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蔡勤
作品数:
7
被引量:1
H指数:1
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
龚毅
中国科学院上海生命科学研究院
杨胜利
中国科学院上海生命科学研究院
徐晋麟
中国科学院
何志勇
上海交通大学生命科学技术学院生...
钱有存
中国科学院上海生命科学研究院
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1999
1篇
1997
1篇
1996
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眼镜蛇(Naja naja atra)、银环蛇(Bungarus multicinctus)神经毒素及类似物基因的克隆、表达及其功能的研究
他们使用反转录PCR(RT-PCR)技术,中华眼镜蛇和银环蛇毒中分别成功地克隆到三个新的神经毒素cDNA,它们分别是短链神经毒素、长链神经毒素及其同源物.通过与已公开发表的序列相比较,同源性较高,但尚未见报道.该研究将克...
蔡勤
关键词:
中华眼镜蛇
银环蛇
中国仓鼠卵细胞二氢叶酸还原酶基因在大肠杆菌中的高效表达
1996年
本工作采用PCR法将哺乳动物表达载体pSVA75上的中国白鼠卵细胞(CHO)二氧叶酸还原酶基因扩增后插入到原核生物高效表达质粒pBV221中,构建成胞内表达载体pDHFR—1,经转化大肠杆菌(E.coliDH5α)的后获高效表达,表达量占总蛋白量的12.2%.利用这种方法不仅为深入研究该酶的结构和功能的关系及其新生肽键的折叠提供丰富的实验材料,而且也有希望成为较好的外源DNA原核扩增表达系统。
蔡勤
徐晋麟
关键词:
基因表达
二氢叶酸还原酶
眼镜蛇短链神经毒素及其制法和用途
本发明公开了一种新的眼镜蛇短链神经毒素,编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了将眼镜蛇短链神经毒素用于治疗多种疾病如癌症的方法以及含有眼镜蛇短链神经毒素的药物组合物。
蔡勤
杨胜利
龚毅
文献传递
蛇毒腺新基因的克隆、表达和功能研究
龚毅
杨胜利
范春阳
钱有存
蔡勤
沈雁
该研究从蛇类的腺体分泌物中寻找并鉴定新的有用物质。再采用基因工程方法向产业化发展。同时在构建CDNA文库的基础上,建立各种活性蛋白质的筛选模型,已从蛇毒腺cDNA中获得了12个新基因,对这些基因进行了结构分析,基因表达和...
关键词:
关键词:
克隆
眼镜蛇神经毒素的亲和配基的设计及亲和分离的工艺
肖齐世
李燕铃
蔡勤
李荣秀
关键词:
眼镜蛇神经毒素
文献传递
金黄色葡萄球菌核酸酶及其突变体酶动力学性质的比较
1997年
将金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)的类似物(SNaseR)及其不同点突变体的基因进行表达,经Bio-Rex70柱层析及尿处理进行分离纯化,在SDS-PAGE上显示一条蛋白带,相对分子质量约为17kD.测试了它们的比活力、Km、Vmax、Ki等酶动力学参数.结果表明,SNaseR与SNase的催化活性无显著差异,但SNaseR对底物的亲和力明显增加.3种点突变体对底物的亲和性都得到增强,其中SNaseR113为最.SNaseR113和SNaseR(113+140)的催化活性增强,后者更为显著.
蔡勤
徐晋麟
关键词:
金黄色葡萄球菌
核酸酶
突变体
酶动力学
中华眼镜蛇短链神经毒素cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量:1
1999年
利用RT-PCR技术从中华眼镜蛇毒腺组织中成功地克隆了短链神经毒素CDNA。测序结果表明,该基因开放阅读框架编码83个氨基酸残基,其中对个为信号肽,成熟肽为62个氨基酸残基。该基因与GenBank报道的相同物种的神经毒素基因有相当的同源性,不同物种之间的信号肽序列十分保守。将短链神经毒素CDNA再经PCR扩增除去信号肽序列,克隆到pT7ZZ表达质粒中,转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导可高效表达分子量为23kDa②左右的融合蛋白。表达产物占菌体总蛋白的25%左右。
蔡勤
何志勇
龚毅
杨胜利
关键词:
神经毒素
蛇毒
中华眼镜蛇毒
CDNA
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