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肝核转录因子FOXA3相互作用蛋白的初步研究被引量：2: 2005年; FOXA3基因是肝核转录因子(HepatocyteNuclearFactor,HNF)基因家族中含有FoxheadBox结构域的3个成员之一,在维持血糖平衡以及调控发育方面发挥着重要的作用.利用FOXA3-AD酵母双杂交载体筛选人肝cDNA-BD酵母双杂交文库,并通过共转化进行验证,获得了两个与FOXA3相互作用的蛋白:C3和TMEM4.这些相互作用蛋白的发现为深入了解FOXA3蛋白参与糖代谢调控的分子机制提供了线索.; 万兵兵叶晓霞石彦黎莉施慧莉霍克克; 关键词：酵母双杂交

Caspase-3在癫痫模型大鼠海马神经细胞凋亡中作用的研究被引量：9: 2005年; 目的对癫痫模型海马神经细胞凋亡中caspase-3的作用机制进行实验研究。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经细胞凋亡情况,以Western blot法检测其中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织构建cDNA文库,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,进行筛库实验。结果在癫痫发作后12 h TUNEL阳性神经元增加,72 h达高峰;发作后24 h出现eIF2α被caspase-3酶切的片段,逐渐增加至72 h。制作成功cDNA文库,构建了caspase-3的酵母三杂交诱饵载体,筛库获得caspase-3的新底物Miz1。结论在癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中eIF2α被caspase-3酶切。酵母三杂交寻找caspase-3下游底物有可行性,从癫痫大鼠海马中获得caspase-3的底物Miz1。; 赵瑞刘建民周晓平黎莉赵文元霍克克; 关键词：CASPASE-3 大鼠海马癫痫模型神经细胞凋亡海马神经细胞发作后

红藻氨酸致痫大鼠海马神经元中真核生物起始因子2α酶切片段的产生被引量：7: 2005年; 目的:研究半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)在红藻氨酸癫痫模型大鼠海马凋亡神经元中,对其已知底物真核生物起始因子2(eIF2α)的作用。方法:制备红藻氨酸诱导大鼠癫痫模型,记录模型发作行为及脑电图表现,以TUNEL法检测模型癫痫发作终止后12、24、48、72和96h海马神经元凋亡情况,同时以Westernblot法检测模型鼠海马eIF2α的表达变化及其与细胞凋亡之间的相关性。结果:在癫痫发作后12h出现凋亡神经元,随时间延长,海马神经元凋亡数不断增加,72h达高峰;发作后24h海马神经元出现了Caspase3酶切eIF2α产生的片段,并逐渐变浓,至72h。结论:癫痫模型大鼠海马中Caspase3酶切eIF2α与神经元凋亡的发生时间一致,提示在癫痫模型大鼠海马神经元凋亡中eIF2α被Caspase3酶切。; 赵瑞刘建民赵文元黎莉霍克克许奕黄清海; 关键词：癫痫海马凋亡

caspase-3在颞叶癫痫大鼠海马神经凋亡中作用的实验研究被引量：2: 2006年; 目的构建癫痫模型大鼠海马凋亡神经元的cDNA文库,采用酵母三杂交技术从中寻找caspase-3潜在的酶切底物。方法制作海人藻酸大鼠癫痫模型,取其海马组织制作酵母三杂交cDNA文库,克隆获得caspase-3的P12、P17两亚基,然后分别定向插入同一pBridge质粒,构建caspase-3的酵母三杂交诱饵载体并进行验证,然后对所构建文库进行筛库。结果成功构建癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了caspase-3酵母三杂交诱饵载体,并通过caspase-3与eIF2α之间的相互作用验证,经筛库获得caspase-3的底物MIZ1。结论酵母三杂交技术可用于寻找caspase-3下游底物,从癫痫模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase-3的底物MIZ1,为进一步研究caspase-3在癫痫发作引起的海马神经元损伤中的作用奠定了基础。; 赵瑞刘建民赵文元黎莉霍克克王文仲; 关键词：癫痫凋亡底物 CASPASE-3

海人藻酸致痫大鼠海马神经元凋亡中caspase-3作用的实验研究被引量：4: 2005年; 目的阐明癫痫模型大鼠海马神经元凋亡中caspase-3的作用机制。方法以TUNEL法检测KA致痫大鼠海马神经元凋亡情况,以WesternBlot方法检测其海马神经元中eIF2α的表达变化。取模型鼠海马组织制备cDNA文库,以caspase-3的大小亚单位构建酵母三杂交诱饵载体,并进行酵母三杂交筛库实验。结果在癫痫发作后12h海马出现凋亡神经元,72h达高峰;发作后24h海马神经元出现eIF2α被caspase-3酶切的片段,逐渐增加至72h。成功制备癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了caspase3酵母三杂交诱饵载体,验证了caspase3与eIF2α之间的相互作用,并经筛库获得caspase3的新底物PIAS1。结论在癫痫模型大鼠海马凋亡神经元中eIF2α被caspase3酶切。酵母三杂交技术可用于筛库寻找caspase3下游底物,从癫痫大鼠海马中获得caspase3的新底物PIAS1,为进一步研究在癫痫发作致神经元损伤中caspase3的作用建立了基础。; 赵瑞刘建民赵文元黎莉霍克克周晓平; 关键词：海马 CASPASE-3 EIF2Α

癫癎模型大鼠海马神经元凋亡细胞中caspase3新底物的寻找被引量：2: 2004年; 目的:在癫癎模型大鼠海马神经元凋亡细胞中寻找caspase 3新底物。方法:建立癫癎模型大鼠海马组织cDNA文库,构建含caspase 3的P12和P17两亚基的三杂交诱饵载体,检测其效果,并进行酵母三杂交筛库。结果:成功建立了癫癎模型大鼠海马组织cDNA文库,构建了大鼠caspase 3基因的酵母三杂交诱饵载体,并通过caspase 3与eIF2α之间的相互作用验证;以此三杂交诱饵载体筛库获得caspase 3的新底物PIAS1及MIZ1。结论:从癫癎模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase 3的新底物,为进一步研究caspase 3在癫癎发作引起海马神经损伤中的作用创造了条件。; 赵瑞黎莉刘建民霍克克赵文元; 关键词：海马底物 CASPASE

从癫痫模型大鼠海马神经元中克隆caspase 3的新底物PIAS1被引量：1: 2004年; 目的　从癫痫模型大鼠海马凋亡神经元中克隆caspase - 3的新底物。方法　制作癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库 ;PCR获得caspase- 3的P12和P17两亚基 ,然后分别定向插入pBridge质粒 ,构建三杂交诱饵载体 ;进行酵母三杂交筛库。结果　建立成功癫痫模型大鼠海马组织cDNA文库 ,构建了大鼠caspase- 3基因的酵母三杂交诱饵载体 ,并通过了caspase - 3与eIF2α之间的相互作用验证 ,筛库获得caspase- 3的新底物PIAS1。结论　用酵母三杂交系统寻找caspase- 3下游底物具有可行性 ,从癫痫模型大鼠海马的cDNA文库中筛库获得caspase - 3的新底物PIAS1,为进一步研究caspase; 赵瑞黎莉刘建民赵文元霍克克; 关键词：癫痫模型大鼠海马神经元底物 CDNA文库克隆

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黎莉