阮庆国
- 作品数：11 被引量：58H指数：3
- 供职机构：湖南医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 与Atrophin-1同源的人类新基因的克隆和定位
- 1999年
- 将齿状核红核苍白球路易氏体退行性病变(DRPLA)致病基因(Atrophin-1)cDNA序列对EST数据库进行同源性比较,得到与(Atrophin-1显著相似的EST 25个,依EST间的相互关系构建5个EST重叠群。根据其中的3个EST重叠群设计引物,对cDNA文库扩增,PCR法制备探针,筛选人cDNA和gDNA文库。cDNA克隆经测序,拼接,获得含完整编码区的cDNA序列4.6kb(命名为Atrophin样基因,Atrophinlike gene),其中有一个3036bp的阅读框架。基因编码区由9个外显子构成。基因组DNA克隆,经荧光原位杂交定位于1p36。人、鼠Atrophin-1基因家族各成员的比较分析显示,均为亲水性较强的蛋白质,其C端保守性较强,有2个酸性与碱性氨基酸交替区。DRPLA,Haw River综合征与Atrophin-1中CAG的过度重复相关,而人类Atrophin样蛋白中不含长的多聚谷氨酰胺残基(其基因中只有3次CAG的重复)。
- 夏家辉刘春宇王德安阮庆国崔峰谢微潘乾廖晓东戴和平邓汉湘
- 关键词：致病基因基因克隆基因家族
- 遗传性多发性外生骨疣基因突变研究被引量：1
- 1999年
- 目的进一步阐明遗传性多发性外生骨疣（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｍｕｌｔｉｐｌｅｅｘｏｓｔｏｓｅｓ，ＥＸＴ）的发病机理，并为最终防治本病提供依据。方法采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析，在３０个ＥＸＴ家系中进行ＥＸＴ１基因和ＥＸＴ２基因全部外显子突变检测，并对发现的致病突变进行ＤＮＡ测序分析。结果在２个家系中发现了致病突变，并经ＤＮＡ序列分析证实，一个系ＥＸＴ１基因ｅｘｏｎ６区域单个碱基（Ｔ）丢失；另一个系ＥＸＴ２基因ｅｘｏｎ２区域４个碱基（ｔｇｔ）丢失，前者系国内首次报道，后者系尚未见报道的新突变，这两种突变均系移码突变。结论ＥＸＴ１基因或ＥＸＴ２基因突变，可导致ＥＸＴ，本研究结果可直接应用于ＥＸＴ的遗传咨询和产前基因诊断。
- 宋国清周江南夏家辉邓汉湘邓汉湘黄蕾徐磊
- 关键词：外生骨疣EXT基因突变骨骼疾病
- 一个新的蛋白激酶基因DYRK3的克隆及其特征分析被引量：2
- 1998年
- 目的分离一个与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ，并推测其分类和功能。方法应用与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源的３′端部分ｃＤＮＡ序列为探针，筛选ｃＤＮＡ文库和ｇＤＮＡ文库，并进行氨基酸序列同源性分析和ＦＩＳＨ定位。结果从人的骨骼肌ｃＤＮＡ文库和睾丸ｃＤ－ＮＡ文库各分离到一个新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ。骨骼肌来源的ｃＤＮＡ编码５８８个氨基酸的蛋白质，睾丸来源的ｃＤＮＡ编码５６８个氨基酸的蛋白质，前者第２７个氨基酸以后的序列与后者第７个氨基酸以后的序列完全一致。结论推测这两个ｃＤＮＡ是同一基因在骨骼肌组织和睾丸组织中的不同剪接本。由于该基因与人的ＤＹＲＫ２高度同源，故称之为ＤＹＲＫ３基因。ＤＹＲＫ３与丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶酵母Ｙａｋ１，人和果蝇的Ｍｎｂ，人的Ｃｌｋ１等有较高的同源性，也与人的Ｃｄｋ２等其它丝氨酸／苏氨酸激酶有同源性。作者认为ＤＹＲＫ３是属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶ＣＭＧＣ组Ｃｌｋ家族新的一员。该基因定位在１ｑ３２。
- 夏家辉杨新平阮庆国潘乾刘春宇谢微邓汉湘
- 关键词：蛋白激酶CDNA基因克隆
- 人类M6b基因一种剪接型cDNA的分子克隆被引量：2
- 1999年
- 蛋白脂蛋白（PLP）基因突变导致Pelizaeus－Merzbacher病（PMD）和部分X-连锁的痉挛性截瘫。Olinsky等克隆了M6b的部分序列（U45955），该基因认为是PLP基因家族成员之一。我们以巢式PCR得到一约300hp的片段，测序为与U45955的5′端局部重叠的新序列，拼接后得到1．642kb的序列，其中含有可编码265个氨基酸的开放阅读框。此阅读框经对脑cDNA文库PCR产物的测序确证（命名为M6ba）。M6ba的CDNA序列及其编码氨基酸序列与小鼠中M6b基因和蛋白质序列显著相似（分别为91．2％和93.4％一致）。Northern杂交的结果及cDNA文库PCR扩增、EST数据库分析的结果提示M6b基因至少存在3种剪接形式。M6ba基因与PLP基因显著相似，并且两蛋白质在所有疏水区高度保守。M6ba基因结构的分析，显示此基因编码区由7个外显子构成。
- 夏家辉刘春宇阮庆国潘乾廖晓东傅俊江崔峰邓汉湘
- 关键词：PLP分子克隆蛋白脂蛋白
- 人类染色体8q24.1带36个单拷贝的克隆与筛选被引量：1
- 1994年
- 显微切割人类染色体8q24.1带DNA的初级PCR产物与pUC19质粒载体进行体外连接,转化大肠杆菌DH5a,获得了329个白色克隆。已分析的53个克隆中,有36个单拷贝,这些单拷贝片段长度介于105bp～960bp间,平均350bp,它们与正常人基因组DNA杂交显示各自特异性,可作为8q24.1带的特异性遗传标记。
- 黎伶俐夏家辉李麓芸邓汉湘何小轩黄蕾阮庆国付俊江
- 关键词：显微切割微克隆
- 荧光原位杂交法定位人类染色体8q24.1单拷贝探针被引量：1
- 1996年
- 运用基因组DNA文库筛选法和荧光原位杂交法成功地定位了来自人类染色体8q24.1显微切割文库中的两个单拷贝探针,结果证明这两个探针确实来自于所切割区域,从而为进行遗传病的RFLP分析和人类基因组分析提供了有意义的遗传标记。
- 阮庆国邓汉湘潘乾黄蕾廖晓东夏家辉
- 关键词：基因组染色体分子遗传学
- 克隆基因的策略
- 1996年
- 分离和鉴定人类遗传病的致病基因是人类基因组计划的一个重要目标。由于克隆基因工作的复杂性和艰巨性,迄今为止只克隆到26种遗传病的致病基因。本文分类综述了克隆基因的几种策略,并对它们的优点和局限性进行了讨论。
- 阮庆国付俊江
- 关键词：基因克隆遗传病致病基因
- 人类7号染色体专特性探针池的构建及应用被引量：6
- 1994年
- 本文用显微切割,PCR技术和染色体绘画技术,构建了人类第七号染色体特异性探针池,并完成了一个7号染色体结构异常患者的家系分析。
- 夏家辉杜娟戴和平傅俊江潘乾龙志高阮庆国李麓芸
- 关键词：染色体显微切割探针池
- 人类高分辨染色体显微切割、PCR、微克隆、探针池技术及其应用
- 邓汉湘夏家辉何小轩李麓芸杨毅戴和平阮庆国潘乾廖晓东
- 为使医学遗传学国家重点实验室在分子遗传学领域赶上世界先进水平，我室于88年3月1日向国家自然科学基金申报了将染色体显微切割与PCR相结合定向进行基因克隆的高技术课题，在未获经费支持的条件下，于89年10月在世界上首创了利...
- 关键词：
- 关键词：染色体显微切割PCR基因克隆
- 基因突变分析技术综述被引量：42
- 1998年
- 基因突变分析是确定某一未知基因与某遗传病之间关系的关键步骤，也是临床上对病人进行基因诊断的重要手段，本文对１９种基因突变分析技术进行了分类综述，特别对近几年发展起来的几种新技术进行了详细介绍。
- 阮庆国陆春叶
- 关键词：基因突变分析技术毛细管电泳
