- pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表达质粒的构建及鉴定
- 2010年
- 目的:构建靶向人ABCG2基因的pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表达质粒,运用RNA干扰下调ABCG2基因在鼻咽癌细胞系CNE-2中的表达,并筛选出其基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:针对ABCG2基因的mRNA序列设计3个干扰靶点,分别构建3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,经大肠杆菌扩增,酶切、PCR、测序鉴定,用脂质体法转染鼻咽癌CNE-2细胞,用real-timePCR和Westernblot检测ABCG2基因在mRNA和蛋白水平的抑制效果。结果:经测序证实,成功构建pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表达质粒。重组质粒转染CNE-2细胞后,ABCG2基因的mRNA水平及蛋白表达水平明显下调,其中以1号重组质粒效应最强,mRNA水平下调75%,蛋白水平下调68%。结论:成功构建以人ABCG2为靶向的pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2的重组质粒。其对鼻咽癌CNE-2细胞中AB-CG2的表达具有显著抑制效应,为进一步研究ABCG2在CNE-2细胞中的功能和鼻咽癌的基因治疗奠定了基础。
- 俞艳萍张松孔维佳
- 关键词：ABCG2真核表达质粒
- 晚期鼻咽癌组织eIF4E基因表达与放化疗敏感性的关系被引量：1
- 2019年
- 目的探讨晚期鼻咽癌组织真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)基因表达与放化疗敏感性的关系。方法 30例晚期鼻咽癌患者鼻咽癌活检组织为癌症组,并以同期30例活检鼻咽黏膜慢性炎症组织为对照组。免疫组化染色检测鼻咽癌组织和鼻咽黏膜慢性炎症组织eIF4E蛋白阳性表达情况,以GAPDH作为内参照进行实时定量PCR检测鼻咽癌组织和鼻咽黏膜慢性炎症组织eIF4E mRNA相对表达量。癌症组患者均常规行放化疗治疗,分析其放化疗敏感性。分析癌症组eIF4E蛋白阳性表达率和mRNA相对表达量与放化疗敏感性的关系。结果与对照组鼻咽黏膜慢性炎症组织比较,癌症组鼻咽癌组织eIF4E蛋白阳性表达率和mRNA相对表达量均较高(P <0. 05)。癌症组放化疗高反应和低反应患者分别22例和8例。与癌症组放化疗高反应患者比较,放化疗低反应患者鼻咽癌组织eIF4E蛋白阳性表达率和mRNA相对表达量均较高(P <0. 05)。Spearman相关分析结果显示,晚期鼻咽癌组织eIF4E蛋白阳性表达率和mRNA相对表达量与其放化疗敏感性均呈负相关(r=-0. 887、-0. 895,P <0. 05)。晚期鼻咽癌组织eIF4E蛋白阳性表达率和mRNA相对表达量预测其放化疗敏感性的准确性分别为60. 00%和76. 67%。结论晚期鼻咽癌组织eIF4E基因表达与放化疗敏感性密切相关,可作为其放化疗敏感性评估的参考指标。
- 俞艳萍费志强陆璐
- 关键词：晚期鼻咽癌EIF4E放化疗敏感性
- 白藜芦醇对人胰腺癌PANC-1细胞增殖与侵袭的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨白藜芦醇对人胰腺癌PANC-1细胞增殖与侵袭能力的影响.方法 实验分为空白对照组,0.1%DMSO组,白藜芦醇组（50、100、200 μmol/L）.MTT法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化;Transwell侵袭小室检测白藜芦醇对细胞侵袭的影响;荧光实时定量PCR和Western blot检测白藜芦醇对细胞Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达的影响.数据以-x±s表示,多组比较采用方差分析.结果 （1）空白对照组抑制率为0;0.1%DMSO组细胞抑制率为3.25%±0.42%;白藜芦醇50 μmol/L组细胞抑制率为13.23%±1.68%;白藜芦醇100μmol/L组细胞抑制率为42.25%±3.20%;白藜芦醇200μmol/L组细胞抑制率为56.94%±5.31%.各组比较,差异有统计学意义（F=460.10,P〈0.05）.（2）空白对照组细胞凋亡率为0.05%±0.03%;0.1%DMSO组细胞为凋亡率为3.39%±1.77%;白藜芦醇50 μmol/L组细胞凋亡率为6.92%±1.85%;白藜芦醇100 μmol/L组细胞凋亡率为19.05%±2.01%;白藜芦醇200 μmol/L组细胞凋亡率为27.17%±6.43%.各组比较,差异有统计学意义（F=38.84,P〈0.05）.（3）0.1%DMSO组对细胞周期无显著影响.白藜芦醇引起PANC-1细胞G0/G1期和S期阻滞,G2/M期细胞减少.（4）空白对照组平均穿膜细胞数为61±13;0.1%DMSO组为54±13;白藜芦醇50 μmol/L组为48±15;白藜芦醇100 μmol/L组为23±6;白藜芦醇200 μmol/L组为18±7.各组比较,差异有统计学意义（F=69.08,P〈0.05）.（5）白藜芦醇可使PANC-1细胞Bax表达升高,Bcl-2表达下调.MMP-2、MMP-9的表达明显受到抑制,mRNA和蛋白水平变化一致.结论 白藜芦醇可明显抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖,诱导细胞凋亡并抑制其侵袭能力.
- 崔静赵刚勾善淼俞艳萍王春友
- 关键词：胰腺肿瘤PANC-1细胞白藜芦醇细胞增殖细胞凋亡
- ABCG2在鼻咽癌中的表达及其在鼻咽癌化疗中的作用
- 第一部分ABCG2在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌化疗中多药耐药性的关系
目的：探讨ABCG2在鼻咽癌活检标本及鼻咽癌细胞系CNE-2中的表达及其与鼻咽癌化疗中的多药耐药性的关系。
材料和方法：鼻咽癌活检标本取自...
- 俞艳萍
- 关键词：鼻咽癌SHRNA真核表达盐酸米托蒽醌
- 文献传递
- 人乳头瘤病毒16长调控区内meCpG位点去甲基化对HPV阳性头颈肿瘤细胞的影晌
- 2018年
- 目的探讨人乳头瘤病毒-16(Human papillomavirus,HPV-16)长调控区内meCpG位点的去甲基化对3种HPV阳性头颈肿瘤细胞的影晌。方法采用5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2~'-deoxycytidine,5-Aza-2~'-dc)处理后,应用BSP法检测UM-SCC47、CaSki及SiHa3种HPV-16阳性肿瘤细胞长调控区内CpG位点的甲基化状态;采用实时荧光定量PCR法检测HPV-16 E6与E7 mRNA的表达水平;检测5-Aza-2~'-dc对细胞生长、细胞凋亡的影响;采用Lipo Infectamine RNAiMAX转染siRNA,对E6和E7表达进行沉默,随后检测细胞増殖抑制、凋亡以及周期等生物学状态的变化。结果采用浓度为0.5μmol/L的5-Aza-2~'-dc对细胞进行96 h的处理具有最好的去甲基化效果。用5-Aza-2~'-dc去甲基化处理后,UM-SCC47细胞和CaSki细胞内E6与E7 mRNA的表达水平明显降低,相比对照组差异均有统计学意义(t=1.356、2.623,P=0.031、0.005;t=1.798、2.015,P=0.011、0.009);SiHa细胞E6与E7 mRNA的表达水平较对照组无明显差异(t=1.591、1.153,P=1.105、0.753)。用5-Aza-2~'-dc处理后,细胞增殖受到明显抑制。对E6与E7表达进行沉默后,3种细胞的生长均受到抑制。3种细胞调亡情况均明显增加,阻滞于S期、G2/M期的细胞均明显增加,与对照组相比差异均有统计学意义。结论去甲基化处理后,长调控区内甲基化状态不同的HPV-16阳性肿瘤细胞的反应完全不同,说明在HPV-16阳性肿瘤中,可能存在关于长调控区内甲基化状态的不同的肿瘤特性与癌症发生机制。
- 俞艳萍陆璐
- 关键词：人乳头瘤病毒去甲基化
- 一种医院用的智能自主移动导航宣教机器人
- 本实用新型公开了一种医院用的智能自主移动导航宣教机器人，涉及到医疗设备领域，包括下半部，下半部的上端设置有上半部，上半部的侧面固定连接有显示屏，下半部的内部开设有空腔，空腔的内部设置有安装板，安装板的上端面中部固定连接有...
- 夏荣聂国辉卢永田潘军杰俞艳萍孙金杰陶晶徐庆华姚映琼徐小丹张一娃魏沛群
- 文献传递
- 耳鸣的诊断与治疗被引量：25
- 2022年
- 随着现代科学技术的飞速发展,临床诊疗技术和方法不断发展和完善。本专栏的开辟旨在创建一个学术交流平台,针对本学科临床工作中的热点和难点,邀请在相关领域做出大量工作并颇有建树的专家和教授,介绍他们的见解和经验,以飨读者。圆桌论坛为个人意见,不具共识性。余力生教授:耳鸣一词源于拉丁语“tinnire”,意思是“ring”,几乎每个人一生中都至少经历过一次耳鸣,虽然大多数情况下。
- 余力生杨仕明王秋菊李明高下张剑宁刘宏建曾祥丽张劲姜子刚王慧杨蓓蓓冰丹王方园左汶奇俞艳萍刘晖宋勇莉宋纪军王明明马鑫陈钢钢张甦琳
- 关键词：耳鸣
- Wnt5A在鼻息肉组织中的表达被引量：5
- 2010年
- 目的:通过对比Wnt5A在伴或不伴鼻息肉的慢性鼻鼻窦炎(CRSwNP或CRSsNP)及正常鼻黏膜组织中的表达差异,探讨Wnt5A与CRS发病之间的联系。方法:应用免疫组织化学染色检测Wnt5A及pLRP6在CRSwNP和(或)CRSsNP组织中的表达状态,比较其间的差异。结果:Wnt5A在CRSwNP组中的表达明显较对照组及CRSsNP组增强(P<0.01),阳性染色主要见于炎性细胞及上皮细胞;而CRSwNP组中pLRP6表达则低于对照组(P<0.01)。结论:Wnt5A在CRSwNP组织中的表达上调提示Wnt5A可能参与CRSwNP的发病。
- 吴俊华孔维佳俞艳萍
- 关键词：WNT5A鼻窦炎鼻息肉
- 声音疗法联合药物治疗慢性主观性耳鸣的临床随机对照研究被引量：3
- 2023年
- 目的探讨声音联合药物治疗与药物治疗对慢性主观性耳鸣患者的短期疗效及其差异。方法纳入慢性耳鸣(>6个月)患者共64例,采用随机对照方法,分为声音联合药物组(联合组)和药物组各32例。在耳鸣咨询基础上,药物组予口服银杏叶提取物片,联合组在药物治疗基础上行个性化多元复合声治疗,比较两组治疗1个月前后耳鸣残疾量表(tinnitus handicap inventory,THI)、耳鸣严重程度视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)及焦虑自评量表(self-rating anxiety scale,SAS)评分变化,对比两组耳鸣治疗有效率,分析影响耳鸣治疗疗效的可能因素。结果药物组及联合组治疗后的THI、VAS及SAS评分均较前下降(P=0.001);联合组较药物组治疗前后THI(P=0.003)、VAS(P=0.002)评分差值变化更大;短期治疗前后两组SAS评分差值无明显统计学差异;联合组治疗总有效率较药物组高(P=0.002);性别(P=0.366)、年龄(P=0.062)、耳鸣频率(P=0.142)、耳鸣侧别(P=0.891)、耳鸣音与听力下降频段是否匹配(P=0.302)等因素均与耳鸣疗效无明显相关性。结论在耳鸣咨询基础上,声音疗法联合药物及单独药物治疗耳鸣皆有一定疗效,联合组较药物组能更有效缓解耳鸣对患者生活影响的主观严重程度,并具有更高治疗总有效率。性别、年龄、耳鸣频率、耳鸣侧别、耳鸣音与听力下降频段是否匹配等因素对耳鸣疗效无明显影响。
- 董洪松王春丽俞艳萍陈涛聂国辉
- 关键词：药物银杏叶
