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丁淑燕: 作品数：13 被引量：81H指数：5; 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金中国农业科学院院长基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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噬菌体抗体库的构建及抗猪脂肪细胞膜单抗的筛选被引量：5: 2005年; 用猪脂肪细胞以免疫删减法免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆入噬菌粒表达载体pCANTAB5E中,构建单链抗体(ScFv)文库。用猪脂肪细胞,对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗猪脂肪细胞膜单抗。经ELISA检测,51/96克隆具有与猪脂肪细胞结合活性,阳性率为53%,与猪肝细胞则成阴性反应,初步证明了单抗的特异性,为猪脂肪细胞膜单抗的制备提供了一种新的方法。; 苗向阳丁淑燕朱玉良郝慧芳邵建军; 关键词：脂肪细胞膜噬菌体抗体库单抗结合活性脾细胞

抗绿脓杆菌外毒素A酶标抗体的制备及其应用被引量：3: 2005年; 从病死羊体内分离到绿脓杆菌并提取出外毒素A(PEA) ,再以此毒素作为抗原加油佐剂制成乳化抗原免疫家兔 ,获得高免血清并提取免疫球蛋白G(IgG) ;用过碘酸钠法将过氧化物酶标记抗PEA抗体 (IgG) ,制成酶标抗体 ,经检验 ,酶标抗体结合物中的HRP浓度和Ab(IgG)浓度分别是 0 0 6 0 8mg/mL和 0 336mg/mL ;HRP/Ab(IgG)克分子比值为1 72 4 % ;酶 (HRP)结合率是 11 15 %。利用该酶标抗体以ELISA夹心法对羊体内抗PEA抗体含量进行了检测 ,结果证明 ,用酶标抗体ELISA法比用平板凝集实验法检测的抗体效价平均高出二个滴度 ,表明制备的PEA酶标抗体具有灵敏度高。; 高玲美牛钟相李雅林丁淑燕; 关键词：绿脓杆菌外毒素A 酶标抗体

噬菌体表面展示技术被引量：21: 2003年; 噬菌体展示技术 (PhageDisplayTechniques ,PDT)是一种用于筛选和改造功能性多肽的生物技术。自问世以来 ,它已被广泛应用于生命科学的许多领域。对噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体表面展示系统研究以及噬菌体展示技术的应用、展望等进行了探讨 ,由此可以看出 :噬菌体展示技术的进一步发展 ,必将为生命科学及相关学科的发展带来深远的影响。; 丁淑燕苗向阳朱瑞良高玲美邵建军; 关键词：噬菌体基因工程抗原决定簇

精子介导法制备转基因鸡的研究被引量：3: 2007年; 以LacZ基因为报告基因,构建载体质粒p-OV-β-Gal,转移到鸡早期胚胎内,对外源基因的整合及表达情况进行检测分析,为制备转基因鸡探索新的方法。采用脂质体介导法、精子介导法以及电激法相结合的方法将载体质粒p-OV-β-Gal转移到鸡早期胚胎内,进行转基因鸡研究,结果发现其外源基因整合阳性率为13.2%(7/53),表达阳性率为20.7%(11/53)。说明该方法可作为制备转基因鸡的有效方法。; 苗向阳丁淑燕郝慧芳杨文胜; 关键词：转基因精子介导法

抗猪脂肪细胞膜单链抗体抗体库的构建及表达: 为研究、大量制备高亲和力抗猪脂肪细胞膜抗体,该实验从分子生物学和基因工程抗体技术的角度出发,首先构建出抗猪脂肪细胞膜单链抗体,然后将单链抗体与噬菌体载体pCANTAB5E连接,连接产物转入感受态大肠杆菌TG1,构建出抗猪...; 丁淑燕; 关键词：脂肪细胞膜单链抗体噬菌体展示技术噬菌体抗体库技术; 文献传递

单精注射法生产转基因小鼠的研究被引量：3: 2007年; 精子胞质内显微受精技术(ICSI)作为辅助受精的一种手段,将体外受精研究和胚胎的显微操作技术结合起来,比以往对精子质量的要求大大降低,使其无论在畜牧业生产实践还是在哺乳动物的生殖生理基础研究中都有着十分重要的意义。本研究用小鼠精子及小鼠精子与GFP基因孵育后对小鼠卵母细胞进行ICSI,获得子代鼠。提取鼠尾基因组DNA,应用PCR、Southern blot进行整合检测。在发育至成年的11只小鼠中经PCR和Southernblot检测到3只阳性(27.3%)。结果表明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠。; 苗向阳邵建军方昌阁丁淑燕任慧英朱瑞良; 关键词：转基因胚胎

天然鼠源噬菌体单链抗体库的构建被引量：4: 2005年; A murine phage antibody library was constructed.First,the total RNA was extracted from fresh spleens of nonimmunized mice,then the cDNA library was achieved via reverse transcription PCR.Gene fragments encoding V_H and V_L were amplified and assembled into a single gene using a DNA linker encoding a polypeptide of 15 amino acid residues(Gly4Ser)3 through PCR.And finally the recombinant DNA fragments were cloned into the phagemid pCANTAB5E vector and introduced into E.coli TG1.The phagemid particles displaying functional ScFv were rescued by reinfection of helper phage M13K07,thus a murine antibody library was obtained.; 邵建军苗向阳朱瑞良丁淑燕陈永福; 关键词：单链抗体丝状噬菌体噬菌体抗体库噬菌体展示技术 DNA片段体外表达

猪圆环病毒的研究进展被引量：8: 2004年; 圆环病毒能引起猪的传染性、先天性颤抖和断奶仔猪多系统衰弱综合症 ,现已成为严重影响养猪业发展的病毒之一。作者从猪的圆环病毒所引起疾病的流行现状、致病机理、病理变化、临床诊断、预防等方面进行了论述。; 丁淑燕朱瑞良高玲美; 关键词：圆环病毒疾病致病机理病理变化 PCV

抗猪脂肪细胞膜抗体库的构建: 2005年; 通过免疫方法降低猪脂肪含量、提高胴体品质成为人们研究的一个新课题,噬菌体展示技术的完善与发展为实现这一研究目的提供了条件,成为制备高亲和性抗体的有力工具。用猪脂肪细胞免疫小鼠,提取mRNA,反转录成cDNA。通过PCR扩增出重链可变区基因VH和轻链可变区基因VL,再用编码(Gly4Ser)3的Linker将VH、VL连接在一起,克隆入pCANTAB5E中,转化大肠杆菌,经辅助噬菌体M13K07超感染,构建噬菌体抗体库并进行筛选。; 丁淑燕苗向阳朱瑞良邵建军; 关键词：畜牧兽医科学基础学科猪脂肪细胞膜抗体库噬菌体展示技术