苏正元
- 作品数:14 被引量:57H指数:5
- 供职机构:中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组杆状病毒AcBac<Sup>ΔCC</Sup>-GP41及其构建方法
- 本发明提供了一种重组杆状病毒AcBac<Sup>ΔCC</Sup>-GP41及其构建方法,涉及生物工程技术和医药技术领域。该重组杆状病毒为:CCTCCNO.V200702。其构建方法为:利用INVITROGEN公司开发B...
- 苏正元李娟王华林邓菲胡志红袁丽
- 文献传递
- 逆转录病毒载体介导的猪瘟病毒E2基因的真核表达被引量:11
- 2006年
- 利用DNA重组技术将猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFVE2基因在PK-15细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的PK-15细胞腹腔免疫Balb/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。
- 刘建玲张彦明苏正元许信刚
- 关键词:猪瘟病毒逆转录病毒载体FACS
- 猪瘟病毒Shimen株E2基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建被引量:4
- 2006年
- 根据已发表的猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)Shimen株的全基因组序列,设计2对引物P1/P2和B1/B2,在B1和B2的5′端分别加上EcoR和BamH位点,以CSFV-Shimen株脾毒为材料,一步法提取总RNA,并以此为模板采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR),成功地扩增出约1.2kb的E2基因。将PCR产物回收后与pMD18-T载体连接并转化,经PCR和酶切鉴定获得重组质粒E2-T。将E2-T经EcoR和BamH酶切消化、回收目的基因后,与经BamH/EcoR酶切的逆转录病毒载体pBABE-puro连接并转化,经酶切鉴定获得重组质粒pBABE-puro-E2。序列测定表明,目的基因的插入位置、方向和读码框完全正确。
- 刘建玲苏正元许信刚李谱华张彦明
- 关键词:猪瘟病毒E2基因
- 一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒
- 本发明涉及一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒。试剂盒为多重荧光定量PCR试剂盒,包括用于扩增非洲猪瘟病毒CD2v基因、非洲猪瘟病毒P72基因和猪伪狂犬病毒EPO基因的引物对以及对应的荧光探针,用于扩增CD...
- 苏正元王华林邓菲杨娟
- 文献传递
- 云南省西北地区家畜体表蜱类形态学与分子生物学鉴定被引量:1
- 2017年
- 目的调查云南省西北地区家畜体表蜱的种类及其种群遗传进化情况。方法采集家畜体表寄生的蜱虫,经形态学鉴定后,用PCR法扩增蜱样本的16S rDNA和ITS2基因片段,测序后进行序列分析。结果共采集成蜱样本1 275只,经形态学鉴定为1科3属4种,其中微小扇头蜱1 263只(占99.1%),卵形硬蜱7只(占0.6%),锐跗硬蜱4只(占0.3%),未知血蜱1只(占0.1%)。样品分子鉴定结果与形态学鉴定结果一致。16S rDNA序列分析显示,蜱P6与印度微小扇头蜱(EU918188)的相似性最高为99.8%,与中国云南微小扇头蜱(JX051062)的相似性99.4%;蜱P2与美国卵形硬蜱(U95900)的相似性最高为93.8%;蜱P1与日本锐跗硬蜱(AB105167)的相似性最高为95.9%;蜱P4与澳大利亚parva血蜱(JX573136)的相似性为90.5%,与中国云南长角血蜱(JX051064)的相似性为88.7%。ITS2序列分析显示,蜱P6与来自老挝(KC503276)、中国云南(KC203364)的微小扇头蜱的相似性均为99.9%;蜱P2与日本卵形硬蜱(D88857)的相似性最高为96.1%;蜱P1与日本锐跗硬蜱(AB605168)的相似性最高为95.3%;蜱P4与罗马尼亚Haemaphysalis parva血蜱(FN296282)的相似性最高为91.0%。结论云南地区家畜体表存在微小扇头蜱、卵形硬蜱、锐跗硬蜱和一种与parva血蜱相关的新型血蜱。
- 亚红祥沈姝苏正元邓菲张云智
- 关键词:PCR检测
- 猪脐静脉血管内皮细胞永生化的初步研究被引量:5
- 2007年
- 为了建立稳定的血管内皮细胞系,进而为研究猪瘟病毒致病机理提供理想的细胞模型,将脂质体转染的pCIneo-hTERT质粒导入原代猪脐静脉血管内皮细胞中,经G418抗性筛选,挑取阳性克隆并扩大培养。对转染后的细胞进行形态观察,研究其增殖及生长特征,并对其端粒酶活性进行了鉴定。结果表明,转染细胞单层贴壁生长,有接触抑制性,呈铺路石状;F-ⅧAg和CD34免疫荧光鉴定阳性,具有转染前细胞特征;转染后细胞培养代数增加,传至第10代和15代转染后细胞端粒酶活性检测为阳性。说明hTERT转染可以延长猪血管内皮细胞的寿命。
- 马泉荔洪海霞张彦明徐浩杨蒙苏正元
- 关键词:端粒酶催化亚基脐静脉血管内皮细胞
- IFN-γ在不同生殖周期奶山羊卵巢中的表达被引量:5
- 2007年
- 应用免疫组织化学SP法检测γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)在不同生殖周期奶山羊卵巢中的表达情况,探讨IFN-γ的变化规律及其与生殖的关系。结果显示,在间情期三级卵泡颗粒细胞胞膜、发情期三级卵泡和成熟卵泡颗粒细胞、妊娠期卵泡颗粒细胞、妊娠7周粒黄体细胞、妊娠12,16和20周膜黄体细胞胞核中均有IFN-γ的表达;在三级卵泡和成熟卵泡的卵泡液中也有IFN-γ的表达;妊娠12,16和20周粒黄体细胞上IFN-γ表达量很低。IFN-γ可能在不同类型的细胞上发挥着不同的作用。
- 孙健红赵慧英苏正元尹宝英张涌
- 关键词:山羊IFN-Γ卵巢颗粒细胞
- 一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒
- 本发明涉及一种用于同步检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的试剂盒。试剂盒为多重荧光定量PCR试剂盒,包括用于扩增非洲猪瘟病毒CD2v基因、非洲猪瘟病毒P72基因和猪伪狂犬病毒EP0基因的引物对以及对应的荧光探针,用于扩增CD...
- 苏正元王华林邓菲杨娟
- 猪静脉血管内皮细胞系及其建立方法
- 本发明公开了猪静脉血管内皮细胞系(ZYM-SVEC01),该细胞系于2008年9月26日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No.C200841。该细胞系是从猪的原代静脉血管中分离培养,采用脂质体转染法将...
- 张彦明王文秀代晨洪海霞苏正元马泉荔
- 文献传递
- 鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离与鉴定被引量:7
- 2005年
- 对陕北(榆林)、关中(宝鸡市、扶风县)、陕南(洋县)等地鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到4株IBV(定名为YL-04、BJ-04、FF-04、YX-04),并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化等生物学特性鉴定。结果发现,分离的4株病毒经1%胰酶处理后的各代病毒尿囊收集液均可凝集鸡红细胞;IBV标准阳性血清可特异性的抑制其凝集性;回归试验可复制出与自然发病相同的病例;病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用。以上研究结果表明,我们分离到的是鸡传染性支气管炎病毒,临床表现为致肾脏病变的组织嗜性,证明以上地区鸡群发病与肾型传染性支气管炎病毒感染有关。
- 倪斌张彦明王晶钰张永国苏正元魏中锋孙裴
- 关键词:肾型传染性支气管炎病毒传染性支气管炎