蒋苹
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 表没食子儿茶素没食子酸酯联合TRAIL对黑素瘤A375细胞的凋亡作用
- 2010年
- 为探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)与表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合应用对人恶性黑色素瘤A375细胞的抑制作用,采用以甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测TRAIL和EGCG作用组的抑制率,并以流式细胞仪检测各组凋亡率,流式检测EGCG单独作用后A375细胞表面死亡受体DR4、DR5的变化。亚毒剂量的TRML、EGCG及联合作用组致恶性黑素瘤细胞A375细胞凋亡率分别为12%、5.1%、60%。Caspase-3活性明显增强。单独应用组与联合应用组之间存在显著性差异(P<0.01)。EGCG单独作用于A375细胞24 h后,死亡受体TRAⅡ-R1/DR4在细胞的表达明显(P<0.05)。TRAIL-R2/DR5表达无明显变化。TRAIL和EGAG联合应用对A375细胞具有明显的协同杀伤效果,这一作用可能与EGCG上调DR4的表达及增强Caspase-3活性有关。
- 沈琴田芬蒋苹李艳秋张丽卢静静李家文
- 关键词：TRAIL表没食子儿茶素没食子酸酯黑素瘤
- 白花丹素对黑素瘤A375细胞体外增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:评价白花丹素对黑素瘤细胞体外增殖及凋亡的影响。方法:体外培养黑素瘤细胞A375细胞株,应用不同浓度的白花丹素进行处理,培养24 h后,MTT法测定对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot检测bcl-2的表达。结果:浓度为1～13 μmol/L的白花丹素能显著抑制A375细胞株的增殖,且随浓度增加抑制作用递增;白花丹素作用24 h的半数抑制浓度约为10μmol/L;当浓度为2.5μmol/L、5.0 μmol/L和10.0 μmol/L作用24 h,细胞的凋亡率分别为8.52%±0.96%、14.83%±1.34%和19.56%±1.85%,与空白对照组(4.58%±0.46%)比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞内bcl-2蛋白表达量随药物浓度升高而递减,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白花丹素体外能抑制黑素瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡及下调黑素瘤细胞bcl-2蛋白的表达。
- 张丽冯爱平谭志建钱悦蒋苹李艳秋
- 关键词：白花丹素黑素瘤细胞增殖BEL-2
- 携带MIA基因减毒产单核李斯特菌抑制小鼠恶性黑色素瘤的研究
- 目的 研究携带黑色素瘤分化抗原MIA基因的减毒李斯特菌对恶性黑色素瘤的抑制作用及其机制.方法 构建pERL3-MIA载体,通过电转化建立携带MIA基因的LM-MIA,△inlB LM-MIA和△actA/△inlB LM...
- 张娜钱悦蒋苹冯爱平陈思远褚淑娟张丽吴艳罗勤
- Triton X-100在单菌落PCR技术中的优化作用被引量：5
- 2009年
- 在利用单菌落PCR法直接筛选含有外源基因的重组质粒以及发生同源重组的重组子时,通过0.1%TritonX-100处理模板对PCR技术进行优化。以大肠杆菌DH5α、单核细胞增生李斯特菌的重组克隆为例,单菌落经Triton X-100处理后再进行PCR,琼脂糖凝胶电泳图谱的条带更清晰、杂带减少;克隆鉴定的阳性率明显提高,且在15μL的PCR反应混合液体系中的扩增效果更明显。对单核细胞增生李斯特菌的检测方法可以推广适用于多种革兰氏阳性菌。
- 张晓莉冯莹颖张强罗勤蒋苹钱悦
- 关键词：TRITONX-100重组克隆
- 携带MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌抑小鼠恶性黑素瘤的研究
- 2010年
- 目的 探讨携带黑素瘤分化抗原MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌（LM）对恶性黑素瘤的抑制作用及其机制.方法 构建pERL3-MART-1载体,通过电转化建立携带MART-1基因的△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1重组李斯特菌.浓度梯度稀释法测定各减毒菌株半数致死量（LD50）.C57BL/6小鼠随机分为磷酸盐缓冲液（PBS）组,△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组.首次免疫后第7天于小鼠腹部皮下接种B16F10细胞,第14天、21天重复免疫小鼠,观察并记录肿瘤大小及小鼠生存状态.应用实时定量PCR检测肿瘤组织中MART-1表达量.流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD4^＋CD25^＋T细胞阳性率.结果 经鉴定成功构建△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1.减毒株△inlB LM和△actA/△inlB LM的LD50比LM-EGDe标准株毒力分别下降100倍和10 000倍.体内抑瘤试验显示,与PBS组比较,△inlB LM-MART-1组抑瘤率为46.95%,△actA/△inlB LM-MART-1抑瘤率为83.96%,差异均有统计学意义（P〈0.05和0.01）. PBS组、△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组肿瘤组织中MART-1表达量递增,以PBS组表达量为1,后两组为8.988±0.207和11.315±0.445,各组间差异均有统计学意义（P值均〈0.05）,且三组小鼠脾细胞中CD4＋D25＋T 细胞阳性率依次为（2.52±0.20）%、（1.14±0.13）%和（O.44±0.15）%,组间差异均有统计学意义（P值〈0.01）.结论 携带MART-1基因的减毒LM毒性明显低于LM标准株,而且可以有效抑制黑素瘤生长,延长小鼠生存期.
- 蒋苹钱悦冯爱平陈思远褚淑娟张丽吴艳张娜罗勤
- 关键词：MART-1
- GFP用于单核细胞增生李斯特菌PrfA调控毒力基因actA转录表达的研究被引量：1
- 2009年
- PrfA是单核细胞增生李斯特菌(LM)中迄今为止发现的惟一个调控绝大多数毒力基因转录表达的蛋白因子。为了研究PrfA转录调控毒力基因表达的分子机制,将无启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因与毒力基因actA的启动子融合,连接到穿梭载体pLSV16质粒上,构建成表达融合载体pLSV16-PactA-gfp,然后将其电转化入LM野生株P14、PrfA高表达突变株P14a和prfA基因等位缺失突变株A42中表达。利用荧光显微镜和荧光酶标仪检测上述3株细菌中绿色荧光蛋白的不同表达强度,从而评价actA基因依赖于PrfA的转录活性强弱。结果显示,绿色荧光蛋白在P14a中发出的荧光强度最高,P14次之,A42最弱,两两比较均有显著差异(P<0.01),表明毒力基因actA的转录水平高低与PrfA的活性成正相关,其转录表达依赖于PrfA的调控;该试验同时也显示GFP能方便、有效地用于研究PrfA调控LM不同毒力基因的转录表达水平。
- 冯莹颖张晓莉张强罗勤蒋苹钱悦冯爱平
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌转录调控
- 携带MIA基因单核细胞增生性李斯特菌抑制恶性黑素瘤的研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨携带黑素瘤抑制性活性蛋白（MIA）基因的单核细胞增生性李斯特菌（LM）对黑素瘤的抑制作用。方法构建载体pERL3-hly—MIA，电转化单核细胞增生性李斯特菌建立携带MIA基因的单核细胞增生性李斯特菌（LM—hly—MIA），Western鉴定。实验小鼠随机分成生理盐水组（A组）、LM组（B组）、LM—hly—MIA组（C组），免疫后次日给予小鼠背部皮下接种1×10^7／mLB16细胞0．1mL。记录注射部位肿瘤的大小与小鼠的一般情况。结果经酶切及Western Blot鉴定表明成功构建LM—hly—MIA，体内试验显示生理盐水组、LM组、LM—hly—MIA组小鼠肿瘤平均重量分别为4．33±0．91g、3．36±0．41g、1．89±0．52g，其中LM的肿瘤抑制率为22．4％，LM—hly—MIA的肿瘤抑制率为61．5％（P〈0．05）。结论携带MIA基因减毒单核细胞增生性李斯特菌明显抑制黑素瘤B16的生长。
- 钱悦蒋苹褚淑娟陈思远冯爱平罗勤
- 关键词：黑色素瘤抑制蛋白
- 重组减毒单核细胞增多性李斯特菌作为疫苗载体在抗肿瘤中的研究进展被引量：2
- 2010年
- 将细菌疫苗用于肿瘤的治疗和预防已取得多方面的进展,单核细胞增多性李斯特菌(LM)能在专职吞噬细胞和非专职吞噬细胞内生存繁殖,可同时引起机体的细胞免疫和体液免疫。将外源性肿瘤特异性抗原导入减毒LM,可以显著诱导抗肿瘤的细胞免疫应答,是非常有效的疫苗载体。文章主要从具有胞内茵特殊优势的单核细胞增多性李斯特菌的生物学特性、做为抗肿瘤疫苗载体的优点等方面的研究进展进行了阐述。
- 蒋苹钱悦冯爱平
- 关键词：减毒疫苗载体肿瘤特异性抗原
- 泛发性发疹型汗管瘤一家系八例被引量：1
- 2009年
- 先证者（Ⅲ，）女，41岁。因皮肤多处起棕褐色小丘疹就诊。查体：先证者的面部、额部和眼周、颈部和耳下及上肢遍布棕褐色小丘疹。染色体核型分析正常，诊断为泛发性发疹样汗管瘤。
- 陈清华冯爱平张向阳蒋苹高勇刘娟杨擎宇刘静宇
- 关键词：发疹型汗管瘤泛发性染色体核型分析家系先证者丘疹
