赵印敏
- 作品数：34 被引量：115H指数：6
- 供职机构：上海市肺科医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿奇霉素诱导淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究阿奇霉素诱导淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用,及其相关的凋亡蛋白和细胞周期的变化,为临床治疗淋巴细胞白血病提供新的研究思路。方法:应用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡并用流式细胞术进行细胞周期分析,MTT法检测阿奇霉素对Jurkat细胞的增殖抑制作用,利用West-ern-blotting检测凋亡途径相关蛋白的表达。结果:用阿奇霉素处理Jurkat细胞48h后300mg/L剂量组早期凋亡率显著增高达到(88.0±3.3)%,而25mg/L剂量组为(11.5±2.7)%,与对照组(10.6%±1.8)%无明显差异。MTT法检测结果IC50值为88.4mg/L,200mg/L抑制率达到89.27%。细胞周期显示150mg/L时G1期细胞增加,G2期和S期细胞下降。Western-blotting结果表明Bcl-2蛋白高表达,处理前后无明显变化,而Bax蛋白表达随药物浓度提高而上升,活化的Caspase3在100mg/L表达最高。结论:阿奇霉素可以有效的诱导Jurkat细胞凋亡并呈明显的浓度依赖性,其凋亡途径可能是通过Bax蛋白表达上升诱导下游效应分子Caspase3活化实现。细胞增殖抑制试验表明200mg/L以上时细胞增殖明显受抑制,细胞周期分析提示细胞增殖阻滞在了G1期。
- 赵印敏周彩存杨晓君赵丽娜唐亮粟波
- 关键词：白血病阿奇霉素凋亡JURKAT细胞
- Ⅳ型胶原对耐顺铂人肺腺癌细胞化疗诱导凋亡的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨细胞外基质(extracelluarmatrix,ECM)成分中Ⅳ型胶原对耐药NSCLC细胞的药物敏感性和凋亡的影响,及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3′kinase,PI3K)在其信号转导通路中的作用。方法:体外培养顺铂耐药人肺腺癌细胞株A549(A549/DDP),应用MTT比色法测定细胞增殖抑制率;通过细胞粘附实验观察细胞粘附状况;流式细胞仪检测DDP作用前后Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,CⅣ)及PI3K抑制剂LY294002对细胞凋亡的影响。结果:CⅣ组及多聚赖氨酸(polylysine,PLL)组与不包被组相比,细胞粘附明显增加(P<0.001);而纤连蛋白(fibronectin,FN)的粘附与不包被组相比无明显差异(P>0.05)。CⅣ包被后DDP对A549/DDP的IC50由169.9μmol/L升高至258.3μmol/L,再联合LY294002则DDP对A549/DDP的IC50降至87.1μmol/L;CⅣ明显降低DDP引起的A549/DDP细胞凋亡,LY294002则可阻断CⅣ的这种保护作用(均为P<0.05)。结论:Ⅳ型胶原可能参与NSCLC耐药形成,PI3K可能是其信号转导通路之一。
- 苏春霞周崧雯赵印敏粟波周彩存
- 关键词：细胞外基质耐药
- 西妥昔单抗联合多西紫杉醇对EGFR-TKI获得性耐药的非小细胞肺癌细胞的作用被引量：5
- 2014年
- 目的 :探讨西妥昔单抗联合多西紫杉醇对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)获得性耐药的非小细胞肺癌PC9/G2细胞的体内外作用。方法 :应用不同浓度的西妥昔单抗、多西紫杉醇和西妥昔单抗联合多西紫杉醇处理PC9/G2细胞,MTT法检测细胞的增殖率并计算半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)。西妥昔单抗(40μg/mL)、多西紫杉醇(25μmol/L)和西妥昔单抗(40μg/mL)联合多西紫杉(25μmol/L)处理PC9/G2细胞后,FCM法检测细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞中EGFR和EGFR pTyr1173、pTyr1086及pTyr845蛋白的表达。建立PC9/G2细胞裸鼠移植瘤模型,分别应用西妥昔单抗(10 mg/kg)、多西紫杉醇(40 mg/kg)和西妥昔单抗(10 mg/kg)联合多西紫杉醇(40 mg/kg)进行腹腔注射,观察移植瘤的生长情况。结果 :西妥昔单抗联合多西紫杉醇作用PC9/G2细胞的IC50值明显低于西妥昔单抗和多西紫杉醇单药组(P<0.01),西妥昔单抗联合多西紫杉醇作用PC9/G2细胞的凋亡率明显高于西妥昔单抗和多西紫杉醇单药组(P<0.01)。西妥昔单抗单药和西妥昔单抗联合多西紫杉醇作用后,PC9/G2细胞中EGFR pTyr1173和pTyr1086蛋白表达水平明显下调(P<0.01),而EGFR和EGFR pTyr845蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)。西妥昔单抗联合多西紫杉醇处理组PC9/G2细胞裸鼠移植瘤的抑瘤率明显高于西妥昔单抗和多西紫杉醇单药组(P<0.01)。结论:西妥昔单抗联合多西紫杉醇可在体内外抑制PC9/G2细胞的增殖。
- 张玲李雪飞唐亮赵印敏周彩存
- 关键词：酪氨酸激酶抑制剂西妥昔单抗
- 三氯化铟对人正常肺上皮细胞增殖的影响及其机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨不同浓度三氯化铟（InCl3）对人正常肺上皮（Beas-2B）细胞增殖的影响及其可能机制。方法不同浓度（0、0．3、1．0、3．0、10．0、30．0、90．0、270．0、810．0μmol／L）InCl3分别处理Beas-2B细胞24、48和72h，用CCK-8法检测InCl3对细胞增殖的影响；用Annexin V-PI双染，经流式细胞术检测InCl3对细胞凋亡的影响；以2’，7’-二氯荧光黄双乙酸盐为探针，用流式细胞术检测InCl3染毒后Beas-2B细胞内的活性氧（ROS）水平。结果0．3～3．0μmol／LInCl3组的细胞存活率明显升高，而30．0～810．0μmol／LInCl3组72h后细胞存活率降低，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；0．3μmol／LInCl3组在72h内都未能引起细胞凋亡的发生，而30．0和810．0μmol／LInCl3组72h后引起明显的细胞早期凋亡，0.3μmol/LInCl3组72h内ROS含量与对照组相比略微下降，而30．0和810．0μmol/LInCl3组72h后，细胞内ROS含量明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论低浓度InCl3可能通过降低细胞内ROS促进细胞增殖，而高浓度InCl3则通过引起细胞内ROS升高、细胞凋亡而发挥其抑制细胞活力的作用。
- 刘佳赵印敏唐亮俞平孙道远
- 关键词：铟BEAS-2B细胞凋亡活性氧
- 胰岛素样生长因子1在非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药机制中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)耐药的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株和患者中的表达和临床意义。方法 ELISA法检测PC9、A549、H1975细胞和患者血清IGF-1水平,蛋白质印迹和免疫细胞化学法检测细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的表达;MTT法检测吉非替尼和IGF-1受体拮抗剂BMS536924处理后的细胞增殖;收集84例接受EGFR-TKIs治疗患者的临床资料,分析IGF-1表达与临床病理特征和生存期的相关性。结果同吉非替尼敏感细胞株PC9相比,耐药细胞株H1975和A549中IGF-1表达增加(P<0.05),IGFBP表达降低;加入不同浓度的BMS536924可促进吉非替尼对耐药细胞株的增殖抑制(P<0.05)。在接受EGFR-TKIs治疗的患者中,疾病进展者的IGF-1水平较疾病控制者有所增高(P=0.052);原发性耐药者较获得性耐药者的IGF-1水平升高(P=0.02)。IGF-1表达阴性患者的生存期高于阳性患者(P=0.002)。结论 IGF-1在耐药NSCLC细胞株及患者血清中均有高表达,使用IGF-1R拮抗剂可逆转耐药细胞对EGFR-TKIs的反应;IGF-1表达与患者预后相关。
- 倪健徐瑛陈斌苏春霞唐亮赵印敏徐建芳
- 关键词：胰岛素样生长因子1表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂肿瘤抗药性非小细胞肺癌
- NTX检测在肺癌骨转移中的诊断和判断疗效价值被引量：2
- 2013年
- 肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，我国也是肺癌的高发地区之一。晚期肺癌患者骨转移发生率为30％，40％，骨相关事件（skeletal related event，SRE）的发生，严重影响患者的生活质量和生存时间。
- 孙辉陈晓霞赵印敏任胜祥周彩存
- 关键词：肺癌骨转移NTX肺癌患者骨相关事件恶性肿瘤
- 吉非替尼耐药细胞株的筛选和基因谱表达研究被引量：9
- 2008年
- 目的:从对吉非替尼(gefitinib)敏感的肺腺癌细胞株PC9中筛选并建立了6株gefitinib耐药细胞亚克隆并研究其生物学特性。方法:采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱变筛选和有限稀释法进行耐药性亚克隆的单细胞培养,MTT法检测肿瘤细胞对gefitinib的敏感性和IC50,DNA微列阵检测耐药细胞株与野生型PC9细胞的基因表达差异,免疫组织化学法测定细胞外间质成分fibronectin和collagenⅣ的表达差异,FCM法进行细胞周期分析。结果:获得了对gefitinib具有较高耐药性的2个细胞株:PC9/G2和PC9/G4,尤其PC9/G2的IC50为7～10μmol/L,较野生型PC9细胞(IC50:0.03～0.05μmol/L)提高耐受性160～260倍。PC9的细胞倍增时间为(16.2±3.5)h,PC9/G2的倍增时间为(36.5±4.8)h。PC9/G2同PC9的基因表达谱存在明显差异,耐药细胞株PC9/G2的脂肪酸代谢和氧化磷酸化基因表达下降,糖酵解基因表达上升,核糖体各亚基蛋白表达下调,高尔基体和囊泡、笼形蛋白衣被小泡等相关基因表达上调,细胞蛋白分泌功能加强;泛素-蛋白酶体循环相关基因上调;DNA修复基因和解旋酶类基因表达上调;具有蛋白激酶活性的30个基因表达上调,11个基因表达下调;15个磷酸化蛋白磷酸酶活性的基因表达上调;具有GTP结合活性的基因21个表达上调,4个下调;涉及细胞骨架和细胞运动功能的8个基因上调;整合素β1亚基、类胰岛素受体、NFκB级联反应的正向调节因子表达上调。结论:成功建立了6株PC9细胞的gefitinib耐药细胞株,初步研究表明对gefitinib中度耐药可能与细胞外基质组分改变及其黏附信号通路有关,对gefitinib高度耐药则可能涉及替代性信号通道的激活和信号通道的下游激活。
- 粟波苏春霞张海平邓沁芳赵印敏周彩存
- 关键词：肺肿瘤抗药性肿瘤细胞基因表达吉非替尼
- 肿瘤双靶点RGD10-NGR9超顺磁性氧化铁的构建及其动物磁共振成像特点被引量：3
- 2013年
- 目的构建肿瘤血管生成靶向的双靶点RGD10-NGR9超顺磁性氧化铁（USPIO），评价其作为活体磁共振成像（MRI）肿瘤特异性诊断制剂的能力及其成像特点。方法设计合成RGD10-NGR9双靶点杂合肽。采用共沉淀法制备网状交联葡聚糖包覆的USPIO，环氧氯丙烷活化葡聚糖，共价偶联靶向多肽，制备靶向多肽-网状交联葡聚糖-顺磁性氧化铁复合粒子（P—CLN—Dextran—USPIO），并检测其物理性质。采用普鲁士蓝染色和邻菲罗啉比色法检测P—CLN—Dextran．USPIO体外细胞结合能力。建立裸鼠荷A549瘤模型，评价双靶点RGD10-NGR9-SPIO应用于裸鼠MRI检测的价值。结果成功制备P-CLN—Dextran—USPIO，其中Fe3O4粒径8～10nm左右，Dextran—USPIO的总粒径平均为20nm左右，P—CLN—Dextran—USPIO的总粒径在30nm左右，物理性质稳定。普鲁士蓝染色显示，非靶点USPIO组HUVEC细胞质内未见蓝色铁颗粒，RGD10-USPIO组和NGR9-SPIO组HUVEC细胞质内均可见蓝色铁颗粒，RGD10-NGR9-USPIO组HUVEC细胞质内蓝色铁颗粒最明显。邻菲罗啉比色显示，非靶点USPIO组、RGD10-USPIO组、NGR9-SPIO组和RGD10-NGR9-SPIO组细胞内的铁浓度分别为（1．93±0．35）μmol／L、（4．74±0．76）μmol／L、（5．85±0．48）μmol／L和（10．32±1．22）μmol／L，RGD10-NGR9-USPIO胞内的铁浓度最高，与非靶点USPIO组、RGD10-USPIO组、NGR9-SPIO组差异有统计学意义（均P〈0．05）。裸鼠MRI显示，双靶点RGD10-NGR9-SPIO可以减弱肿瘤部位信号，显著提高肿瘤部位与周围组织之间的病灶对比度噪声比（CNR），较未注射时提高2．83倍（P〈0．05）。结论双靶点RGD10-NGR9-USPIO作为一种阴性造影剂，具有肿瘤新生血管MRI分子成像的应用价值。
- 吴琼雅史景云张颉张霖倩赵印敏唐亮陈芸贺晓东刘辉粟波
- 关键词：超顺磁性氧化铁精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸
- 整合素β1信号通路参与非小细胞肺癌细胞吉非替尼获得性耐药的研究
- 邓沁芳徐建芳粟波赵印敏周彩存
- 博莱霉素诱导人肺泡上皮细胞过程中核转录因子-κB对核因子2相关因子2信号通路的调控机制被引量：1
- 2014年
- 目的 观察人肺泡上皮细胞HPAEpiC中核转录因子-κB （NF-κB）基因沉默前后核因子2相关因子2（Nrf2）及其相关表达产物含量的变化,探讨博莱霉素诱导的过程中NF-κB对Nrf2信号通路的调控机制.方法 应用慢病毒技术沉默人肺泡上皮细胞HPAEpiC中的NF-κB基因,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测博莱霉素诱导前后HPAEpiC细胞中的Nrf2、胞浆蛋白伴侣分子（Keap1）、Cullin3蛋白（Cul3）、Rbx1、蛋白激酶C（PKC）、磷酸肌醇3激酶（PI3K）、细胞外信号调节激酶（ERK）、NF-κB、κB抑制蛋白（IκB）的mRNA相对表达量,采用流式细胞术膜联蛋白V（Annexin V）-红色荧光蛋白（RFP）单染法检测各实验组的细胞凋亡率,采用Western blot检测NF-κB、Nrf2及其相关蛋白的表达量.结果 慢病毒感染HPAEpiC细胞后NF-κB基因表达下降90.6％,博莱霉素诱导后NF-κB沉默的人肺泡上皮细胞中Nrf2基因表达量上升142.6％,并与NF-κB、κB抑制蛋白（IκB）、Keap1、Cul3、Rbx1表达呈负相关,PI3K表达增加11.6倍而PKC、ERK无明显变化,其凋亡率与对照组比较增高.结论 在博莱霉素诱导的过程中,HPAEpiC细胞的NF-κB表达量增加可以抑制Nrf2的功能.在NF-κB被沉默的情况下,Nrf2通过PI3K途径并同时降低Keap1-Cu13-RBx1复合物表达实现活化,可能通过启动其下游的抗氧化反应,减少博莱霉素导致的氧自由基对细胞的损伤.
- 赵印敏汤中文郑卉粟波唐亮陈昶
- 关键词：核转录因子-ΚB
