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蒋璆: 作品数：23 被引量：70H指数：5; 供职机构：上海市心血管病研究所更多>>; 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>; 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程经济管理更多>>

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二氢叶酸还原酶基因在斑马鱼神经系统发育过程中的作用被引量：5: 2010年; 目的观察二氢叶酸还原酶基因(DHFR)功能阻抑斑马鱼胚胎的颅脑部发育情况,初步探讨二氢叶酸还原酶基因在斑马鱼神经系统发育过程中的作用。方法采用显微注射吗啡啉修饰的反义核苷酸(MO)的方法进行DHFR表达阻抑。胚胎发育至受精后48hpf观察胚胎的颅部发育情况,在60hpf时经石蜡切片进一步观察胚胎的脑发育状况。利用胚胎整体原位杂交的方法检测影响神经系统发育的关键因子ngn1和huc的表达情况。结果显微注射MO可成功的进行DHFR表达阻抑。DHFR表达阻抑组胚胎存在颅脑部发育明显异常和ngn1、huc的表达强度明显减弱,且与显微注射的MO剂量呈正相关。结论DHFR在斑马鱼颅脑发育中有重要作用;其功能阻抑可导致胚胎颅脑部发育异常,其机理与ngn1和huc的的表达减弱有关。; 孙淑娜桂永浩蒋璆钱林溪宋后燕; 关键词：神经系统斑马鱼

Tbx1基因功能下调影响斑马鱼Tbx20和Tbx2表达被引量：3: 2009年; 目的采用吗啡啉修饰反义寡核苷酸显微注射方法下调斑马鱼Tbx1基因表达,研究斑马鱼Tbx1基因功能下调对其他两个T盒基因Tbx20和Tbx2表达的影响。方法采用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸显微注射方法抑制斑马鱼Tbx1基因表达,分别将2.5、5、8、10 ng吗啡啉反义寡核苷酸在斑马鱼0-4细胞期注入胚胎,并构建Tbx20,骨形成蛋白2b(Bmp2b)和Tbx2反义RNA探针,进行整体原位杂交,观察Tbx1基因下调对Tbx20、Bmp2b及Tbx2表达的影响。结果Tbx1吗啡啉寡核苷酸显微注射组胚胎表现出鳃弓、耳囊、心血管系统和胸腺的发育异常。Tbx1基因下调导致Tbx20的表达出现改变,Tbx20在心脏的表达与对照组相比明显下调,神经元的表达范围明显缩小;Tbx1基因功能下调会导致Bmp2b在心脏和咽囊的表达减低,Bmp2b在后部咽囊的表达较前部咽囊减低得更为明显;Tbx1基因功能下调胚胎,Tbx2在鳃弓的表达模式发生改变,48 hpf,Tbx2在鳃弓的表达出现从后向前逐渐减低,鳃弓的表达范围较对照组明显缩小。结论Tbx1在发育过程中,会对其他T盒基因,如Tbx20和Tbx2具有激活或抑制的调控作用。Tbx1对Tbx20的作用可能是通过影响Bmp2b的途径,继发地影响Tbx20的表达。Tbx1基因功能下调,会改变Tbx2在鳃弓的表达模式。; 张立凤桂永浩王跃祥蒋璆宋后燕; 关键词：斑马鱼 TBX2

hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究被引量：3: 2008年; 目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholi-no oligonucleotides,MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。方法采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调,并进行hand2表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射,即对照MO(Con MO)注射组、hand2MO注射组、hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率。在显微镜下观察hand2MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。结果hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2-GFP mRNA注射组在8hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFP mRNA+hand2MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与Con MO注射组相比,hand2MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。结论向斑马鱼受精卵显微注射hand2MO的方法可有效的使hand2表达下调。hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。; 孙淑娜桂永浩宋后燕蒋璆王跃祥; 关键词：斑马鱼胚胎发育

在脊椎动物斑马鱼胚胎发育中的作用: 最近,在果蝇中的研究描绘了一个新的信号通路——Hippo通路。这一通路能同时抑制细胞增殖和促进凋亡,在生长调节方面起重要作用。Hippo激酶级联效应最终拮抗转录共激活因子Yorkie(Yki),从而正向调控参与细胞生长、...; 蒋璆; 关键词：基因转录脊椎动物生物信息学基因表达; 文献传递

桔梗皂苷对斑马鱼心功能及胚胎发育的影响被引量：12: 2006年; 目的探索桔梗总苷对斑马鱼心律及胚胎发育的影响。方法从中药饮片提取桔梗总苷,用不同浓度的桔梗总苷对不同发育阶段的斑马鱼胚胎进行处理,观察该药对斑马鱼心律及心脏发育的影响。结果桔梗总苷处理后发现,斑马鱼心率减缓但未出现心律失常;心脏功能相关的离子通道基因表达水平略有降低;高浓度(10mg·L-1)的桔梗总苷处理导致斑马鱼胚胎的死亡与畸形的比例显著增加,同时干扰了斑马鱼胚胎的发育过程。结论桔梗不能引起心律失常,但高浓度用药导致心率迟缓、心功能下降以及致畸致死效应。; 董永新王跃祥钱林溪蒋璆刘学飞宋后燕; 关键词：斑马鱼发育

外源性视黄酸对斑马鱼Tbx1基因的影响被引量：3: 2007年; 目的观察外源性视黄酸对斑马鱼心脏发育的影响,探讨视黄酸对 Tbx1基因在斑马鱼胚胎发育中表达的影响。方法采用化学遗传学的方法在斑马鱼胚胎发育至胚胎受精后12.5 h时给予5×10^(-8)mol/L 和10^(-7)mol/L 外源性视黄酸处理1.5 h。采用胚胎整体原位杂交和实时荧光定量 PCR 方法观察外源性视黄酸对斑马鱼胚胎发育过程中 Tbx1基因时空表达模式的影响。结果整体原位杂交显示 Tbx1在斑马鱼胚胎发育过程中主要在咽弓、心脏和耳囊表达。在12.5 hpf 给予斑马鱼胚胎5×10^(-8)mol/L 或10^(-7)mol/L 视黄酸处理1.5 h,可以导致 Tbx1基因在咽弓和心脏的表达明显下调。与5×10^(-8)mol/L 视黄酸处理组相比,10^(-7)mol/L 视黄酸对 Tbx1基因表达的抑制作用更为明显。结论视黄酸可以调节斑马鱼发育过程 Tbx1基因的表达,且这种调控作用具有明显的剂量依赖性。视黄酸是导致胚胎发育过程中 Tbx1表达异常的主要非遗传因素,并可进一步导致咽弓和心脏的发育异常。; 张立凤桂永浩钟涛王跃祥钱林溪董永新蒋璆孙淑娜宋后燕; 关键词：维甲酸斑马鱼心脏

叶酸拮抗剂甲氨喋呤导致斑马鱼心脏发育异常及BMP2b HAS2表达下调被引量：8: 2007年; 目的该研究利用叶酸拮抗剂甲氨喋呤（MTX）构建叶酸生物学活性受抑制的斑马鱼模型后，观察叶酸生物学活性受抑后对斑马鱼心脏发育的干扰作用以及对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响。方法用不同浓度的MTX处理不同发育时段的斑马鱼胚胎，于48hpf（hours post fertilization）观察胚胎心脏发育情况并计数各组心脏发育异常个体的百分比及心率，评定MTX对斑马鱼心脏发育的影响程度。用1．5×10^-3M的MTX处理6～10hpf发育时段的斑马鱼胚胎作为MTX处理组。于24hpf及48hpf在显微镜下观察MTX处理组斑马鱼胚胎心脏发育情况。借助胚胎整体原位杂交和Real-time PCR的方法检测BMP2b和HAS2在正常对照组及MTX处理组胚胎的表达水平。结果胚胎早期发育阶段6～12hpf是斑马鱼胚胎对MTX的敏感时期。显微镜下观察结果显示MTX处理组斑马鱼心脏发育延迟，并有心脏形态发育明显异常。胚胎整体原位杂交结果显示MTX处理组斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2在心脏的表达于36hpf及48hpf下调。Real-time PCR结果显示MTX处理组斑马鱼BMP2b的相对表达量在12，24，36及48hpf减少，HAS2的相对表达量在24，36及48hpf减少。结论叶酸生物学活性受抑对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。; 孙淑娜桂永浩宋后燕钟涛王跃祥蒋璆; 关键词：叶酸甲氨喋呤心脏发育斑马鱼

乙醇干扰斑马鱼心血管系统的发育: 人类胚胎期乙醇暴露对心血管系统有严重致畸作用。实验中，用不同浓度的乙醇处理斑马鱼胚胎，发现能够干扰其胚胎循环系统的建立，半数有效浓度(EC50)为182.5mmol/L。乙醇短暂暴露实验显示圆顶期为敏感时间窗，400mm...; 钱林溪王跃祥蒋璆钟涛宋后燕; 关键词：乙醇致畸作用斑马鱼血管形成; 文献传递

斑马鱼视网膜感光细胞的发育及视蛋白的表达被引量：5: 2008年; 目的研究斑马鱼视网膜感光细胞的发育和视蛋白的表达,明确利用斑马鱼研究视网膜和感光细胞的可行性。方法制备斑马鱼视网膜感光细胞视蛋白(视杆细胞视紫质、视锥细胞紫外线视蛋白和视锥细胞蓝色视蛋白)的RNA探针。收集受精后72,96,120h的斑马鱼眼球组织进行切片、电镜观察和整体原位杂交。结果斑马鱼的神经视网膜分层排列,包括3个细胞层和2个丛状层。随时间发展,视网膜的发育逐渐成熟,3个细胞层的细胞排列更加整齐,感光细胞的外节盘发育更加成熟,3种视蛋白的表达逐渐增强,范围扩大。结论利用斑马鱼进行视网膜和感光细胞的研究是可行的,视蛋白可作为感光细胞的标记。; 张艳琼王跃祥蒋璆宋后燕王文吉; 关键词：感光细胞视网膜斑马鱼

融资结构与公司治理互动研究——公司治理视角下的逆向融资行为分析: 现代企业融资理论通过比较各种融资方式的成本以及考察不对称信息市场上信号显示的作用,指出企业最优的融资方式是内源融资,其次是债权融资,股权融资则是最后无奈的选择.对美国市场的实证研究也证实了这一'啄食顺序'的客观存在.但当...; 蒋璆; 关键词：融资结构公司治理优序融资理论股权割裂内部人控制; 文献传递

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