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程志坚: 作品数：22 被引量：58H指数：4; 供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金陕西省中医药管理局科研基金陕西省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学更多>>

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诱导多能性干细胞治疗脊髓损伤的研究进展: 背景脊髓损伤是一种突发性事件,不仅影响患者心理健康,而且给家庭和社会造成巨大的经济、人力和精神负担。在当今后工业时代,脊髓损伤的病人生活质量仍然较低(1,2),在一项研究中显示,从平均生活质量方面与整个人群对比,脊髓损伤...; 徐军奎贺西京祁鹏程志坚朱甲麟; 文献传递

GSK3β及EGFP基因共表达病毒载体构建及转染大鼠骨髓间充质干细胞: 目的：构建携带大鼠GSK3 β基因的逆转录病毒载体,并转染骨髓间充质干细胞,为研究GSK3β在骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用打下坚实基础.<br>　　方法：利用特异性引物,使用RT-PCR方法扩增...; 李进贺西京程志坚兀飞; 关键词：逆转录病毒载体 EGFP基因

γ-干扰素活化的巨噬细胞在神经干细胞迁移中的作用被引量：1: 2017年; 目的观察γ-干扰素（IFN-γ）刺激、活化的骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）对小鼠神经干细胞（NSCs）迁移的影响。方法分离、原代培养骨髓巨噬细胞和NSCs，然后通过体外迁移实验比较对照组、巨噬细胞组和巨噬细胞＋IFN-γ组迁移的NSCs数量。同时，利用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测IFN-γ刺激后巨噬细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量。结果成功体外培养高表达F4/80的巨噬细胞和高表达巢蛋白（Nestin）、具有多向分化潜能的NSCs。迁移实验结果显示，与对照组相比，巨噬细胞组和巨噬细胞＋IFN-γ组迁移的NSCs数量显著增加（P值分别为0.007、0.000）。巨噬细胞＋IFN-γ组[（0.75±0.05） mm2]较巨噬细胞组[（0.25±0.03） mm2]迁移的NSCs数量增加，差异有统计学意义（P＝0.023）。ELISA结果显示巨噬细胞＋IFN-γ组[（650±65） pg/ml]较巨噬细胞组[（420±23） pg/ml]上清液中MCP-1含量显著升高（P＝0.037）。结论IFN-γ刺激巨噬细胞分泌可溶性因子诱导NSCs迁移，其中MCP-1可能起重要作用。; 程志坚贺西京卢明李浩鹏; 关键词：神经干细胞巨噬细胞 Γ-干扰素迁移

小鼠骨髓巨噬细胞体外培养及增殖情况的探索: 2019年; 目的建立小鼠骨髓来源巨噬细胞的体外培养方法及其标志物表达、增殖情况,为相关研究提供理论基础。方法从6~8周龄昆明小鼠股骨分离得到骨髓单细胞悬液,在含15%L929上清液的培养液中培养。在1、3、5、7 d不同时间点,利用免疫荧光染色检测其巨噬细胞标志物F4/80表达情况,同时利用Edu标记法检测细胞增殖情况。结果用含L929上清液的培养液诱导培养骨髓细胞1、3、5、7 d后细胞F4/80阳性细胞率分别为(1.52±0.39)%、(17.95±2.36)%、(75.57±6.17)%、(95.49±9.83)%,随着培养时间延长,F4/80阳性细胞率逐渐升高,培养骨髓细胞7 d后吞噬能力明显,不同培养时间点F4/80阳性细胞率比较差异均有统计学意义(1 d vs.3 d、3 d vs.5 d、5 d vs.7 d,P<0.05)。随着培养时间延长Edu阳性细胞逐渐增高,培养1、3、5、7 d后细胞EdU阳性细胞率分别为(2.13±0.33)%、(4.61±0.54)%、(18.02±2.19)%、(28.84±3.27)%,不同培养时间点EdU阳性细胞率比较,差异均有统计学意义(1 d vs.3 d、3 d vs.5 d、5 d vs.7 d,P<0.05)。结论体外培养可成功获得小鼠骨髓来源巨噬细胞,培养7 d是获得高纯度巨噬细胞的重要条件。; 祝文崔凤程志坚贺西京; 关键词：巨噬细胞细胞培养技术细胞增殖

小鼠BMPRⅠb基因慢病毒载体构建及转染神经干细胞被引量：1: 2012年; 目的:构建携带小鼠BMPRⅠb基因的慢病毒载体,并转染神经干细胞,为研究BM-PRⅠb在BMPs调控神经干细胞分化中作用奠定基础。方法:利用RT-PCR从小鼠脑组织中获得BMPRⅠb基因,然后定向插入慢病毒表达质粒,进行双酶切及测序鉴定。将鉴定成功的重组慢病毒质粒和另外两种辅助质粒共转染包装细胞,收集、浓缩慢病毒并检测其滴度。利用获得的慢病毒载体转染NSCs,并观察目的基因表达情况。结果:RT-PCR产物经电泳及测序证实克隆成功BM-PRⅠb基因,酶切及测序鉴定成功构建重组慢病毒质粒,共转染293T细胞72h后大部分细胞表达绿色荧光,病毒滴度为5×108 TU/ml。慢病毒感染后的NSCs表达绿色荧光且BMPRⅠb mRNA表达上升。结论:成功构建BMPRⅠb基因慢病毒载体,并成功转染NSCs。; 程志坚兀飞朱振中李浩鹏王国毓贺西京; 关键词：神经干细胞小鼠

GSK3β及EGFP基因共表达病毒载体构建及转染大鼠骨髓间充质干细胞: ＜正＞目的:构建携带大鼠GSK3β基因的逆转录病毒载体,并转染骨髓间充质干细胞,为研究GSK3β在骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用打下坚实基础。方法:利用特异性引物,使用RT-PCR方法扩增GSK3β片段,将目...; 李进贺西京程志坚兀飞; 关键词：增强型绿色荧光蛋白逆转录病毒载体; 文献传递

大鼠GSK3β及EGFP基因共表达病毒载体构建及转染骨髓间充质干细胞: 目的:构建携带大鼠GSK3β基因的逆转录病毒载体,并转染骨髓间充质干细胞,为研究GSK3β在骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用打下坚实基础。方法:利用特异性引物,使用RT-PCR方法扩增GSK3β片段,将目的片段...; 李进贺西京程志坚兀飞; 关键词：增强型绿色荧光蛋白逆转录病毒载体; 文献传递

巨噬细胞促进神经干细胞向小鼠脊髓损伤区迁移被引量：1: 2016年; 目的探讨巨噬细胞在神经干细胞(NSC)体内和体外迁移中的作用。方法体外分离、培养携带绿色荧光蛋白(GFP)小鼠的NSC,免疫荧光细胞化学染色检测神经上皮干细胞蛋白(nestin)表达;制作小鼠脊髓损伤模型,利用实时定量PCR检测组织巨噬细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA水平,在损伤区两侧局部微量注射携带GFP的NSC,于1周后观察NSC向损伤区迁移情况;体外培养巨噬细胞,用TranswellTM迁移实验检测其对NSC迁移的影响,用ELISA检测MCP-1的含量。结果获得高表达nestin的NSC;与对照组相比,脊髓损伤组脊髓MCP-1 mRNA水平显著升高,注射入脊髓的NSC自注射区向损伤区迁移,并到达高表达F4/80区域。巨噬细胞可显著增加NSC体外迁移的数量,并分泌大量MCP-1。结论巨噬细胞诱导NSC向脊髓损伤区迁移,其可能机制是通过MCP-1起作用。; 程志坚祝文李浩鹏贺西京; 关键词：巨噬细胞神经干细胞脊髓损伤迁移

细胞移植调控巨噬细胞修复脊髓损伤的研究进展: 脊髓损伤后巨噬细胞在损伤中心区聚集，是继发性损伤的关键因素之一。巨噬细胞在脊髓损伤后表现出损伤或修复截然不同的效应与其不同极化状态密切相关。不少研究发现活化小胶质/巨噬细胞在脊髓损伤等中枢神经系统损伤的病理发生、发展过程...; 程志坚曹凯贺西京; 关键词：细胞移植巨噬细胞脊髓损伤极化

中药内服加熏吸联合超大剂量维生素C治疗新型冠状病毒肺炎初步临床疗效分析被引量：3: 2020年; 目的研究中药内服加熏吸联合超大剂量维生素C治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)早期改善临床症状的特点与规律。方法随机选取西安国际医学中心医院援湖北医疗队自2020年2月收住的确诊为COVID-19的患者30例,随机分为A、B、C三组,每组10例:A组为对照组,B组为中药内服加熏吸治疗组,C组为中药内服加熏吸联合超大剂量维生素C治疗组。对其乏力、咳嗽、咽干、气短症状以及胸部CT、核酸检测改善情况进行分析,并对各组治疗情况进行比较。结果B组、C组患者乏力、咳嗽、咽干、气短改善程度优于A组,C组效果优于B组(P<0.05或P<0.01);胸部CT、核酸检测情况未见统计学差异(P>0.05)。结论中药内服加熏吸联合超大剂量维生素C治疗方案对改善COVID-19患者乏力、咳嗽、咽干、气短疗效确切,该治疗方案安全、有效、简单,可操作性强,对COVID-19患者治疗具有较高的临床价值。; 汪娅莉杨旭东刘永平张剑冯一凡尚磊张奎伟程志坚贺西京; 关键词：中西医结合

程志坚

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