何霞
- 作品数：21 被引量：48H指数：4
- 供职机构：中山大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 端粒酶锤头状核酶抑制肺癌细胞端粒酶活性及细胞增殖的实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨端粒酶特异性核酶对A549肺癌细胞端粒酶活性、增殖和凋亡的影响。方法:构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒,稳定转染人A549肺癌细胞株。RT-PCR法检测核酶的表达以及hTERT mRNA、hTR的含量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪等测定细胞增殖及凋亡。结果:稳定转染核酶重组体的细胞克隆,均可以检测到核酶的表达,端粒酶活性被抑制,clonehTERT1～6和clonehTR(1、3、5)的平均端粒酶活性分别是空白对照组的(27±18)%和(36±13)%,P值分别为0.000和0.013;clonehTERT1～6hTERT mRNA及clonehTR1～6hTR含量下降,分别是空白对照组的(30±19)%和(49±17)%,P值分别为0.000和0.001;clonehTERT1、clonehTR3生长较空白对照组及阴性对照组减缓,凋亡率增加;而clonehTERT1又较clonehTR3生长慢,凋亡率高(凋亡率分别为21.5%和16.1%)。结论:端粒酶特异性核酶能明显抑制端粒酶活性和细胞增殖,促进细胞凋亡;端粒酶hTERT mR-NA可能是比端粒酶RNA更为理想的端粒酶抑制剂的靶点。
- 何霞周俊宜朱振宇黄小荣谢金卫王于柏芸米洋陶莎
- 关键词：端粒末端转移酶端粒
- Bif-1对前列腺癌LNCap细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究Bif-1基因的过表达对前列腺癌细胞凋亡、增殖以及迁移过程的影响。方法构建Bif-1基因全克隆并转染LNCap细胞,上调细胞中Bif-1基因的表达水平,通过流式细胞术检测细胞转染前后的细胞凋亡情况;通过MTT法检测细胞的增殖能力变化;通过划痕试验检测细胞迁移能力的变化。结果转染Bif-1基因后,Real-time PCR检测发现LNCap细胞中Bif-1基因mRNA水平△△CT高于对照组10倍以上;Western blotting条带光密度值提高2倍以上。实验组细胞凋亡比例升高至31.90%,细胞增殖能力减弱。实验组和对照组中LNCap细胞划痕愈合速度基本相同,差异无统计意义(P>0.05)。结论 Bif-1基因在LNCap细胞中的过表达促进了细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力,而对前列腺癌细胞的迁移能力无显著影响。基因有可能作为一个潜在的前列腺癌治疗靶点。
- 王铸何霞冯发深关琳琳汪杨罗燕芬黄斌徐霖曹开源
- 关键词：前列腺癌细胞凋亡
- 人博卡病毒及其在中国的流行现状被引量：12
- 2013年
- 人博卡病毒(Human bocavirus,HBoV)属于细小病毒科,博卡病毒属。HBoV是除细小病毒B19和人细小病毒4(Human parvovirus,PARV4)外,目前所发现的与人类疾病有关的细小病毒之一。至今已有4种不同的HBoV相继报道,分别为HBoV1、HBoV2、HBoV3和HBoV4。HBoVs感染的发生率差异较大,且患者的临床表现各不相同,常与其它病原体共检出。本文就有关HBoVs的报道,从HBoVs的生物学性状、流行特征、致病机制、系统进化分析及其在我国的流行现状进行了阐述和讨论。
- 何霞曹开源
- 关键词：人博卡病毒流行病学致病机制
- Endophilin B1基因及蛋白的生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 目的:利用生物信息学方法分析人Endophilin B1基因以及蛋白的结构,为进一步研究其功能和参与的调控机制提供一定的理论依据。方法:通过GenBank搜索Endophilin B1基因及蛋白序列,采用生物信息学方法分析该基因在不同物种中的差异,分析该蛋白的亚细胞定位,二级结构,功能域以及抗原表位。结果:该基因编码一个长度为365个氨基酸的蛋白,具有两个BAR和SH3两个功能域。Endophilin B1蛋白理论分子量为40796.3,理论等电点为5.78。二级结构中α螺旋(H)占56.44%,β折叠(E)占5.48%,无规卷曲占38.08%。Endophilin B1蛋白含有4个可能的N连接糖基化位点,5个潜在的酪蛋白激酶II磷酸化位点,7个豆蔻酰基化位点,3个PKC磷酸化位点以及2个酪氨酸激酶磷酸化位点。并进一步利用DNAstar软件分析了了该蛋白的抗原表位。结论:利用生物信息学预测出的结构和功能信息,能为Endophin B1蛋白的相关研究提供一定的信息基础。
- 王铸何霞冯发深关琳琳徐霖张定梅汪杨罗燕芬曹开源
- 关键词：B1BARDOMAINDOMAIN
- 端粒酶特异性核酶抑制A549肺癌细胞端粒酶活性的实验研究
- 端粒酶是含有RNA和蛋白质组分的核糖核蛋白。端粒酶RNA为端粒酶合成端粒重复序列提供了模板，端粒酶逆转录酶是端粒酶的催化亚基。端粒酶能以自身RNA为模板合成端粒重复序列添加到染色体末端维持端粒长度从而维持染色体的稳定性。...
- 何霞
- 关键词：肺癌端粒酶催化亚单位端粒酶RNA锤头状核酶
- 文献传递
- 小鼠FasL基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
- 2012年
- 目的构建含有小鼠Fas Ligand(FasL)基因的重组真核表达载体,并检测FasL蛋白在其稳定转染的HEK293细胞中的表达情况,为构建表达小鼠Fas L的树突状细胞(DC)模型,深入研究DC联合T细胞防治移植物抗宿主病(GVHD)的新方法奠定基础。方法从小鼠脾脏中提取RNA并逆转录为cDNA,以该cDNA为模板扩增FasL基因,插入pcDNA3.1(+)载体中构建pcDNA3.1(+)-FasL重组质粒,利用脂质体将其转染HEK293细胞,用G418筛选稳定表达细胞系,Western blot确定重组蛋白的表达。结果通过酶切及测序证实FasL序列正确插入表达载体pcDNA3.1(+),Western blot检测证实转染重组质粒的细胞能正确表达FasL蛋白,G418筛选后能够得到稳定表达FasL的抗性细胞株即FasL-HEK293。结论重组质粒pcDNA3.1(+)-FasL和稳定表达FasL的HEK 293细胞成功构建,为后续FasL-DC细胞的研究打下了坚实基础。
- 何霞汪杨何善阳王铸冯发深关琳琳罗燕芬潘金成曹开源徐霖
- 关键词：FASLIGAND基因转染HEK293细胞
- 人冠状病毒OC43、229E、NL63、HKU1和SARS一管多重荧光PCR检测方法及其引物、探针和试剂盒
- 本发明提供了一种人冠状病毒五种型别的一管多重荧光PCR检测方法，该方法采用了序列如SEQ ID NO：1-10所示的引物，还采用了序列如SEQ ID NO：11-15所示的探针。本发明还提供了包含上述引物和探针的人冠状病...
- 曹开源黎孟枫徐霖吴珏珩张定梅许沙沙常彦敏郑芸何霞冯发深王铸关琳琳
- 2010年广州市甲型H1N1流感病毒分离株HA基因变异分析被引量：4
- 2011年
- 目的比较2010年广州市分离到的甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因和2009年中国大陆甲型H1N1流感病毒HA基因的变异情况,为甲型H1N1流感的监测和防控提供理论依据。方法收集2010年广州市有发热和呼吸道症状病人的咽拭子标本,用H1N1流感特异性引物进行PCR检测,扩增分离到的H1N1病毒HA片段,测序后与2009年的H1N1毒株进行比对和分析,并用生物信息学方法对抗原位点和糖基化位点进行分析。结果共收集到426份标本,甲型流感阳性211份,其中H1N1流感4株,与2009年分离的甲型H1N1流感相比,有12个氨基酸碱基位点发生了有意义突变,其中6个位点位于抗原位点上;4株毒株HA基因145位氨基酸都发生了变异;其中2株毒株在第180位氨基酸位点的抗原位点发生了变异。进化分析表明4株毒株与2009年中国大陆分离的8株毒株进化关系较远。结论 2010年广州市甲型H1N1毒株与2009年相比发生了较大变异。HA基因145位和180位氨基酸位点变异对H1N1毒株抗原变异有重要意义。本文分离的A/Guangdong/ZS03/2010(H1N1)和A/Guangdong/ZS01/2010(H1N1)毒株可能已经发生了抗原性漂移。
- 许沙沙常彦敏徐霖冯发深何霞王铸张定梅黎孟枫曹开源
- 关键词：甲型H1N1流感血凝素抗原决定簇
- 外源性端粒酶催化亚单位对人视网膜血管内皮细胞的影响
- 2006年
- 目的探讨外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)对人视网膜血管内皮细胞(hRCEC)端粒酶活性、相关基因表达和体外生存时间的影响。方法阳离子脂质体介导hRCEC转染;RT-PCR法检测人类端粒酶RNA组份(hTR)、端粒酶相关蛋白1(TEP1)及hTERT基因的表达;TRAP法检测端粒酶活性;细胞计数法绘制生长曲线。结果hTR、TEP1基因在hTERT转染hRCEC前后都表达,hTERT基因在转染前不表达,转染后24h及稳定转染克隆形成时表达,细胞停止分裂时又失去表达;转染前无端粒酶活性,转染后24h及稳定转染克隆形成时可检测到端粒酶活性,细胞停止分裂时端粒酶活性消失;稳定转染了hTERT基因后hRCEC的生存时间没有延长。结论hTERT转染可显著提高hRCEC中hTERT基因表达水平,hTERT基因表达与端粒酶活性一致,但只用hTERT转染的方法不能使hRCEC细胞生存时间延长。
- 杜贻鹏陈展辉陈淑杰何霞柏云谢金卫周俊宜
- 关键词：HTERTTEP1端粒酶视网膜血管内皮细胞
- 前列腺癌LNCap/PC-3细胞模型中肿瘤转移相关基因表达的芯片分析
- 2013年
- 目的筛选与分析LNCap细胞和PC-3细胞肿瘤转移相关的差异表达基因。方法通过肿瘤转移基因芯片分析前列腺癌雄激素依赖型(ADPC)LNCap细胞以及前列腺癌雄激素非依赖型(AIPC)PC-3细胞84个肿瘤转移相关基因的表达差异。结果两个细胞株中表达差异显著基因共56个,在LNCap细胞中有41个基因下调,15个基因上调表达。结论LNCap细胞和PC-3细胞肿瘤转移相关的差异表达基因有助于研究AIPC的形成以及前列腺癌的侵袭转移机制。
- 曹开源徐霖王铸何霞关琳琳庹玖玲汪杨罗燕芬钟慧玲沈关心
- 关键词：前列腺癌
