谢方南
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京协和医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- EGFP和CM-Dil示踪骨髓间充质干细胞构建组织工程骨的体内研究被引量:4
- 2012年
- 目的:应用增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)和CM-Dil标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化和转归。方法:分别用EGFP慢病毒表达和CM-Dil染料的方法标记比格犬骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stemcells,BMSCs),MTT法检测标记细胞的体外增殖能力。BMSCs接种珊瑚支架体外成骨诱导7天后,将未标记组、EGFP组和CM-Dil组分别植入裸鼠背部皮下,空白支架作为阴性对照。术后4、8、12周取材,HE染色观察成骨情况,EGFP组采用GFP免疫组化、CM-Dil组冰冻切片荧光显微镜下示踪BMSCs在体内的变化。结果:两种标记技术能高效标记BMSCs,标记前后细胞的体外增殖无显著性差异(P>0.05)。细胞-支架复合物植入体内12周后有新生骨形成,标记细胞数量随时间延长而逐渐减少,12周后仍显示有部分标记细胞存活。结论:EGFP和CM-Di l可用于示踪组织工程种子细胞,通过示踪说明BMSCs在体内组织工程骨成骨过程中发挥了重要作用。
- 武京国谢方南马慧雨王黔曹谊林肖苒
- 关键词:EGFP骨髓间充质干细胞示踪组织工程骨
- 间充质干细胞对不同恶性表型肿瘤细胞的作用与机制研究
- 研究背景及意义: 间充质干细胞(Mensenchymal Stem Cell,MSCs)是一类主要存在于全身结缔组织或器官间质的具有高度自我更新与多向分化能力的干细胞。由于其具有低免疫原性和免疫调节功能,且有损伤与炎症...
- 谢方南
- 关键词:间充质干细胞恶性表型肿瘤细胞基因治疗
- KLF2和KLF15基因在hBMSCs定向分化中的动态表达被引量:5
- 2012年
- 目的研究KLF2和KLF15在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂、成骨和成肌分化过程中的表达水平及变化趋势,探讨KLF2和KLF15在hBMSCs定向分化过程中可能的作用方式。方法密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞仪检测细胞表面标志物,取第4代细胞分别进行成脂、成骨和成肌诱导并以油红O、茜素红及免疫荧光染色进行鉴定。通过实时定量PCR和免疫荧光分别从mRNA水平和蛋白水平检测相关标志物、KLF2、KLF15和GLUT4的表达。结果体外培养的hBMSCs表达间充质干细胞表面标志CD29、CD90,并在特定诱导剂作用下能够定向分化为脂肪细胞、成骨细胞和成肌细胞,染色鉴定结果为阳性,并分别检测到相关标志基因的表达;hBMSCs成脂、成骨和成肌过程中KLF2、KLF15和GLUT4的表达均呈动态变化。结论 KLF2和KLF15与hBMSCs成脂、成骨和成肌分化的启动和维持有关;KLF2和KLF15可能通过GLUT4调节能量代谢从而影响hBMSCs定向分化。
- 杨珣李秋晨吴欢欢谢方南吕晓岩尹艳花肖苒
- 关键词:骨髓间充质干细胞定向分化