王晋蜀
- 作品数：14 被引量：24H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 在体内外模拟的乳腺脂肪微环境中研究BMP9对乳腺癌细胞生长的影响被引量：1
- 2016年
- 骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins,BMP9)是骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)家族的一员,具有多种生物学功能。本实验主要是从体内、外两个层面模拟的脂肪微环境中,研究BMP9对乳腺癌细胞生长的影响。将前脂肪细胞3T3-L1诱导为成熟脂肪细胞后,利用Transwell小室共培养技术,将其分别与MDA-MB-231细胞、感染腺病毒AdGFP的对照MDA-MB-231/AdGFP细胞、感染腺病毒AdBMP9的MDA-MB-231/AdBMP9细胞进行共培养。针对共培养体系中的肿瘤细胞,采用EdU实验检测增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot检测cyclin D1、c-myc蛋白水平的变化。将乳腺癌细胞与脂肪细胞以1:5的比例混合后,注射到裸鼠皮下,监测瘤体的生长并绘制生长曲线;取离体肿瘤组织进行免疫组化染色,检测瘤体中ki67、cyclin D1和c-myc的表达情况。结果显示,显微镜下可以观察到诱导后的3T3-L1细胞出现明显脂滴,能被油红O染色,证明成熟脂肪细胞诱导成功;AT-PCR及Western blot证实BMP9过表达成功;BMP9可以抑制共培养体系中肿瘤细胞的增殖(p<0.05),使其周期阻滞在G_2/M期(p<0.05),并降低cyclin D1和c-myc的蛋白水平(p<0.05)。动物移植瘤实验发现,BMP9高表达实验组的瘤体明显小于空白组和载体感染对照组;瘤体免疫组化结果显示,实验组ki67、cyclin D1和c-myc的表达均明显下调。本研究证明在体内、外模拟的脂肪微环境中,BMP9可以抑制乳腺癌细胞的增殖,且这种作用可能是通过下调cyclin D1和c-myc来实现的。
- 王婷王晋蜀张志慧姜亚运夏菁苟理尧刘梦瑶张彦
- 关键词：乳腺肿瘤细胞生长
- 未来战争中健康教育对策初探
- 1995年
- 本文介绍了在近年两次预设的未来战争的演习中实施健康教育的方法和手段，并结合实践对未来战争中的健康教育对策作了初步探讨。
- 王晋蜀袁健贺拴友范勇
- 关键词：健康教育未来战争
- 在体外模拟的骨微环境中下调BMP9对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及其可能机制被引量：1
- 2013年
- 探讨在体外模拟的乳腺癌骨转移微环境中,采用RNAi技术下调骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)基因对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及可能机制。用Transwell小室将空白组SK-BR-3细胞、感染腺病毒AdRFP的对照组SK-BR-3/RFP细胞、感染腺病毒AdsiBMP9的实验组SK-BR-3/siBMP9细胞分别与人骨髓基质HS-5细胞间接共培养后,MTT增殖实验、划痕愈合实验、Transwell迁移实验分别检测下调BMP9对SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响;RT-PCR和Western blot法检测相关因子的变化。结果显示,在共培养体系中,SK-BR-3/siBMP9组的BMP9显著低于对照组(P<0.05);下调BMP9可有效促进SK-BR-3/siBMP9细胞增殖(P<0.05),SK-BR-3/siBMP9细胞的划痕愈合率、穿膜细胞数也明显升高(P<0.05);SK-BR-3/siBMP9组血管内皮细胞生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达均显著上调(P<0.05),且Western blot结果显示p-AKT显著上调(P<0.05)。综上,在骨转移微环境中,干扰BMP9表达可促进人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖及迁移,其作用机制可能与上调VEGF、CTGF表达有关,且这个过程可能涉及PI3K/AKT通路的激活。
- 陈莹莹王维刘月红万绍恒张志慧王婷王晋蜀张彦
- 关键词：乳腺肿瘤共培养
- 抑制和激活Wnt信号通路对甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨抑制和激活Wnt信号通路在甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化中的作用和可能机制。方法:用5、10和20μmol/L的Wnt信号通路抑制剂XAV-939作用于HL-60细胞3 d,用10、20和30mmol/L的Wnt信号通路激活剂Li Cl作用于HL-60细胞1 d,应用RT-RCR和Western blot检测Wnt信号通路的下游靶点基因和蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD14的表达和细胞早期凋亡,筛选最佳抑制浓度和激活浓度。然后用10μmol/L NSC67657分别对已经抑制及激活了的Wnt通路的HL-60细胞作用3 d。分析比较空白对照组、NSC67657单独处理组和激活/抑制剂作用后NSC67657处理组的细胞表面抗原CD14和Wnt下游靶点蛋白的表达水平。结果:20μmol/L XAV-939和20 mmol/L Li Cl能分别有效抑制和激活HL-60细胞Wnt信号通路,分别显著下调和上调cyclin D1,TCF1,c-Jun基因(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达,且在该条件下CD14^+HL-60细胞不超过1%,没有早期凋亡发生;NSC67657单独作用HL-60细胞能下调Wnt通路下游靶点cyclin D1、TCF1和c-Jun的蛋白表达(P<0.05),CD14^+细胞占(62.13±9.44)%;NSC67657作用于经XAV-939预处理的细胞,可使CD14^+细胞达到(84.17±5.39)%,cyclin D1,TCF1和c-Jun蛋白表达比单独NSC67657处理组降低更显著(P<0.01);而NSC67657作用经Li Cl预处理的细胞,可使CD14^+细胞减少至(33.99±8.37)%,cyclin D1,TCF1和c-Jun蛋白表达较非处理组下降明显较低(P<0.05),但高于单独使用NSC67657处理组(P<0.05)。结论:20μmol/L XAV-939和20 mmol/L Li Cl作为HL-60细胞Wnt信号通路的有效抑制剂和激活剂能够分别显著下调和上调Wnt下游通路靶点基因和蛋白表达,其干预后对NSC67657诱导细胞分化的影响提示Wnt信号通路可能在NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化中起到关键作用。
- 王伟佳张秀明张彦王晋蜀
- 体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨被引量：1
- 2014年
- 目的 :采用体外共培养技术模拟乳腺脂肪微环境,研究人骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其可能的机制。方法 :将重组腺病毒Ad-BMP9(以Ad-GFP作为对照)导入MDA-MB-231细胞中,构建MDA-MB-231/Ad-BMP9重组细胞,再与前体脂肪细胞3T3-L1在Transwell共培养体系中间接共培养3 d。荧光显微镜下观察共培养体系中重组腺病毒Ad-BMP9在MDA-MB-231细胞中的感染效率,并通过RT-PCR和蛋白质印迹法验证BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达。然后,分别采用MTT法、FCM法、划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测共培养的2种细胞中增殖和转移相关因子瘦素(leptin)的表达水平变化;细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测MDA-MB-231细胞中leptin受体OB-R及leptin信号通路关键分子的表达水平变化。结果 :荧光显微镜下观察到重组腺病毒Ad-BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中感染效率为70%左右,且BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达(P<0.05)。在模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移受到明显抑制(P<0.05),并且细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.001)。过表达BMP9后,前体脂肪细胞3T3-L1中leptin表达显著下调(P<0.05),而MDA-MB-231细胞中磷酸化的STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)和磷酸化的ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)水平均明显下调(均P<0.05)。结论 :模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与前体脂肪细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,且该抑制作用可能与leptin经典信号通路有关。
- 张志慧王维陈莹莹王婷王晋蜀姜亚运张彦
- 关键词：骨形态发生蛋白质类脂细胞细胞增殖
- 过表达β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)促进人宫颈癌Caski细胞的增殖和迁移被引量：4
- 2016年
- 目的探讨β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)的高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖和迁移的影响。方法含ICAT基因腺病毒(Ad ICAT)感染Caski细胞,采用实时定量PCR检测ICAT mRNA水平,Western blot法检测ICAT蛋白水平;MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,TranswellTM小室迁移实验检测细胞迁移能力。结果 Ad ICAT感染后,Caski细胞的ICAT mRNA和蛋白水平均显著增加;过表达ICAT后,促进Caski细胞的增殖,S期细胞比例明显增加,细胞迁移能力增强。结论 Caski细胞过表达ICAT后,促进其增殖和迁移。
- 姜亚运王婷王晋蜀夏菁苟理尧刘梦瑶张彦
- 关键词：CASKI细胞迁移
- ICAT干扰慢病毒表达载体构建及稳转HL60细胞株的建立被引量：1
- 2016年
- 目的构建ICAT基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的HL60细胞系。方法人工设计、合成针对ICAT基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与PG-p1-VSVG、PG-p1-REV、PG-p1-RRE共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染HL60细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western Blot技术检测HL60稳定细胞中ICAT基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对ICAT基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为2×10^8 TU/mL;建立稳定转染的HL60细胞株。有效干扰验证显示,shICAT能明显降低ICAT的mRNA及蛋白水平（P〈0.001）。结论成功构建ICAT基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定干扰ICAT表达的HL60细胞株。
- 王晋蜀王伟佳王婷张彦
- 关键词：RNA干扰HL60细胞
- 新甾醇类药物NSC67657诱导白血病细胞HL-60单核系分化及其机制研究
- 目的：构建新甾醇类药物NSC6767诱导白血病细胞HL-60向单核系分化的细胞模型，检测药物对细胞的生物学行为的影响、探讨其可能的分子机制。 方法：以10μmol/L NSC67657药物处理HL-60细胞5 d构建细...
- 王晋蜀
- 关键词：白血病药物化疗疗效分析
- 试论卫生影视在部队健康教育中的作用被引量：1
- 1997年
- 试论卫生影视在部队健康教育中的作用（７３００２０）兰州军区后勤部卫生防疫大队王晋蜀近年来，卫生影视做为传播健康教育知识的重要手段之一，在部队健康教育工作中应用越来越广，其发挥的作用也越来越大。现结合工作实践，就卫生影视在部队健康教育中的作用试论如下：...
- 王晋蜀
- 关键词：健康教育知识影视
- 筑好健康教育阵地 拓宽健康教育思路被引量：2
- 1996年
- 筑好健康教育阵地 拓宽健康教育思路兰州军区后勤部卫生防疫大队徐冬梅，王晋蜀，李庆我队担负兰州军区《人民军队》报“部队卫生”专版（以下简称“专版”）的编辑工作，自１９８６年开办以来，面向驻守在西北五省区的广大指战员开展健康教育，已走过了十个春秋，每年发...
- 徐冬梅王晋蜀李庆
- 关键词：指战员卫生行为部队卫生阵地
