陈婷
- 作品数:16 被引量:76H指数:4
- 供职机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程建筑科学更多>>
- 甘油诱导的骨骼肌损伤修复过程肌间脂形态学及肌分泌因子表达变化被引量:1
- 2015年
- 研究发现在甘油诱导的小鼠肌肉损伤修复过程中可能存在肌间脂的沉积,而肌肉分泌因子(myokines)作为特殊的蛋白参与了肌肉与脂肪的多种生理过程.为研究肌肉内注射甘油后对肌间脂生成的影响,以及注射后肌肉分泌因子在肌肉损伤后修复及肌间脂沉积过程中的表达趋势,本文选用三月龄C57BL/6品系小鼠,右腿胫骨前肌注射50%HBSS(V/V)甘油,左腿胫骨前肌注射等量的HBSS缓冲液作为对照.取注射后不同时期小鼠的胫骨前肌,冰冻切片技术检测肌肉再生及肌间脂沉积状况,实时定量PCR检测各分泌因子(IL-6、IL-15、MSTN、FNDC5、FGF21、myonectin和Insl6)的mRNA表达变化,酶联免疫分析(ELISA)检测分泌因子的蛋白表达变化.结果表明,在甘油诱导的肌肉损伤再生修复过程中存在肌间脂的生成,同时IL-6、Insl6、FGF21和IL-15的mRNA相对表达量在肌肉损伤修复过程中的前、中期变化明显,而MSTN和myonectin的mRNA相对表达量则在中、后期变化明显.IL-6、Insl6的蛋白表达量在前、中期明显升高.综上所述,甘油注射可引起肌肉损伤修复,并在这一过程中伴随着肌间脂的沉积,而肌肉分泌因子作为肌肉与脂肪之间的信息交换因子可能参与了肌肉损伤后的再生修复以及肌间脂的形成.
- 陈婷李仲文张艳艳冯芾杨公社沈清武
- 关键词:甘油肌损伤
- KLF15基因表达特征及其腺病毒超表达载体的构建被引量:3
- 2015年
- 【目的】分析锌指蛋白转录因子15(KLF15)在小鼠各组织及C2C12细胞分化过程中的表达情况,构建KLF15的腺病毒超表达载体。【方法】采集小鼠肝、脾、肾、脂肪、骨骼肌及培养的C2C12成肌细胞,提取不同分化时期(0,2,4d)的C2C12细胞及不同组织的RNA,检测KLF15的表达情况;过夜连接HindⅢ和XbaⅠ双酶切后的pAdTrack-CMV与KLF15真核表达质粒(pcDNA3.1-KLF15),获得pAdTrack-KLF15质粒。将该质粒经PmeⅠ线性化后转入BJ5183感受态细胞进行重组,构建pAdEasy-KLF15腺病毒超表达载体。将pAdEasy-KLF15质粒PacⅠ酶切线性化回收后,转染293A细胞进行包装、扩繁和纯化。将获得的KLF15重组腺病毒侵染C2C12细胞,实时荧光定量PCR检测其对KLF15表达的影响。【结果】KLF15在C2C12成肌细胞分化过程中表达显著升高,并在分化后期达最高值;KLF15在肝脏、肾脏和脂肪中的表达水平极显著高于骨骼肌和脾脏。成功获得了pAdEasy-KLF15腺病毒超表达载体,其侵染C2C12细胞后能显著上调KLF15mRNA的表达水平。【结论】KLF15基因在C2C12成肌细胞中高表达,并成功构建了KLF15重组腺病毒载体。
- 王杰陈婷沈清武
- 关键词:重组腺病毒
- VDHl和GPCR基因在大丽轮枝菌微菌核发育过程中的功能研究
- 大丽轮枝菌可以侵染38科660多种植物,引致黄萎病,是棉花、茄子、向日葵等作物的重要病害。大丽轮枝菌产生的微菌核可在土壤中存活20年以上,是大丽轮枝菌型黄萎病的主要初侵染来源。迄今为止,关于微菌核萌发相关基因功能的研究报...
- 陈婷
- 关键词:大丽轮枝菌微菌核基因敲除农杆菌转化
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒对鸡输卵管致病性的研究被引量:4
- 2013年
- 为了研究H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)对鸡输卵管的致病性,本研究首先采用凝集素亲和组化染色法检验了流感病毒受体SAα-2,3Gal在鸡输卵管上的分布;然后用H9N2AIV人工感染产蛋母鸡,制作输卵管的病理组织切片观察其病理变化;最后,采用胶原酶I灌注消化法培养鸡输卵管膨大部的原代上皮细胞,接毒H9N2AIV后观察细胞病变。试验结果表明,鸡输卵管除漏斗部没发现SAα-2,3Gal受体,其余部分均呈强阳性分布;攻毒后病理组织切片观察,输卵管膨大部上皮细胞绒毛脱落,部分细胞坏死、脱落,组织间隙变大,子宫内部组织内部充血出血,其他部分变化不明显;原代细胞接毒72h后,细胞病变不明显,但是上清中HA滴度可以达到3log2。从以上三方面可以看出,鸡输卵管上皮细胞膜上存在禽流感病毒受体,H9N2AIV可以引起侵害鸡输卵管,并引起部分输卵管病变,而且H9N2AIV可以感染鸡输卵管膨大部原代上皮细胞,H9N2AIV有可能通过输卵管感染母鸡。
- 王晶钰李成山陈婷王利勤董睿张渭东
- 关键词:病理观察
- 猪细小病毒和猪源脑心肌炎病毒的二重PCR检测方法的建立被引量:2
- 2012年
- 试验旨在建立能同时检测猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪源脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EM-CV)的二重PCR检测方法。根据GenBank中PPV VP2基因和EMCV 3D基因序列,利用Premier 5.0软件设计出PPV和EMCV的特异性引物。通过优化反应条件,建立了能同时特异性检测PPV和EMCV的二重PCR方法,PPV和EMCV的敏感性检测极限分别达7.62和1.22×10-1pg/μL。通过对临床36份样品的检测结果表明,该二重PCR检测方法敏感、特异,适合于临床检测应用。
- 朱向博刘业兵王晶钰张晓杰梁耀峰王利勤董睿陈婷李成山
- 关键词:PPVEMCV二重PCR
- 整合素干扰载体的构建及细胞转染试验
- 2012年
- 应用RNA干扰方法,设计合成了整合素的2个不同干扰位点的shRNA及空白对照载体,转化E.coli DH5α菌株,扩大培养后提取质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞。RT-PCR方法检测显示,干扰载体在mRNA水平上的干扰效果明显。该干扰载体的构建及转染,为进一步研究整合素对猪细胞增殖特性及猪瘟病毒在细胞中的增殖作用奠定了基础。
- 李维维张彦明王刚程敏陈婷
- 关键词:整合素细胞转染
- 流产型布鲁菌Omp10、Omp25蛋白的表达纯化与鉴定被引量:2
- 2012年
- 获得高纯度具有生物学活性的重组布鲁菌Omp10、Omp25融合蛋白,并进行抗原性的分析。将用PCR扩增出的布鲁菌Omp10、Omp25基因片段分别克隆到原核表达载体pET-32α中,构建pET-32α-Omp10/Omp25原核表达质粒。将其转入大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中,用IPTG诱导表达,经HisTrap HP亲和层析柱分离纯化,分别用Western-blot和间接ELISA检测产物的抗原性。基因测序及酶切鉴定证明pET-32α-Omp10/Omp25原核表达载体构建成功。SDS-PAGE表明,Omp10、Omp25融合蛋白均以包涵体的形式在大肠杆菌中高效表达。经过包涵体的变性、复性及亲和层析纯化,成功获得了大小分别为34 000和44 000的融合蛋白,与预测的相对蛋白分子质量一致。Western和间接ELISA试验证明纯化的Omp10、Omp25融合蛋白能被免疫的牛布鲁菌阳性血清所识别。结果表明,成功获得了布鲁菌Omp10、Omp25融合蛋白,且均具有一定的免疫原性,通过血清学反应证实,Omp10、Omp25蛋白为布鲁菌病临床诊断试剂盒的研制奠定了基础。
- 张三东王晶钰王利勤杨幼聪马超陈婷董睿李成山任娟娟刘万华
- 关键词:布鲁菌纯化抗原性
- 居住区景观设计探究——以运城天鹅湾居住区景观设计为例
- 随着我国城市化发展进程的持续加快,人们对于居住质量要求也更高,景观设计成为当代居住区建设的重要环节之一。如何建设环境优美的居住社区,平衡城市发展与环境的矛盾,已成为我们探索的重要问题。国外在很早以前已经开始人居环境景观的...
- 陈婷
- 关键词:居住区环境景观设计人性化
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒的增殖培养及纯化
- 【目的】制备出可用于IBRV检测及单克隆抗体制备所需的抗原。【方法】本试验通过将IBRV-oxford标准毒株接种于牛肾细胞(MDBK),30~48h细胞病变达80%时收毒的方法来培养增殖病毒。病毒细胞培养物经反复冻融3...
- 王晶钰陈婷李河林王利勤
- 关键词:牛传染性鼻气管炎病毒增殖纯化
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒gD基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立
- 牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)感染导致牛的传染性鼻气管炎(IBR),引起牛的急热性传染病,以严重的呼吸道和生殖道感染为主要症状,是我国出入...
- 陈婷
- 关键词:牛传染性鼻气管炎病毒GDELISA
- 文献传递