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陈利苹: 作品数：27 被引量：51H指数：3; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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副结核分枝杆菌MAP1068胞外蛋白酶的特性研究被引量：1: 2019年; 为研究副结核分枝杆菌(MAP)1068蛋白的特性,本研究以MAP参考株K10基因组为模板,PCR扩增其map1068基因,构建p ET28a-map1068重组载体,将其转化BL21后诱导表达并纯化MAP1068蛋白。利用纯化的重组蛋白免疫(100μg/只/0.1 m L)小鼠制备多克隆抗体,应用该抗体对MAP1068蛋白进行亚细胞定位。以酪蛋白为底物测定MAP1068蛋白的酶活性。结果显示,MAP1068蛋白以包涵体形式表达;经变性、复性、亲和层析纯化后获得目的蛋白;将该蛋白免疫小鼠后其血清抗体效价可达1∶204 800;该蛋白主要定位于MAP细胞壁,可降解酪蛋白,为胞外蛋白酶。本实验为进一步研究MAP的致病机制奠定了基础。; 王忠星党光辉党光辉臧鑫鑫崔莹莹崔莹莹宋宁宁宋宁宁陈利苹; 关键词：副结核分枝杆菌酶活性

结核分枝杆菌rv3802c基因双顺反子真核表达质粒的构建及鉴定: 2014年; 为了构建结核分枝杆菌rv3802c基因双顺反子真核表达质粒,本研究利用重叠延伸PCR技术扩增出rv3802c-HisFlag基因片段,将其克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)上,测序验证后,将基因合成的内部核糖体进入位点和增强型红色荧光蛋白基因片段(IRES-DsRed2)定向插入到这个重组质粒上,经酶切鉴定获得双顺反子表达质粒pC3.1-3LHF-Red。将质粒pC3.1-3LHF-Red转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,通过荧光显微镜观察到增强型红色荧光蛋白成功表达;经Western blot分析表明Rv3802c-HisFlag融合蛋白在CHO细胞中获得了表达。结果表明,本研究成功构建了共表达增强型红色荧光蛋白和Rv3802c-HisFlag融合蛋白的双顺反子表达质粒pC3.1-3LHF-Red,为进一步研究结核分枝杆菌Rv3802c蛋白在分枝杆菌感染细胞过程中的作用奠定基础。; 张娈娈陈利苹曹俊崔保亮李华芳刘思国; 关键词：CHO细胞

一种大肠杆菌与副猪嗜血杆菌穿梭载体pSHK4及制备方法与应用: 本发明涉及基因工程技术领域，目的在于构建一种大肠杆菌与副猪嗜血杆菌之间的穿梭载体，该载体被命名为pSHK4，其包含有如序列表SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，它的编码区位于该序列的927-1742位序列对应的序列，...; 徐晓娟陈利苹陈焕春蔡旭旺吴东方郭凤娟王湘如; 文献传递

结核分枝杆菌rv0199基因在耻垢分枝杆菌中的表达及检测被引量：2: 2014年; 为研究结核分枝杆菌(M.tb)rv0199基因在该病原致病性中可能发挥的作用,本研究克隆了rv0199基因,在耻垢分枝杆菌(Ms)中异源表达,并对其表达进行检测。将大肠杆菌—分枝杆菌穿梭表达载体pMV261进行改造,向载体中引入常用的6His和StrepⅡ重组蛋白标签,命名为pMV262。使用Ms/pMV262表达系统对rv0199基因进行超表达,用抗6His标签抗体和抗StrepⅡ标签抗体均能特异的检测到重组蛋白。本试验改造的pMV262穿梭表达载体可很方便的检测M.tb的基因在Ms中的异源表达,不用制备针对蛋白的多克隆抗体或单克隆抗体。构建的重组菌Ms/262-99为进一步研究rv0199基因的功能提供了材料,奠定了基础。; 崔保亮陈利苹张娈娈李华芳刘思国; 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌

副猪嗜血杆菌分离株内源性质粒的分离、分析及应用: 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是猪上呼吸道的一种常在菌,特定条件下可入侵机体引起严重的全身性感染,称为格拉瑟氏病,表现为多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎。世界各主要养猪国家都有该病发生或流...; 陈利苹; 关键词：副猪嗜血杆菌穿梭载体; 文献传递

结核分枝杆菌新型分泌性核酸酶(Rv0888)的特性研究: 引言许多种细菌能产生胞外核酸酶,胞外核酸酶在细菌毒力、生物被膜的形成、利用胞外DNA作为营养和降解胞外诱捕网(NETs)的DNA中起着重要作用。结核分枝杆菌(M. tuberculosis)是引起结核病的主要病原菌,为革...; 党光辉曹俊崔莹莹宋宁宁陈利苹庞海刘思国; 文献传递

鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选: 2013年; 为筛选减毒肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini-Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidis SM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营养缺陷培养平板筛选法构建了SM6的随机转座突变体库。其中包含5个子库,共计获得364株突变体,经PCR鉴定表明转座子均插入SM6株的基因组中。通过Caco-2细胞侵袭试验筛选S.enteritidis侵袭力减弱并在细胞内增殖受到抑制的减毒突变株,经初筛及验证最终获得3株稳定减毒菌株,为进一步研究减毒菌株突变毒力基因的定位及SM6株的侵袭及感染机制奠定了基础。; 吕爽朱婷王秀梅刘慧芳司微于申业陈利苹刘思国; 关键词：肠炎沙门氏菌转座子突变体库

猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：24: 2007年; 通过生化试验、药敏试验、PCR分型、毒力基因的PCR检测及动物试验对分离的猪源链球菌进行药物敏感性、血清型和分子流行病学初步研究。从不同省份猪链球菌病疑似病例猪的心血、肝、淋巴结、脑和关节液组织分离出97株链球菌,药敏试验结果表明各菌株对13种抗菌素的耐药谱不同,但对先锋霉素V和环丙沙星的耐药率均低于5%。通过对分离菌株进行PCR鉴定和分型,确认26株为猪链球菌,其中1株为1型,16株为2型,4株为7型,没有9型,另5株为其它型。进一步对1型、2型和7型猪链球菌mrp、epf和sly3种毒力基因的分布情况进行了PCR检测。动物试验表明能100%致死小白鼠的猪链球菌基因型均为epf+mrp+sly+2型猪链球菌,1株2型和1株7型猪链球菌均能复制出典型的猪链球菌病例。; 赵战勤胡睿铭吴斌向敏陈利苹杨明柳金梅林陈焕春; 关键词：链球菌药敏试验 PCR 毒力因子

细菌菌蜕在制备病毒性疫苗佐剂中的应用: 本发明公开了细菌菌蜕在制备病毒性疫苗佐剂中的应用，本发明还公开了一种细菌菌蜕的大规模发酵方法。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了细菌菌蜕的大规模制备方法，为菌蜕疫苗的商品化生产奠定了坚实的基础；此外，本发明系统性的...; 刘思国于申业司微危艳武陈利苹; 文献传递

一种新型的结核分枝杆菌胞外核酸酶及其用途: 本发明公开了一种新型的结核分枝杆菌胞外核酸酶及其用途。本发明证实了Rv0888是结核分枝杆菌的一个胞外核酸酶。基于序列分析，Rv0888核酸酶与已知的胞外核酸酶没有同源性，表明Rv0888是一个新型的胞外核酸酶。Rv08...; 刘思国陈利苹宋宁宁; 文献传递