韩晓枫
- 作品数：42 被引量：167H指数：8
- 供职机构：无锡市第二人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金无锡市卫生系统指令性科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生核科学技术生物学经济管理更多>>
- 人β-NGF基因在CHO细胞中表达的生物学活性及分离纯化被引量：9
- 2003年
- 目的 :检测人 β NGF基因转染CHO细胞后培养上清中所表达的 β NGF的生物学活性及分离纯化。 方法 :采用脂质体介导的真核细胞转染 ,运用形态学观察和MTT法进行检测做定性定量分析 ,蛋白观察用SDS PAGE电泳。结果 :转染 β NGF基因的CHO细胞可分泌能促进PC12细胞生长的活性 β NGF ,且可透过血脑屏障。 结论 :转染 β NGF基因的CHO细胞所分泌的 β NGF ,接近自然合成的蛋白 ,具有较高生物学活性 ,为NGF的生物制药奠定了实验基础。
- 白艳艳杨吉成缪竞诚盛伟华韩晓枫李丽娥谢宇锋周忆新
- 关键词：CHO细胞生物学活性纯化
- 体外扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞过继转输对自然流产模型妊娠预后的影响被引量：4
- 2010年
- 为了观察体外扩增的CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)对不明原因复发性流产(RSA)妊娠预后的影响并探讨其作用机制。以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg并流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞纯度。妊娠第14天的CBA/J雌鼠(与雄性DBA/2J交配)为流产组;妊娠第14天的CBA/J雌鼠(与雄性BALB/c交配)为正常妊娠组;处女型CBA/J雌鼠脾CD4^+CD25^+Treg过继转输到孕4 d(着床期)CBA/J雌鼠(与雄性DBA/2J交配)体内为对照组;经体外培养扩增4 d的脾CD4^+CD25^+Treg过继转输到孕4 d(着床期)CBA/J雌鼠(与雄性BALB/c交配)体内为治疗组。分别于孕14 d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主血清细胞因子IFN-γ/IL-10/TGF-β1表达水平和脾细胞叉状头转录因子Foxp3 mRNA相对含量。结果与对照组比较,过继转输体外扩增的CD4^+CD25^+Treg的宿主孕鼠的胚胎吸收率(11.32%)显著下降;治疗组中血清IL-10/IFN-γ、TGF-β1/IFN-γ比例有显著升高,外周血细胞因子IFN-γ有显著升高,细胞因子IL-10、TGF-β1无显著差异;Foxp3 mRNA相对表达量显著升高。孕早期经体外扩增的CD4^+CD25^+Treg疗法能诱导妊娠免疫耐受,有利于向妊娠维持的Th2、Th3、Tr1细胞偏移,叉状头转录因子Foxp3在妊娠免疫耐受上起着重要作用。
- 印永祥韩晓枫施勤赵益明何杨
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞体外扩增胚胎吸收率
- 人β-NGF基因在COS-7细胞中的表达及其生物学活性的研究被引量：6
- 2001年
- 目的研究人β-神经生长因子(β-NGF)cDNA在真核细胞中的表达及其表达产物的活性。方法将质粒pGEM-β-NGF进行酶切并回收β-NGF cDNA片段，构建重组真核表达载体pcDNA3-β-NGF。利用脂质体Lipofectamine方法转染COS-7细胞，对阳性克隆COS-7细胞的mRNA和培养上清分别进行Northern blot分析和观察对PC12细胞突起生长的作用。结果β-NGF基因在COS-7细胞中获得表达。阳性克隆COS-7细胞培养上清能够促进PC12细胞突起生长。结论目的基因在COS-7细胞中成功表达β-NGF蛋白，并具有良好的生物学活性。
- 韩晓枫张澜生缪竞诚周■朱寿彭
- 关键词：神经生长因子基因克隆生物学活性基因表达
- 过继妊娠诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞治疗不明原因复发性流产被引量：2
- 2009年
- 目的观察过继转输正常妊娠诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响。方法以雌性CBA／J X雄性BALB／c为正常妊娠模型，以雌性CBA／J X雄性DBA／2J为自然流产模型，磁珠分选雌性CBA／J小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg细胞并流式细胞术（flow cytometry，FCM）分析细胞纯度。将未孕CD4^＋CD25^＋Treg细胞和正常妊娠孕14d的CD4^＋CD25^＋Treg分别转输至流产模型孕4d（着床期）的雌性CBA／J孕鼠．于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主外周血和母胎界面组织体外培养上清液中Th1Th2／Th3型细胞因子（IFN-γ／TGF-β1／IL-10）水平。结果与对照组比较，过继转输正常妊娠诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率（11．32％）显著下降；外周血TGF-β1／IFN-γ中位数（438）和IL-10／IFN-γ中位数（14）显著增加；母胎界面上TGF-β1中位数（5899．02pg／mL）和IL-10中位数（158．85pg／mL）艘著增加，IFN-γ中位数（18．46pg／mL）显著下降。结论孕早期过继转输正常妊娠诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞疗法能诱导宿丰母胎免疫耐受并调节细胞因子表达，有利于妊娠维持的Th2、Th3应答偏移。
- 印永祥韩晓枫赵益明何扬
- 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞过继转输胚胎吸收率
- 系统性红斑狼疮患者外周血T_H1类细胞因子基因的表达
- 2000年
- 目的 :研究系统性红斑狼疮 (SL E)患者外周血 TH1类细胞因子基因的表达 ,探讨其在 SL E发病过程中的作用。 方法 :采用荧光标记 RT- PCR半定量的方法 ,对 32例 SL E患者和 2 5例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)白介素 - 2 (IL- 2 )和 γ干扰素 (IFN- γ) m RNA的表达水平进行检测。 结果 :活动性 SL E患者 IL- 2和 IFN-γ m RNA的表达为 (0 .82± 0 .2 0 )和 (0 .89± 0 .31)与正常对照组水平 (1.12± 0 .11)和 (1.2 8± 0 .15 )相比 ,可见显著降低 (P<0 .0 1)。 结论 :活动性 SL E患者 PBMC中 TH1类细胞因子的基因表达量下调 ,可能在 SL E疾病发生过程中有重要作用。
- 陈维忠韩晓枫邹荣良
- 关键词：系统性红斑狼疮白介素-2Γ干扰素逆转录-聚合酶链反应
- 口服耐受的机理及应用进展被引量：1
- 2001年
- 口服可溶性蛋白质抗原可诱导机体形成抗原特异性免疫耐受。口服耐受由于使用方便和无毒副作用 ,并对自身免疫性疾病的临床治疗具有极大的应用潜能 ,因而成为目前研究的热点。但口服耐受的形成受到多种因素的影响 ,其作用机制至今也尚未完全明了。
- 韩晓枫
- 关键词：口服耐受自身免疫性疾病
- 甲状腺功能异常患者血脂代谢指标的变化被引量：8
- 2001年
- 郝爱民黄红宇陈永伟李跃松韩晓枫
- 关键词：甲状腺功能血脂代谢血糖
- 1，25二羟基维生素D3对乳腺癌MDA－453细胞株凋亡的影响
- 2001年
- 目的 研究1，25二羟基维生素D3对乳腺癌细胞MDA－453细胞凋亡的影响。方法 选用MDA－453细胞株，用RPMI1640完全培养基调节成为一定细胞密度，实验组加入1，25－（OH）2D3，对照组加入等体积的PBS液，用流式细胞仪检测细胞凋亡，用液体闪烁检测仪检测细胞增殖。结果 在加入1，25二羟基维生素D3或PBS液进行细胞培养后6、12、18及24h，实验组细胞的凋亡率分别为3．2％、6．0％、8．5％和34．9％，而空白对照组凋亡率分别为1．1％、1．6％、2．6％、3．3％，实验组细胞的凋亡率明显高于空白对照组（P＜0．01）。1，25二羟基维生素D3对MDA－453细胞生长也有明显抑制作用（P＜0．01）。结论 1，25二羟基维生素D3可诱导乳腺癌细胞凋亡，并对乳腺癌细胞增殖有明显抑制作用。
- 李建平韩晓枫
- 关键词：1,25-二羟基维生素D3乳腺癌凋亡
- 系统性红斑狼疮患者外周血Th1和Th2平衡的研究
- 2001年
- 目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中CD4^+和CD8^+T淋巴3细胞分泌细胞因子的情况以及γ干扰素（IFN-γ)和白介素－4（IL－4）的水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法 采用流式细胞术分析SLE患者和正常健康人外周血中淋巴细胞内细胞因子（IFNγ、IL－4）和表面抗原（CD4、CD8），用Dot blot法检测IFN－γ和IL－4mRNA的表达。以ELISA法测定血清中IFN－γ和IL－4的水平。结果 与对照组相比，SLE患者外周血中1类辅助T细胞（Th1)、Th1/Th2比率、IFN－γmRNA的表达和IFN－γ水平和IFN－γ／IL－4比值均明显降低（P＜0．01），而Th2细胞、Th0细胞和IL－4 mRNA表达的水平及其外周血中IL－4的水平则无明显改变（P＞0．05）。结论 在SLE患者外周血中，Th1细胞的数量及其分泌的细胞因子的水平均明显下调，提示Th1/Th2细胞的失衡在SLE发病中有着重要的作用。
- 韩晓枫周晓明等
- 关键词：系统性红斑狼疮TH1细胞TH2细胞
- 高脂饲料加球囊扩张动脉粥样硬化兔腹主动脉模型的建立被引量：11
- 2006年
- 目的建立高脂饲料加球囊扩张动脉粥样硬化兔腹主动脉模型。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为高脂饲料和普通饲料两组喂养,每组15只,2周后,用相同方法损伤兔腹主动脉血管内皮细胞,定期测量体质和血脂类指标,18周处死动物,观察腹主动脉形态结构。结果高脂饲料兔血脂类指标升高,血管内壁脂质沉积,镜下见内皮细胞脱落缺失,多层泡沫细胞堆积,平滑肌细胞减少或增生,弹力蛋白和胶原糖蛋白基质成分增多等改变。结论动脉粥样硬化兔腹主动脉模型建立成功。
- 韩晓枫张威赵益明
- 关键词：动脉粥样硬化腹主动脉高脂饲料
