钱关祥
- 作品数：126 被引量：282H指数：8
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- CArG调控元件辐射诱导活性的研究
- 2006年
- 目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒。利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Csγ射线照射,36h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性。结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3Gy的γ射线照射下诱导活性最强。结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力。
- 徐让卢健钱关祥
- 关键词：基因治疗肿瘤细胞
- hGM-CSF基因克隆、病毒包转及转染人胃癌、肝癌细胞的研究
- 1995年
- hGM-CSF是一种细胞因子．具有对单核巨噬细胞趋化作用及提高它们对肿瘤的吞噬功能，并且能增加粒细胞粘附分子的表达，ADCC杀瘤作用。为了研究hGM-CSF修饰的肝癌细胞，胃癌细胞的方法．我们从人外周血淋巴细胞通过RT-PCR克隆了hGM-CSF基因．鉴定大小后，克隆人pBIuscript和LXSN中，
- 王立群钱关祥陈诗书戈凯郑仲承刘新垣
- 关键词：肝癌细胞人胃癌转染HGM-CSF人外周血淋巴细胞趋化作用
- PNP/fludarabine自杀基因系统对人肝癌细胞HepG2体外杀伤效应被引量：4
- 2004年
- [目的]研究嘌呤核苷酸磷酸化酶(purinenucleosidephosphorylase,PNP)/氟拉达滨(fludarabine)系统对人肝癌细胞HepG2体外杀伤效应。[方法]通过基因克隆技术将E.coliK12菌株来源的PNP基因通过8个甘氨酸的linker克隆至pEGFP鄄N1载体,在LipofectAMINE2000介导下,转染人肝癌细胞株HepG2,同时进行G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,命名为HepG2/PNP。通过PCR、RT鄄PCR、Northernblot鉴定PNP基因的表达;采用MTT和AnnexinV鄄FITC观察不同浓度的fludarabine对已转染的HepG2、不同比例转染和非转染混合细胞的杀伤作用。[结果]RT鄄PCR和Northern印迹证明转染的PNP基因能在HepG2和HepG2/PNP细胞中表达;低浓度fludarabine对转染了PNP基因的HepG2细胞具有显著的细胞毒效应;AnniexV凋亡实验结果表明PNP/fludarabine自杀基因系统对HepG2细胞具有显著的诱导凋亡作用;旁观者效应显示当10%~20%的HepG2/PNP细胞与80%~90%HepG2细胞混合在fludarabine浓度为1.0μg/ml时,可出现明显的旁观者效应。[结论]PNP/flu鄄darabine自杀基因系统在fludarabine浓度为0.5μg/ml～1.0μg/ml时对人原发性肝癌细胞HepG2具有明显的杀伤作用和旁观者效应。
- 李锋张萍王楚钱关祥
- 关键词：肝癌细胞自杀基因
- 人TNF-α基因修饰成纤维细胞的抗肿瘤研究被引量：9
- 1997年
- 为了探讨人TNF-α基因修饰的成纤维细胞在体内的抗肿瘤作用,本文应用含脑心肌炎病毒(EMCV)内核糖体进入位点(IRES)的双顺反子逆转录病毒载体pGCEN/TNF-α来转导TNF-α基因至小鼠成纤维细胞NIH3T3.人TNF-α基因修饰的成纤维细胞NIH3T3/TNF-α能持续高水平表达TNF-α,在小鼠肝癌H22细胞皮下植入后第3天或第7天,肿瘤部位直接注射2.5×10~5NIH3T3/TNF-α.或1×10~6NIH3T3/TNF-α能明显抑制肿瘤生长(P<0.05),增加小鼠存活率(P<0.025).可见人INF-α基因修饰的成纤维细胞有望成为一种安全、简便且有效的肿瘤生物治疗新途径.
- 赖冠华唐展云王克敏钱关祥陈诗书
- 关键词：成纤维细胞基因修饰肿瘤坏死因子抗肿瘤作用
- 逆转录病毒载体在血友病A基因治疗中的研究进展被引量：1
- 2001年
- 基因治疗是彻底治愈血友病Ａ的最理想方法。逆转录病毒是最为常用的载体之一。本文对逆转 录病毒在血友病Ａ基因治疗中的研究进展作一综述。
- 梅文瀚卢健钱关祥
- 关键词：逆转录病毒基因治疗血友病
- 一种可诱生细胞免疫应答的共表达载体和真核表达载体
- 本发明涉及生物技术领域，具体地说关于一种可诱生细胞免疫应答的pGL3/CD80－P1A共表达载体和pcDNA3.1/B2M－IL15真核表达载体。本发明所公开一种可诱生细胞免疫应答的pGL3/CD80－P1A共表达载体和...
- 张兴黔钱关祥梅文瀚方丽娟钱丽
- 文献传递
- 应用可调控Notch1干扰载体诱导HeLa细胞增殖抑制被引量：2
- 2007年
- 背景与目的:Notch信号转导途径与细胞增殖与分化的调控密切相关,它的功能失调在肿瘤细胞的增殖分化中发挥着重要的作用。本研究构建了针对Notch1的可调控RNA干扰载体,并从分子水平及细胞水平上研究其对HeLa细胞的影响。方法:利用受CRE重组调控的RNA干扰载体pSico和pSicoR构建针对GAPDH和Notch1的shRNA表达载体,以pBS185-CRE作为CRE蛋白的表达载体,将HeLa细胞分为pSico、pSico/CRE、pSicoR和pSicoR/CRE4组,分别转染相应质粒,RT-PCR和Westernblot法检测干扰效率,CBF-1荧光素酶报告载体检测细胞内活性Notch信号水平,MTS实验检测细胞增殖状态。结果:各组细胞在转染重组质粒pSico(R)-GAPDH和pSico(R)-Notch1后,EGFP的表达均表现出明显的CRE依赖性;RT-PCR和Westernblot实验显示,pSico(R)-Notch1载体能在CRE蛋白的调控下抑制Notch1基因的表达,CBF-1荧光素酶报告载体实验可见,Notch1的干扰作用使细胞内Notch信号水平下降;MTS实验可见Notch1干扰引起的HeLa细胞增殖抑制。结论:由可调控RNA干扰载体介导的CRE依赖性Notch1表达降低能降低细胞内Notch信号水平并抑制HeLa细胞增殖。
- 俞海黄盛林赵小平卢健钱关祥葛盛芳
- 关键词：NOTCHHELA细胞CRE
- 基因治疗中若干关键问题的基础研究
- 钱关祥戴冰冰卢健李锋应磊张萍梅文瀚徐荣婷胡亮王克敏
- 该项目是针对基因治疗中存在的一些关键问题的基础研究工作，从目的基因的克隆，基因表达的靶向性以及基因表达水平的提高多个方面进行了研究。主要用于基因治疗中进一步的基础以及临床研究工作。主要是：用于提高肿瘤基因治疗中的目的基因...
- 关键词：
- 关键词：基因治疗靶向表达
- 肿瘤基因治疗的腺病毒策略被引量：4
- 2007年
- 腺病毒载体是目前肿瘤临床试验中使用最为广泛的载体之一。在过去的十几年里，随着人们对腺病毒活动周期的逐步了解，已经开发出了一系列专门针对恶性肿瘤细胞的靶向腺病毒载体。这些载体可以在特定的细胞中表达治疗性基因或进行自主复制，显示了其在肿瘤治疗方面的独特优势。但目前对腺病毒进行的各种改进方式都存在不同程度的缺陷，因此仍需进一步研究。文章讨论腺病毒载体用于肿瘤基因治疗方面的一些基本情况及其在临床应用的潜力。
- 张建军钱关祥葛盛芳
- 关键词：肿瘤基因疗法腺病毒
- 分化早期小儿急性白血病细胞免疫球蛋白和T细胞受体基因结构的变化被引量：3
- 1991年
- 从29例免疫分型的小儿急性白血病中选出髓过氧化物酶染色阴性和不与细胞系相关或成熟细胞系相关的单克隆抗体反应的6例白血病细胞,进一步作免疫球蛋白(包括重链和κ轻链)和T细胞受体(包括δ、γ、β)基因结构的分析。所有6例均有IgH基因的重排,提示这些白血病细胞是β细胞来源。两例CD_(10)阴性和白病细胞.κ链基因没有重排,其中一例的TCRδ、γ、β基因也都处于胚系,另一例的TCRβ处于胚系。在CD_(10)阳性白血病细胞中,其中两例κ链基因丢失,TCR基因结构都有不同程度的变化(重排或丢失)。这些结果可能提示在CD_(10)阳性白血病细胞中能产生功能性IgH的重排,并可导致IgL和TCR基因结构的变化。
- 钱关祥仇一华徐铿林梓应大明陈诗书
- 关键词：白血病免疫球蛋白T细胞受体
