caspase-3的一条作用途径。
- 孟岩牛膺筠曲虹王建波
- 关键词：视网膜色素上皮光损伤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
