王鸽
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 不同激活剂对兔卵母细胞孤雌激活效果的研究
- 2014年
- 目的：探寻一种稳定有效的卵母细胞激活方法,为兔体细胞核移植提供实验基础。方法：兔超排后获得卵母细胞体外成熟22-24 h,经脱颗粒处理后采用不同激活剂和不同处理时间进行激活,体外培养5-7 d,观察胚胎发育与囊胚形成情况。结果：卵母细胞经过离子霉素作用5 min或者乙醇作用7 min均能被激活,但两者卵裂率、囊胚率都较低;乙醇和离子霉素分别与6-DMAP联合激活兔卵母细胞时,离子霉素＋6-DMAP处理组卵裂率（73.7%）显著高于乙醇＋6-DMAP处理组（38.5%,P〈0.05）;与离子霉素联合激活时,2.0 mmol/L的6-DMAP处理5.0 h时的卵裂率和囊胚率最高,达75.6%和45.5%。结论：激活方法对兔卵母细胞孤雌激活率的影响很大,不同激活剂的联合应用及激活剂的作用时间对兔卵母细胞的激活存在显著差异。
- 王鸽张君涛张胜军魏莉莉曹书郡徐秋勤柳文龙刘童张志平
- 关键词：孤雌激活乙醇
- 饲养层密度对兔类ES细胞分离培养的影响被引量：1
- 2013年
- 探讨饲养层细胞接种密度对兔类ES细胞分离培养影响,筛选适合兔类ES细胞分离培养最适饲养层密度。将兔囊胚分别接种到密度为10×103、20×103和40×103个·cm-2的小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonicfibroblast cell,MEF)饲养层上,观察兔类ES细胞贴壁和克隆生长情况,并对所得兔类ES细胞进行碱性磷酸酶和Oct-4检测。结果表明,接种于密度为20×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(82.5%)、内细胞团(Inner cellmass,ICM)形成率(67.5%)高于接种于密度为40×103个·cm-2的饲养层上囊胚贴壁率(80.0%)、内细胞团(Innercell mass,ICM)形成率(65.7%),差异不显著(P>0.05);显著高于(P<0.05)接种于密度为10×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(55.6%)、ICM形成率(44.4%)。密度为20×103个·cm-2饲养层上的兔类ES细胞F1、F2代细胞克隆率均显著高于其他两组(P<0.05),最高已传至20代;获得的兔类ES细胞经碱性磷酸酶染色及表面抗原Oct-4表达检测均呈阳性。密度为20×103个·cm-2的MEF饲养层可更好支持兔类ES细胞体外培养。
- 李小佳张君涛徐秋勤王鸽曹书郡王新庄张志平
- 关键词：成纤维细胞
- 饲养层密度对兔类ES细胞分离培养的影响
- 探讨饲养层细胞接种密度对兔类ES细胞分离培养影响,筛选适合兔类ES细胞分离培养最适饲养层密度.将兔囊胚分别接种到密度分别为10×103·cm-2、20×103·cm-2和40...
- 李小佳张君涛徐秋勤王鸽曹书郡王新庄张志平
- 关键词：成纤维细胞
- 不同处理对兔类ES细胞分离培养的影响
- 探讨兔胚胎的不同处理方法对兔早期胚胎体外发育能力的影响,筛选出适合兔类ES细胞分离培养的兔胚胎的较佳处理方法,观察兔类ES细胞贴壁、克隆、生长情况,并对所得的兔类ES细胞进行碱性磷酸酶.结果显示：挑破透明带法和胚胎分割法...
- 徐秋勤张君涛李小佳王鸽曹书郡张胜军魏莉莉王新庄张志平
- 关键词：胚胎
