薛惠斌
- 作品数：28 被引量：85H指数：6
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市现代生物与新药产业发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白细胞介素12对肝癌基因治疗的实验研究被引量：3
- 1999年
- 目的研究携带白细胞介素１２（ＩＬ１２）基因逆转录病毒载体对体内肝癌生长抑制作用，探索基因治疗肝癌新途径。方法构建携带ＩＬ１２的逆转录病毒载体，转染逆转录病毒包装细胞系ＰＡ３１７，应用该包装细胞对实验性肝癌大鼠进行治疗，观察抗肿瘤作用，免疫功能变化。结果将包装细胞ＰＡ３１７ＩＬ１２肝癌局部或脾内注射后能明显抑制肝癌细胞系ＣＢＲＨ３的生长，接种ＣＢＲＨ３第１、３天注射ＰＡ３１７ＩＬ１２者能长期生存，第５、７天注射者生存期明显延长。而空白对照组及携带空载体的逆转录病毒包装细胞系均可见肿瘤生长（Ｐ＜００１）。结论肝癌局部及脾内注射携带ＩＬ１２基因逆转录病毒载体的包装细胞株均能产生有效抗肝癌作用。
- 杨家和钱其军薛惠斌曹惠芳崔贞福石文芳杨广顺吴孟超
- 关键词：肝肿瘤肝细胞癌基因治疗白细胞介素12
- 白细胞-内皮细胞间黏附分子-1基因多态性与2型糖尿病肾病的关系
- 2006年
- 目的：研究白细胞-内皮细胞间黏附分子-1（LECAM-1）在P213S位点的基因多态性与2型糖尿病肾病的关系。方法：应用聚合酶链反应和限制性内切酶方法检测28～76岁2型糖尿病肾病55例、2型糖尿病非肾病64例和正常对照组112例的LECAM-1基因的多态性。结果：糖尿病肾病组LECAM-1213PP基因型和P等位基因频率显著高于非糖尿病肾病组及对照组（P〈0.05）。结论：LECAM-1基因多态性与2型糖尿病肾病发病有明显的相关性，213PP基因型可能是2型糖尿病肾病的遗传危险因素。
- 李谊文薛惠斌拓西平
- 关键词：糖尿病肾病黏附分子多态性
- 逆转录病毒介导白细胞介素12及白细胞介素2基因联合治疗大鼠肝癌被引量：2
- 2003年
- 目的 :研究携带小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 )和人白细胞介素 2 (h IL- 2 )基因的逆转录病毒包装细胞株对大鼠肝癌进行联合基因治疗的可行性和疗效。 方法 :构建携带 m IL- 12基因、h IL- 2基因及 m IL- 12 +h IL- 2基因的逆转录病毒包装细胞PA317- GCIL12 EXPN、PA317- GCXEIL2 PN和 PA317- GCIL12 EIL2 PN,分别与肝癌细胞 CBRH3以 1∶ 1混合接种于大鼠腹腔。观察其生存时间。 结果 :生理盐水对照组、空载体对照组 (PA317- GCXEXPN)和 h IL - 2治疗组的平均生存时间分别为(8.5± 1.2 ) d、(8.3± 0 .9) d和 (16 .7± 1.7) d;m IL - 12治疗组和 m IL - 12 +h IL - 2治疗组均长期存活。逆转录病毒包装细胞与CBRH3的比例为 1∶ 10 0混合时 ,m IL - 12 +h IL - 2治疗组仍能长期存活 ,而 m IL - 12治疗组平均生存时间为 (15 .7± 1.8) d。腹腔接种 CBRH3后 1、3、5、7d,采用 m IL- 12 +h IL- 2治疗后 35 d生存率分别为 10 0 %、10 0 %、30 %、15 %。 结论 :携带 m IL- 12和 h IL - 2基因的逆转录包装细胞株可明显抑制肝癌细胞的生长 ,早期治疗优于晚期治疗 。
- 杨家和范瑞芳钱其军尤天庚薛惠斌苏长青曹惠芳吴孟超
- 关键词：逆转录病毒介导白细胞介素12腹腔内注射
- 特异性增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ表达mIFN-γ及体外肿瘤杀伤实验被引量：3
- 2004年
- 目的:构建增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ和增殖缺陷型腺病毒AdEasy—mIFN-γ,比较两者在肿瘤细胞中表达mIFN-γ蛋白的能力以及CNHK200-mIFN-γ,ONYX-015及野生型腺病毒Ad5在正常及肿瘤细胞中的增殖力,进一步观察其抗瘤效果。方法:以病毒增殖试验检测病毒在细胞中的增殖能力;透射电镜观察CNHK200-mIFN-γ在Hep3B细胞中的增殖复制;检测病毒感染肿瘤细胞后mIFN-γ的表达;CPE实验观察增殖病毒对细胞的杀伤效应。结果:CNHK200-mIFN-γ和ONYX-015仅在肿瘤细胞中增殖,且前者增殖力较强。CNHK200-mIFN-γ在肿瘤细胞中表达mIFN-γ,且表达量与病毒增殖密切相关,而AdEasy—mIFN-γ在肿瘤细胞中的mIFN-γ表达几乎不能测到。ONYX-015与CNHK200-mIEN-γ对正常的细胞无杀伤性,但能有效地杀伤癌细胞。结论:外源基因mIFN-γ的插入没有改变增殖病毒在肿瘤细胞中选择性增殖的特性。增殖型腺病毒CNHK200-mIFN-γ具有良好的肿瘤选择性及增殖性,且可以有效表达mIFN-γ,并且有效杀伤癌细胞,显示其良好的临床应用前景。
- 陈洁钱其军达万明欧英贤薛惠斌崔贞福苏长青李林芳姜梨华吴红平
- 关键词：腺病毒干扰素
- 携带人内皮抑素基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒对卵巢癌的体内治疗作用被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨携带人内皮抑素基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒CX-hE对卵巢癌裸鼠瘤株OV-90的抑制作用。方法:BALB/c裸鼠右背部皮下接种OV-90细胞成瘤。(1)18只荷瘤裸鼠随机分为PBS对照组、CX-hE治疗组和Ad-hE治疗组,皮下种植瘤内直接注射。各药物隔日注射1次,共注射5次。取肝脏组织行常规病理检查。(2)另15只荷瘤裸鼠随机分3组,分别瘤内单次注射CX-hE、Ad-hE和ONYX-015病毒纯化液。注射后第1、3、7天球后静脉取血ELISA检测人内皮抑素浓度,肿瘤组织行Hexon单克隆抗体免疫组化染色及微血管免疫组化染色。结果:(1)CX-hE组肿瘤生长速度较缓慢,开始治疗后2周肿瘤体积已明显小于Ad-hE组(P<0.05)和PBS组(P<0.01)。常规H-E染色显示CX-hE组肿瘤组织内见散在坏死灶;肝脏无明显病理变化。(2)瘤内单次注射各药物后,裸鼠血清中均可检测到内皮抑素蛋白表达,随时间延长表达量逐渐升高。CX-hE组人内皮抑素浓度始终高于Ad-hE组(P<0.01),增长速度较快。CX-hE单次瘤内注射2周,肿瘤Hexon免疫组化染色可见大量密集分布的阳性肿瘤细胞。CX-hE组肿瘤微血管免疫组化可见残余的癌巢内尚有散在分布的阳性血管内皮细胞。结论:瘤内直接注射的治疗方法可使瘤生长速度减慢,CX-hE治疗效果优于Ad-hE,未观察到各治疗组肿瘤生长停止或完全消退的理想治疗效果。
- 陈雄沙金燕惠宁古航薛惠斌
- 关键词：内皮抑素类腺病毒科基因疗法
- 腺病毒CNHK200-hEndostatin质量控制方法的研究被引量：3
- 2007年
- 目的:建立基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndostatin的质量控制方法。方法:分别建立腺病毒蛋白鉴定、腺病毒基因组鉴定、人内皮抑素(hEndostatin)基因鉴定、人内皮抑素表达量检测、腺病毒颗粒数测定、腺病毒滴度和比滴度测定、纯度测定、野生型腺病毒(AdWT)检测、残余宿主DNA含量检测和牛血清蛋白残余量检测等腺病毒质量控制项目的方法,并对纯化的腺病毒样品进行初步检测。结果:建立用SDS-PAGE方法对腺病毒进行蛋白鉴定,用限制性内切酶图谱分析的方法对腺病毒进行基因组鉴定,用PCR方法鉴定人内皮抑素基因,用ELISA方法检测人内皮抑素表达量,用D260法和HPLC方法进行腺病毒颗粒数测定,用D260/D280方法和HPLC方法进行纯度检测,用PCR方法进行野生型腺病毒检测,用杂交方法进行残余宿主DNA含量检测,用反向间接血凝实验测定牛血清蛋白残余量。结果表明建立的方法可有效应用于腺病毒样品检测,并且我们制备的纯化腺病毒样品均符合要求。结论:基本建立了腺病毒CNHK200-hEndostatin的质量控制方法,改良的应用HPLC对腺病毒颗粒数进行定量检测的方法准确迅速,优于传统方法。应用建立的方法对纯化的腺病毒样品进行检测,基本符合临床应用要求。
- 薛惠斌施军霞朱文川陈敏钱其军
- 关键词：腺病毒科内皮抑素类基因疗法
- 脾内转染白介素12及白介素2基因对肝癌的基因治疗
- 杨家和钱其军尤天庚范瑞芳苏长青薛惠斌李楠陆成华吴孟超
- 该研究组近三年在肝癌基因治疗基础研究中，对白细胞介素1β转换酶、P53、HSV－TK、共刺激因子B7及IL－12等多种单基因治疗进行研究，发现IL－12疗效最为显著。应用多基因治疗协同配合的治疗方案，其疗效优于单基因的抗...
- 关键词：
- 关键词：白细胞介素12白细胞介素2基因治疗
- 白细胞介素12及白细胞介素2对大鼠肝癌的联合基因治疗研究被引量：3
- 2002年
- 目的:研究利用小鼠白细胞介素12(mIL-12)和人白细胞介素2(hIL-2)基因对大鼠肝癌进行联合基因治疗的可行性和疗效。方法:构建携带mIL-12和hIL-2基因的逆转录病毒载体,转染包装细胞后对实验性肝癌大鼠进行肝癌局部注射,观察对肝癌细胞的生长抑制作用及其对大鼠的免疫功能变化、毒性反应。结果:携带mIL-12/hIL-2基因的重组逆转录病毒在肿瘤内局部注射明显抑制了肝肿瘤的生长。肝癌接种后第1,3,5,7天治疗组大鼠35d生存率分别为100％,100％,30％,10％。IL-12+IL-2治疗组平均生存时间明显高于生理盐水对照组(P<0.01)、逆转录病毒空载体对照组(P<0.01)、IL-2治疗组(P<0.01)和IL-12治疗组(P<0.05)。治疗后肝癌组织中浸润的淋巴细胞明显增多。结论:肝癌局部注射携带mIL-12和hIL-2基因的逆转录包装细胞株可明显抑制肝癌细胞的生长,早期治疗优于晚期治疗。
- 杨家和范瑞芳钱其军尤天庚薛惠斌苏长青曹惠芳吴孟超
- 关键词：白细胞介素12白细胞介素2基因治疗肝内注射
- 基因-病毒治疗系统CNHK200-hA对肺癌治疗的研究被引量：9
- 2005年
- 目的 构建抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗相结合的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,并对其肺癌的体内外治疗作用进行初步研究。方法 通过Westernblot分析 ,观察携带抗肿瘤新生血管生成基因angiostatink1 5 (hA)的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对介导k1 5蛋白表达的影响 ;通过细胞病理作用及动物试验 ,比较CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对人肺癌细胞株A5 4 9的杀伤作用及对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用。结果 基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA能够介导hA基因在肺癌细胞内高效表达k1 5蛋白 ,其表达量高于非增殖型腺病毒Ad hA。细胞病理效应显示 ,CNHK2 0 0 hA对A5 4 9的杀伤作用明显优于Ad hA ,CNHK2 0 0 hA在感染复数 (MOI)值为 1时可完全杀伤A5 4 9细胞 ,而达到相同杀伤效应的Ad hA的MOI值为 1 0 0。动物试验显示 ,CNHK2 0 0 hA对肺癌的疗效明显好于Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5。结论 插入了抗肿瘤新生血管生成基因hA的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,可明显提高hA基因的表达量 ,其在体内外的抗肺癌作用较非增殖型腺病毒Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5进一步提高。
- 王伟国薛惠斌苏长青崔贞福聂明明Jonathan Sham吴孟超钱其军
- 关键词：病毒治疗肺癌增殖型腺病毒新生血管生成抗肿瘤表达量
- 原发性肝癌基因治疗目的基因筛选的初步研究被引量：4
- 2000年
- 目的 通过动物实验初步筛选对肝癌有明确疗效的目的基因。方法 应用携带对肿瘤有明确疗效的目的基因白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )、白细胞介素 12 (interleukin 12 ,IL 12 )、共刺激因子B7 1(costimulatorB7 1,B7 1)、单纯疱疹病毒胸苷激酶 (herpessimplex 1thymidinekinase ,HSV TK)、抑癌基因p5 3及白细胞介素 1β转换酶 (interleukin 1βconvertingenzyme,ICE)的逆转录病毒包装细胞系PA317,将该包装细胞系与肝癌细胞CBRH3 混合接种于大鼠腹腔中。结果 生理盐水及病毒载体对照组大鼠的平均生存时间分别为 (8 2± 0 8)及 (8 3± 1 1)d ,IL 2、B7 1、HSV TK、p5 3及ICE治疗组大鼠的平均生存时间分别为 (15 8± 2 4)、(10 6± 1 8)、(15 5± 2 5 )、(15 1± 2 5 )、(16 3± 2 0 )d ,生存期明显延长。IL 12治疗组的大鼠均存活超过 2个月。携带IL 12的逆转录病毒包装细胞株与CBRH3 的比例超过 1∶10时可使大鼠长期生存 (2个月观察期 ) ,而低于 1∶10 0时大鼠平均生存时间为(14 6± 2 1)d。结论 应用IL 12目的基因对肝癌的疗效最为显著。携带IL 12的逆转录病毒包装细胞株通过激活机体免疫细胞可完全杀灭超过其 10倍的肝癌细胞。
- 薛惠斌钱其军杨家和曹惠芳崔贞福卫立辛石文芳吴孟超
- 关键词：肝细胞癌逆转录病毒基因治疗
