蔡军伟 作品数:15 被引量:48 H指数:3 供职机构: 南方医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
BLP耐受通过上调MARCO增强巨噬细胞的吞噬能力 被引量:1 2019年 目的:探讨胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO)在细菌脂蛋白(BLP)耐受巨噬细胞吞噬能力增强过程中的作用。方法:分离、分化和培养骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs),并制备BLP耐受细胞;利用流式细胞术和荧光显微镜检测并比较BLP耐受与非耐受细胞吞噬细菌的能力,同时用流式细胞术和qPCR检测BLP耐受对MARCO蛋白及mRNA表达的影响;进一步利用小干扰RNA下调MARCO表达,通过流式细胞术及荧光技术探讨MARCO对BLP耐受巨噬细胞吞噬能力的影响。结果:BLP耐受巨噬细胞吞噬细菌的量较非耐受巨噬细胞明显增加(P<0.05);同时BLP耐受巨噬细胞膜表面MARCO蛋白表达水平较非耐受细胞明显升高,并且在细菌刺激后进一步增加,MARCO的mRNA水平变化与蛋白水平变化一致;下调MARCO表达后,BLP耐受巨噬细胞对细菌的吞噬能力明显下降,提示BLP耐受巨噬细胞吞噬能力增强与巨噬细胞膜表面MARCO蛋白的表达上调有关。结论:BLP耐受通过上调巨噬细胞膜表面MARCO蛋白的表达,增强其对细菌的吞噬能力。 习大林 项静 蔡军伟 赵舒祺 吉晶晶 李月 苏婷 姜勇 刘靖华关键词:巨噬细胞 耐受 护理在职学历教育中病理生理学教学现状及创新尝试 2013年 对护理在职学历教育中病理生理学教学现状进行分析。为了提高教学质量,进行创新尝试:修订教学大纲,采用突出导入和总结的病例教学法,进行以学生为主导的护理查房分析和模拟,采用多元化成绩评分法,应用新通信工具和多媒体课件。 张倪 蔡军伟 黄巧冰关键词:护理 在职学历教育 病理生理学 教学方法 LPS对人CIAS1基因表达的影响及NACHT区的序列分析 被引量:1 2006年 目的:观察LPS刺激对CIAS1基因表达的影响,初步探讨CIAS1基因在炎症发病机制中的作用。方法:在人全血中加入LPS,用RT-PCR扩增CIAS1基因的NACHT区,观察不同时间及不同浓度LPS刺激对CIAS1mR-NA表达丰度的影响。结果:100mg/L LPS刺激对CIAS1mRNA表达呈现先降低后升高的模式。不同浓度LPS刺激2h,CIAS1mRNA增高呈剂量依赖性(P<0·01)。序列分析结果显示CIAS1基因产物cryopyrin的NACHT结构域存在能与ATP和Mg2+结合的Walker A和Walker B基序。该基因的主要致病突变位点与此结构有密切关系。同时其LRRs区存在与Ca2+和多糖结合的位点。结论:CIAS1可能是一种炎症识别信号途径中的重要分子。LPS刺激人白细胞可引起CIAS1mRNA表达上调。 蔡军伟 韩丽芳 颜亮关键词:免疫识别 CRYOPYRIN 突变 NF-κB信号通路对BLP耐受巨噬细胞iNOS表达的影响 被引量:3 2014年 目的通过检测细菌脂蛋白(BLP)耐受巨噬细胞感染细菌时诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达情况及其表达是否受NF-κB信号通路调控,探讨BLP耐受巨噬细胞对细菌清除能力增强的机制。方法比较BLP耐受和非耐受(Naive)小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMM)对大肠杆菌的吞噬及杀灭情况,评价BLP耐受巨噬细胞的细菌清除能力;用定量PCR技术检测BLP耐受的BMM内iNOS mRNA表达情况和细胞免疫荧光技术观察p65从胞质向胞核的移位情况;最后观察抑制NF-κB通路活化对iNOS mRNA表达的影响。结果 BLP耐受巨噬细胞吞噬细菌和杀灭细菌的能力较Naive细胞显著增强(P<0.05);iNOS mRNA表达水平较Naive细胞显著(P<0.05);如果抑制BLP耐受巨噬细胞NF-κB通路活化对iNOS mRNA表达有显著影响(P<0.05)。结论本研究结果提示细菌脂蛋白耐受通过NF-κB通路活化增强细菌感染巨噬细胞iNOS表达。 李雪 王义乾 罗海华 钟玙沄 雷烨铭 雷山 蔡军伟 姜勇 刘靖华关键词:INOS NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白 2013年 目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。 颜亮 罗滔 蔡军伟 毕志斐 胡巢凤关键词:禽传染性支气管炎病毒 酵母双杂交系统 中国人群MEFV基因多态性研究 被引量:8 2006年 目的:探讨中国人群MEFV基因多态性的特点。方法:收集57份中国人外周血全血标本,运用反向杂交的方法检测MEFV基因常见的12个突变位点。结果:57份标本中正常野生型的有26份,发生突变的有31份,突变率为54.39%(31/57)。共发现9种突变类型,其中发生E148Q突变的有26例,突变率最高,为45.61%(26/57)。结论:中国人群MEFV基因有相当高的突变率,E148Q突变率最高。 韩丽芳 蔡军伟 颜亮 姚咏明关键词:反向杂交 SETD4蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒系统的表达 被引量:3 2015年 目的通过昆虫杆状病毒表达系统表达SETD4(SET domain-containing 4)蛋白,并纯化SETD4蛋白,为深入探讨SETD4的功能奠定基础。方法提取小鼠正常肝组织的RNA,通过RT-PCR扩增SETD4基因,并克隆至p Fast Bac-HTB构建重组载体,再转座获得重组杆粒;通过脂质体介导将重组杆粒转染SF9细胞产生重组病毒,扩增病毒感染细胞并获得重组蛋白;利用Ni2+亲和柱来纯化蛋白,并通过Western Blot及考马斯亮蓝染色鉴定SETD4蛋白。结果经双酶切鉴定及测序证实SETD4基因插入了供体质粒;经PCR鉴定证实SETD4基因插入了穿梭载体;经考马斯亮蓝染色证实纯化得到重组蛋白,用His-Tag抗体和SETD4特异性抗体在50 k D处可检测到目的条带。结论成功利用昆虫杆状病毒表达系统够表达了SETD4,并纯化了SETD4。 雷烨铭 崔航 钟玙沄 王义乾 黄穗 赵舒祺 蔡军伟 姜勇 刘靖华关键词:杆状病毒表达系统 纯化 RelA/p65的翻译后修饰及其对NF-κB转录活性的影响 被引量:17 2012年 RelA/p65是NF-κB的一个亚单位,其翻译后修饰能够精细地调控NF-κB的转录激活,并在炎症反应及炎症反应相关疾病的发生和发展过程中发挥重要的作用.RelA的翻译后修饰主要包括磷酸化、乙酰化、甲基化以及泛素化等.这些翻译后修饰不仅能在生理和病理的条件下有效地调控NF-κB的转录激活,彼此之间还存在着复杂的相互作用,一种翻译后修饰可以使另一种修饰增强或是抑制,从而综合而完善地调控NF-κB的转录活性.本文就近年来RelA的翻译后修饰及这些修饰之间的相互作用对NF-κB信号通路影响的最新研究进展进行综述. 李毅斌 蔡军伟 刘靖华关键词:核因子ΚB RELA P65 翻译后修饰 SETD4基因敲除小鼠的构建及鉴定 被引量:3 2016年 目的构建并鉴定SETD4基因敲除小鼠,为研究SETD4的生物学功能提供动物模型。方法将引进的SETD4flox/+小鼠与EIIa-Cre小鼠进行杂交繁殖,得到基因型为SETD4+/-.EIIa-Cre的小鼠;再与C57BL/6小鼠杂交去除Cre酶,获得杂合子SETD4+/-小鼠;该小鼠自交获得纯合子SETD4-/-小鼠。通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;RT-PCR、荧光定量PCR方法鉴定纯合子的SETD4基因敲除小鼠SETD4m RNA表达情况;HE染色观察小鼠肝、肺组织的形态学变化。结果 PCR结果表明子代小鼠的基因型符合SETD4-/-;纯合子基因敲除小鼠SETD4 m RNA水平显著低于野生型小鼠;SETD4基因敲除小鼠肝、肺组织的形态学特征与野生型小鼠相比无明显差异。结论本研究基于Cre/loxp系统,成功构建并鉴定了SETD4基因敲除小鼠。 黄穗 黄梦怡 钟玙沄 雷烨铭 赵舒祺 蔡军伟 姜勇 刘靖华关键词:基因敲除 CRE/LOXP系统 新冠肺炎与医学基础课《病理生理学》教学内容的关系 被引量:2 2020年 2020春季爆发并流行的新冠肺炎对全国乃至全球的春季学期教学都造成了极大的影响,教学形式发生变化,教学内容也需因势利导,与时俱进。本文将就新冠肺炎的发生与《病理生理学》各章节内容的关系作一分析,与师生们探讨医学基础教育与新发疾病之间的关系,促进教学内容更新,帮助学生理论联系实际,做好医学基础课程的教与学。 黄巧冰 蔡军伟 曾振华关键词:病理生理学 教学内容 理论联系实际