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一种乙肝表面抗原结合蛋白可作为疫苗佐剂被引量：4: 2009年; 乙肝表面抗原结合蛋白(HBsAg binding protein,SBP)是本实验室发现的一种可以与乙肝表面抗原HBsAg特异性结合的人源蛋白,该蛋白已经被证实具有增强乙肝疫苗免疫效果的作用.目前,我们已经利用毕赤酵母表达系统获得了能够分泌表达SBP的毕赤酵母表达菌株.本研究通过对上述菌株的发酵产物进行超滤和亲和层析纯化,获得了一定量的高纯度重组SBP蛋白,并利用酶联免疫吸附检测(ELISA)法和表面等离子体共振(SPF)法分别对重组SBP进行了体内外生物学活性的初步检测,证实其具有与HBsAg结合的能力,并求得了二者之间的亲和常数.将重组SBP作为乙肝疫苗增效剂与乙肝疫苗共同免疫小鼠,SBP增效组小鼠与对照组相比,血清中HBsAg抗体显著升高,表明SBP在体液免疫方面对乙肝疫苗具有显著的增效作用.上述结果表明,SBP有望作为乙肝疫苗的免疫佐剂,在乙型肝炎防治方面有重要意义.; 庞云龚立朱乃硕; 关键词：毕赤酵母

乙肝表面抗原结合蛋白SBP在毕赤酵母中的表达纯化及功能鉴定被引量：2: 2009年; 乙肝表面抗原结合蛋白(HBsAg binding protein,SBP)是本实验室发现的一种人源蛋白,该蛋白与人乙型肝炎病毒HBV表面抗原HBsAg存在特异性的结合能力。此前的研究证实SBP具有增强乙肝疫苗免疫效果的作用。为进一步研究该蛋白的生理功能和作用机制,利用毕赤酵母表达系统进行了SBP的表达菌株构建,筛选得到了SBP的高效表达菌株。发酵产物经过分离纯化,最终得到了大量高纯度的真核来源的目的蛋白。通过SDS-PAGE、高效液相色谱、Western blotting和质谱鉴定,证实所得到的蛋白具有较高的纯度和完整性。通过ELISA方法初步证实了其与乙肝表面抗原具有较好的结合能力。该研究为进一步进行SBP的体内外功能研究及免疫增效研究打下了基础。; 庞云龚立彭思扬朱乃硕; 关键词：毕赤酵母

一种基因工程免疫刺激因子及其免疫增效的应用: 本发明属于DNA重组和药物技术领域，具体为一种基因工程免疫刺激因子及其免疫增效的应用。本发明根据生物信息学及生物大分子结构与功能关系和免疫学原理，设计并合成该免疫刺激因子(ICEM)DNA序列，通过基因工程方法将该基因克...; 朱乃硕龚立杨超

一种基因工程免疫刺激因子及其免疫增效的应用: 本发明属于DNA重组和药物技术领域，具体为一种基因工程免疫刺激因子及其免疫增效的应用。本发明根据生物信息学及生物大分子结构与功能关系和免疫学原理，设计并合成该免疫刺激因子(ICEM)DNA序列，通过基因工程方法将该基因克...; 朱乃硕龚立杨超; 文献传递

小鼠PD-1基因启动子克隆鉴定及转录调控分析: 2010年; PD-1分子是一种重要的免疫调控因子,目前对其自身表达调控尚未有系统的研究.对PD-1启动子区域进行分析,克隆构建了含PD-1基因上游约2kb范围内含4种不同长度调控序列的双荧光素酶表达载体.通过FACS检测发现,小鼠T淋巴瘤EL4细胞稳定表达PD-1,而骨髓瘤Sp2/0-Ag细胞则在佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和离子霉素(ionomycin,IO)诱导后才表达PD-1.4种双荧光素酶报告系统在上述两种细胞中检测PD-1启动子各区段活性显示,-227～+49bp区域含有PD-1核心启动子,上游-1127～-716bp含有较强正性调节元件,而在-1685～-1128bp、-715～-228bp两个区域含有负性调节元件,这种正负调控区交错的启动子活性现象说明了PD-1基因表达调控的复杂性,这些结果为PD-1基因的表达调控提供了结构基础和依据.; 郑花鸯汤必奎王培伟高方健胡晓波龚立朱乃硕; 关键词：PD-1

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龚立