丛蓓蓓
- 作品数：20 被引量：30H指数：4
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技发展计划项目山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD59基因突变与肿瘤免疫逃逸信号转导的相关性研究
- 立项背景:目前恶性肿瘤已成为人类致死的首位病因,其发病机理尚未阐明,临床缺乏有效地诊疗手段。近年来新型免疫分子及诊疗技术不断问世,为解释肿瘤发病机理、诊断与治疗展示了广阔的前景。据国外报道在肿瘤细胞如肠癌、胃癌等发现CD...
- 高美华王冰王丽娜丛蓓蓓任书荣
- 关键词：CD59肿瘤逃逸
- 文献传递
- Tourette综合征儿童口腔黏膜严重创伤性溃疡的临床诊治1例
- 2023年
- 口腔黏膜创伤性溃疡是儿童及青少年口腔黏膜的常见病,神经系统疾病是该病的少见病因。本文报道1例12岁Tourette综合征患儿严重且广泛的顽固性口腔黏膜创伤性溃疡的诊治过程,应用全牙列垫治疗本病例口腔黏膜严重的创伤性溃疡,取得了较好的效果,为临床医师诊治Tourette综合征引发的口腔黏膜创伤性溃疡提供了一种可行的治疗方式。
- 李亚南荆进丛蓓蓓于习习张文怡
- 关键词：TOURETTE综合征创伤性溃疡少见病因口腔黏膜神经系统疾病全牙列
- 过表达C-Src激酶结合蛋白诱导Jurkat淋巴细胞表型改变和凋亡被引量：1
- 2015年
- 目的研究上调C-Src激酶结合蛋白(CBP)表达对Jurkat细胞超微结构及相关生物学功能的影响。方法构建CBP-EGFP融合蛋白过表达病毒载体,转染建立稳定的高表达CBP-EGFP融合蛋白的Jurkat细胞株。光学显微镜下观察细胞的基础生长状态,共聚焦显微镜观察病毒转染效率及CBP蛋白在细胞上的定位,电镜观察细胞内细胞器的复杂程度。流式细胞术检测细胞的基本参数及凋亡情况,实时定量PCR(qRT-PCR)检测CBP基因及信号转导通路中C-Src激酶(CSK)、原癌基因蛋白Vav(Vav oncoprotein)mRNA水平。结果光镜下发现转染CBP-EGFP病毒的Jurkat细胞皱缩细胞增多,大小均一性较差。共聚焦显微镜显示细胞转染效率达到100%,同时发现CBP定位于细胞膜上。电镜可见CBP组细胞内细胞器较Jurkat细胞复杂,有线粒体,并出现大量的溶酶体样结构。与阴性组相比,转染了CBP-EGFP病毒后,死亡细胞的数量大大增加,而qRT-PCR结果显示CBP组CSK表达上调,Vav则表达下调。结论在Jurkat细胞中,CBP蛋白高表达可以使细胞的均一性下降,凋亡细胞增多。
- 高美华丛蓓蓓王冰王丽娜邵志伟
- 关键词：细胞器
- T细胞活化接头蛋白棕榈酰化位点突变抑制CD59 GPI介导的T淋巴细胞活化信号转导
- 2015年
- 目的构建T细胞活化接头蛋白(LAT)棕榈酰化位点突变的慢病毒,感染Jurkat细胞,建立稳定转染的细胞株,观察LAT棕榈酰化位点突变对CD59介导的T淋巴细胞活化信号转导的影响。方法构建阴性对照(neg-EGFP)、LAT-M-EGFP融合蛋白基因载体,包装成慢病毒,分别感染Jurkat细胞,建立稳定感染的细胞株。激光共聚焦显微镜观察病毒感染效率及融合蛋白在细胞上的定位;CCK-8法检测CD59单克隆抗体交联前后各组细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测磷脂酶Cγ1(PLC-γ1)、淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(LCK)蛋白的表达。结果共聚焦显微镜观察发现LAT-M组细胞的LAT分子在细胞膜上散在分布,CD59抗体交联刺激后,未出现明显的点簇状聚集区。与阴性对照细胞相比,LAT-M细胞增殖活性明显降低,中晚期凋亡细胞明显增加;Western blot结果显示,LAT-M组的PLC-γ1、LCK蛋白表达水平和阴性对照组大致相同,经抗体活化后无明显变化,而阴性对照细胞的PLC-γ1、LCK蛋白表达量下降。结论 LAT棕榈酰化位点突变的Jurkat细胞脂筏定位功能缺失,细胞处于抑制状态,对CD59糖基磷脂酰肌醇(GPI)介导的T淋巴细胞活化信号转导有抑制作用。
- 高美华王丽娜王冰丛蓓蓓张树超
- 关键词：CD59信号转导
- 下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响。方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果最好的一组细胞,用其做后续的分子生物学水平的实验;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达量的变化;ELISA检测各组的细胞培养上清中IL-3、TNF-β的表达。结果:激光共聚焦观察到转染各组的转染效率在90%以上,CD59分子主要位于细胞膜;Real-time-PCR筛选得出下调A组的转染效果最好;Western blot结果显示下调A组的CD59蛋白的表达量减少最明显,将RNAi-CD59-A定义为RNAi-CD59作为实验组进行后续实验;实验组能增强Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),抑制Bcl-2、Survivin蛋白的表达(P<0.05);ELISA结果显示下调组IL-3表达水平降低(P<0.05),TNF-β的表达水平升高(P<0.05)。结论:下调D59基因表达可使急性T系白血病细胞株Jurkat的促凋亡分子表达增高,促增殖分子表达降低。
- 高美华李华侨李冰王忠丛蓓蓓王冰
- 关键词：CD59凋亡JURKAT转染
- 调控Tim-3通路在免疫性肝损伤大鼠中对Th17细胞的影响被引量：1
- 2015年
- 目的建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3通路在阻断或激活时对Th17细胞的影响。方法大鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)8周,建立免疫性肝损伤模型。无菌取脾脏制备脾淋巴细胞,取外周血分离血清后于-20℃保存,取肝脏组织放入4%的多聚甲醛中固定备用。在96孔板上将脾淋巴细胞平均分成5组,即阻断实验组、阻断对照组、激活实验组、激活对照组和Con A对照组。用Tim-3的单克隆抗体即Anti-Tim-3来阻断Tim-3通路;用Tim-3的重组配体galectin-9来激活Tim-3通路,37℃、5%CO2培养箱中培养72 h,收集细胞上清液于-20℃保存。生化分析法测血清中ALT、AST和ALB的表达;HE染色观察肝脏组织的病理变化;免疫组化法测肝脏组织中IL-17A和ROR-γt蛋白的表达;ELISA法测细胞上清液中IL-17A及IL-6的表达;实时定量PCR测各组脾淋巴细胞ROR-γt mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组HE染色可见明显的炎性细胞浸润、肝脏组织损伤及较多的假小叶,免疫组化可见IL-17A和ROR-γt蛋白的表达明显升高;与阻断对照组相比,阻断实验组中IL-17A和IL-6的水平升高(P<0.05);与激活对照组相比,激活实验组中IL-17A和IL-6的水平降低(P<0.05);实时定量PCR显示与阻断对照组相比,阻断实验组中ROR-γt mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论免疫性肝损伤的发病与Th17细胞密切相关,免疫调控Tim-3通路可通过影响Th17细胞效应,进而参与免疫性肝损伤的发病机制。
- 张文张蓓李秀梅沈若武丛蓓蓓杨丽华孙东君王建伟
- 关键词：免疫性肝损伤TH17细胞
- 高表达衔接蛋白Src羧基端激酶结合蛋白对Jurkat细胞形态及功能的影响(英文)
- 2015年
- 背景:衔接蛋白分子的联动和协同有效调控T细胞的信号转导,形成级联放大或限制,最终实现T细胞复杂的免疫功能。蛋白分子Src羧基端激酶结合蛋白正是衔接蛋白的一种,其主要是通过负反馈调节Src家族激酶活性。而这种负反馈调节作用依赖于Src羧基端激酶结合蛋白的Y317,可能涉及Src羧基端激酶的SH2结构域。目的:探索衔接蛋白Cbp对Jurkat细胞形态及功能的作用。方法:构建仅表达增强绿色荧光蛋白的融合蛋白和Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的融合蛋白的病毒颗粒。将Jurkat细胞分为未转染组、阴性对照组和Src羧基端激酶结合蛋白组,后2组转染仅表达增强绿色荧光蛋白的病毒和转染Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的病毒。结果与结论:细胞转染效率大于95%,Src羧基端激酶结合蛋白定位于细胞膜上。转染Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白病毒的Jurkat细胞,皱缩细胞增多,大小均一性较差,细胞坏死凋亡的数量增加,细胞中Src羧基端激酶结合蛋白基因表达上调,Src羧基端激酶表达下降,而酪氨酸蛋白激酶表达增加。提示Jurkat细胞转染Src羧基端激酶结合蛋白后,可使细胞存活率下降,细胞信号转导功能减弱。
- 丛蓓蓓高美华王冰邵志伟王丽娜张文
- 关键词：SRCSRC酪氨酸蛋白激酶
- 不同正畸力对大鼠牙周组织压力侧辅助性T细胞17相关因子表达变化的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探究不同正畸力下大鼠压力侧牙周组织中辅助性T细胞17(Th17)的特征性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和细胞因子白细胞介素-17(IL-17)表达的变化规律,及其对骨保护素(OPG)表达及破骨细胞(OC)数量的影响,初步探讨在不同力作用下Th17细胞对牙槽骨改建的影响。方法选取108只大鼠随机均分为3组,分别施加0、50、100 g力近中移动上颌第一磨牙,于0、1、3、5、7、14 d后处死。实时定量聚合酶链式反应法(Q-PCR)检测RORγt mRNA表达量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-17蛋白表达量;免疫组织化学染色法(IHC)检测RORγt、OPG蛋白表达量,并计数OC。结果50 g、100 g组的RORγt、IL-17和OC均呈先增高后降低趋势,峰值分别位于5、7 d,50 g组于14 d可基本恢复,而100 g组仍维持较高水平,其含量均为100 g组>50 g组>0 g组。OPG在50 g组呈降低-升高-降低趋势,14 d基本恢复,在100 g组呈先降低后升高趋势,50 g组在7 d、100 g组在14 d显著高于0 g组。结论不同正畸力下,RORγt、IL-17和OPG随时间呈规律性表达,说明Th17细胞通过分泌IL-17参与了压力侧牙周组织中的骨吸收过程。
- 王璐瑶汪波丛蓓蓓崔涛杜雨晴宋宇
- 关键词：正畸牙移动辅助性T细胞17白细胞介素-17骨保护素
- 活化/抑制CD59对T淋巴细胞增殖的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:研究活化/抑制CD59分子对T细胞增殖的影响。方法:Jurkat细胞分别电转入pSUPER-siCD59质粒及用CD59活化抗体刺激。激光共聚焦显微镜下观察细胞的电转情况及CD59分子在细胞膜上的分布及表达;MTT比色法检测细胞的增殖。Western blot检测CD59分子表达及T细胞活化相关蛋白ZAP70磷酸化水平。结果:激光共聚焦显微镜下可见电转染细胞表达绿色荧光,转染效率约为40%。转染pSUPER-siCD59质粒后CD59荧光强度强度降低,CD59分子均匀分布于细胞膜与正常Jurkat细胞分布一致。抗体活化后CD59在细胞膜成簇状分布。抗体活后细胞增殖速率和磷酸化ZAP70的蛋白表达水平均高于正常组(P<0.05),而细胞电转质粒后则恰恰相反。结论:CD59通过与信号转导分子的相互作用促进T细胞活化增殖。
- 李园园高美华丛蓓蓓王丽娜王冰张蓓李营梁洁
- 关键词：电转染JURKAT磷酸化蛋白
- 甲壳质抗特应性皮炎的实验研究被引量：5
- 2015年
- 目的：探讨甲壳质对卵清蛋白（OVA）诱导的小鼠特应性皮炎（AD）的作用。方法：28只BALB/c小鼠随机分成3组：对照组（N组）（8只）、模型组（M组）（10只）、甲壳质组（E组）（10只）。通过小鼠腹腔注射及背部皮肤外敷OVA建立AD动物模型（模型组）,甲壳质组在建模过程中同时给予3 mg/d甲壳质灌胃4周。建模成功后处死小鼠,取背部皮肤,进行石蜡切片HE和甲苯胺蓝染色,显微镜下观察表皮和真皮厚度的变化以及细胞浸润情况;ELISA法检测血清中总Ig E、总Ig G2a和OVA-specific Ig E的水平;取脾细胞进行体外培养,ELISA法测定培养液中细胞因子的含量。结果：与模型组小鼠比较,甲壳质组小鼠皮肤激发处炎症症状较轻,皮肤表皮层与真皮层增厚程度降低,真皮内炎症细胞浸润总量（P〈0.05）、嗜酸性粒细胞数量及肥大细胞数量（P〈0.01）明显减少。甲壳质组小鼠血清中总Ig E和OVA-specific Ig E的水平都明显降低（P〈0.05~0.001）,Ig G2a水平显著升高（P〈0.001）。甲壳质组小鼠脾细胞体外培养产生的IL-12及IFN-γ水平明显高于模型组,而IL-4水平明显低于模型组（P〈0.05）。结论：甲壳质能有效减轻OVA诱导的小鼠AD症状,降低小鼠血清中Ig E水平,甲壳质的抗过敏作用可能与其诱导AD小鼠脾细胞产生Th1型细胞因子（IL-12、IFN-γ）有关。
- 李秀梅王国英张文高美华张蓓沈若武丛蓓蓓
- 关键词：特应性皮炎甲壳质卵清蛋白IGEIGG2A
