刘佳
- 作品数：16 被引量：39H指数：4
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗PRP-TT加强免疫效果评价被引量：1
- 2011年
- 目的评价国产b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗PRP-TT的加强免疫效果。方法分别用安儿宝和呵儿贝两种Hib结合疫苗,对在广西柳州市常住儿童进行3、4、5月龄3针免疫,1年后,进行第4剂加强免疫。分别于3针免疫1年后和加强免疫1个月后采血,分离血清,采用ELISA和体外杀菌实验(Serum bactericidal assay,SBA)分别检测免疫前后血清IgG抗体浓度和加强免疫后SBA抗体滴度。结果安儿宝和呵儿贝疫苗3针免疫1年后,血清IgG抗体几何平均数浓度(Geometric mean concentrations,GMCs)分别为3.17μg/ml和3.00μg/ml,二者差异无统计学意义(P>0.05);其中,IgG抗体浓度在1.00μg/ml以上的血清所占的比例分别为79%(62/78)和76%(115/152),二者差异无统计学意义(P>0.05)。加强免疫后1个月,两种疫苗免疫血清中IgG抗体GMCs分别为71.33μg/ml和65.35μg/ml,二者差异无统计学意义(P>0.05);IgG抗体浓度均能100%达1.00μg/ml以上。两种疫苗加强免疫后的血清IgG抗体浓度与各自加强免疫前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。加强免疫后,两种疫苗免疫血清的SBA抗体滴度分别为5 263和4 637,二者差异无统计学意义(P>0.05)。两种疫苗免疫后血清IgG抗体浓度和SBA抗体滴度均具有相关性(r值分别为0.696和0.689,P<0.05)。结论 3针免疫1年后,两种疫苗免疫血清中IgG抗体仍保持较高的水平,第4剂加强免疫后,抗体水平迅速显著升高,100%达1.00μg/ml以上,且具有有效的体外杀菌功能。
- 李亚南乔瑞洁李红刘佳王浩史晓玲叶强谢贵林
- 关键词：免疫效果
- A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证被引量：1
- 2014年
- 目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进行特异性、线性、精密度验证。结果确定A600值为0.5~0.8时为收获细菌最佳收获时间;冻存菌种可替代新鲜制备菌种作为靶菌;最佳杀菌反应时间为60 min;17830和84321N批补体均可用于试验。质控血清Men10的质控范围A群为521~4 689,C群为1 047~9 423,W135群为1 779~16 008,Y群为1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清样品后能够抑制≥80%的同群SBA滴度,而异群多糖则<20%;血清样品稀释倍数与对应的SBA滴度呈显著负相关,斜率在-0.90^-1.10之间,Pearson相关系数在0.90~1.0之间,P均<0.001;同一实验内相同样品检测结果 CV≤25%,实验间相同样品的95%的检测结果落在检测值中位数3倍(一个稀释度)的范围内,CV≤40%,不同实验室间相同样品的检测结果至少有70%落在美国CDC公布结果的3倍(一个稀释度)范围内。结论建立了标准化的具国际间可比性的A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌SBA,该方法特异性、线性和精密度良好。
- 乔瑞洁赵志强王浩王欣茹刘佳刘方蕾吴兵于旭博林纪胜李亚南叶强谢贵林
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌
- A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗对5～59岁健康人群的免疫原性再评价被引量：4
- 2014年
- 目的：对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗在5～59岁健康人群中的免疫原性进行再评价。方法对2005年在广西河池市进行的临床试验中采集的血清，采用国际标准化的酶联免疫吸附试验（ELISA）和血清体外杀菌试验（SBA）方法检测血清中抗A群C群脑膜炎球菌荚膜多糖的特异性IgG抗体含量和对A群C群脑膜炎球菌的抗体杀菌功能。结果免疫前、后，A群血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体平均几何浓度（GMC）分别为23．66μg/ml和78．83μg/ml （P＜0．05），C群分别为1．23μg/ml和51．25μg/ml （P＜0．05）；免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥2μg/ml的比例，A群分别为99％和100％（P＞0．05），C群为20％和99％（P＜0．05）；免疫后较免疫前抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥4倍升高的比例，A群为34％和C群为100％。免疫前、后血清中针对脑膜炎球菌的杀菌抗体平均几何滴度（GMT），A群分别为1164和5530（P＜0．05），C群分别为4和6225（P＜0．05）；免疫前、后血清杀菌抗体GMT≥128的比例，A群分别为91％和99％（P＞0．05），C群分别为14％和96％（ P＜0．05）；免疫后较免疫前血清杀菌抗体滴度≥4倍升高的比例分别为A群53％和C群100％。免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度和杀菌抗体滴度之间的Pearson相关系数，A群分别为r＝0．15和r＝0．23，C群r＝-0．14和r＝0．58（P＜0．05）。结论本研究以标准化检测方法产生的具体免疫原性数据，证明A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗良好的免疫原性。
- 赵志强乔瑞洁王欣茹王浩杨进权怡史晓玲刘佳林纪胜谢贵林
- 关键词：免疫原性酶联免疫吸附试验
- 不同来源HL60细胞用于调理吞噬杀菌试验的比较被引量：1
- 2013年
- 目的通过比较不同来源的HL60细胞分化后细胞的表面标志、活性及其对肺炎链球菌调理吞噬杀菌指数的动态变化，评价HL60细胞的来源对肺炎链球菌调理吞噬杀菌能力的影响。方法使用流式细胞仪连续监测来源于美国ATCC和中国科学院上海细胞研究所的HL60细胞在分化后1～7d的表面标志CDllb、CD35和CD71的表达情况，并观察活细胞、凋亡细胞和死亡细胞的比例；同时使用两种不同来源的细胞检测09CS和B两份质控血清对肺炎链球菌血清型6B、7F、14和23F菌株的调理吞噬杀菌指数，同时观察09CS对13价结合疫苗血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F菌株的调理吞噬杀菌指数。结果两种不同来源HL60细胞分化3～6d细胞的表面标志、活细胞比例均可达到国际实验室的要求指标；两份质控血清对检测菌株的调理吞噬杀菌指数均能稳定于质控范围之内；两种细胞检测的09CS对13价肺炎链球菌结合疫苗血清型菌株的调理吞噬杀菌指数具可比性。结论两种来源不同的HL60细胞分化3-6d均能用于评价肺炎链球菌疫苗免疫血清的调理吞噬杀菌试验，这为调理吞噬杀菌试验及其标准化在国内的建立提供了便利。
- 王浩乔瑞洁刘佳王欣茹林纪胜谢贵林赵志强
- 关键词：HL60细胞分化细胞表面标志肺炎链球菌
- 2种14型肺炎球菌多糖-蛋白结合物的制备及免疫原性比较被引量：2
- 2016年
- 目的:以破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)和己二酸二酰肼(adipic acid dihydrazide,ADH)衍生的TT(TTAH)分别作为载体蛋白制备14型肺炎球菌多糖-蛋白结合物,比较2种结合物在小鼠体内的免疫原性。方法:以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDAC)作为缩合剂,介导TT与ADH反应,制备TTAH衍生物,2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)法测定TTAH的-AH衍生率;将14型肺炎球菌多糖(PS14)水解并用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶四氟化硼(CDAP)活化后直接与TT或TTAH结合,结合物经Sepharose 4 FF层析柱纯化后收集分配系数(KD)<0.2的样品并除菌过滤作为结合物原液,并对其生化指标、血清学特异性和小鼠免疫原性进行检测。结果:2种结合物原液游离糖含量均在1%以内,多糖回收率分别为PS14-TT:33.80%及PS14-TTAH:29.15%。与A组(多糖组)相比,2种结合物B组(PS14-TT)和C组(PS14-TTAH)能够诱导更高的抗PS14抗体水平(P<0.001)并具有剂次加强效应;与C组相比,B组能够诱导更高的抗PS14抗体水平且差异显著并具有统计学意义(P<0.05);2组结合物免疫3针后C组抗TT抗体水平高于B组,但差异无统计学意义,B组无剂次加强效应,而C组有剂次加强效应。结论:PS14-TT在小鼠体内诱导了较高的抗PS14抗体水平及较低的抗TT抗体水平,是较理想的多糖蛋白结合疫苗。
- 刘爱萍任珍芸刘佳王欣茹王玺李阿妮李燕婷胡浩吴兵谢贵林
- 关键词：肺炎球菌结合疫苗破伤风类毒素免疫原性
- 脑膜炎球菌疫苗血清学评价的相关研究进展被引量：3
- 2014年
- 研究证明,脑膜炎球菌荚膜多糖、多糖蛋白结合物以及外膜蛋白等物质都能够诱导产生抗体,帮助保护机体抵御脑膜炎球菌疾病。阐述了脑膜炎球菌疫苗研制过程中特异性抗体的检测方法以及在疫苗效果评价中的意义,指出在脑膜炎球菌疫苗的效果评价中,抗体含量以及功能性抗体活性的检测是重要指标,为疫苗的市场应用提供了依据。
- 刘佳赵志强谢贵林
- 关键词：脑膜炎球菌疫苗抗体酶联免疫吸附试验
- CDAP活化制备C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性试验被引量：6
- 2015年
- 目的：评价以1－氰基－4－二甲氨基－吡啶四氟硼酸（ CDAP ）活化制备的C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性。方法以变通的现有工艺为基础，选取C群脑膜炎球菌结合疫苗原液连续3批样品，分别放置于（37＆#177;2）℃、（25＆#177;2）℃，和2～8℃三种温度下，根据稳定性试验原则定期取样并进行主要指标的检测，评估原液的稳定性。结果 C群脑膜炎球菌结合疫苗原液于2～8℃保存18个月，（25＆#177;2）℃保存20周，37℃保存7天，各项检测指标均符合质量标准的要求。结论在2～8℃之下，施行变通的工艺， C群脑膜炎球菌结合疫苗原液可稳定存放18个月。
- 萧在澜徐永浩刘佳孔素娟刘爱萍王媛冯琪瑢刘方蕾吴兵于旭博袁菲谢贵林
- 关键词：C群脑膜炎球菌结合疫苗
- 国产b型流感嗜血杆菌PRP-TT疫苗第四剂加强免疫效果评价
- 目的 评价兰州生物制品研究所生产的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗PRP-TT (Polyribosyl ribitol phosphate-tetanus to...
- 李亚南乔瑞洁李红刘佳王浩史晓玲叶强谢贵林
- 关键词：HIB结合疫苗加强免疫
- 1型肺炎球菌多糖结合化学特性及结合物免疫原性探究被引量：2
- 2016年
- 目的:研究1型肺炎球菌多糖的氨基、羧基和羟基的结合反应活性,制备1型肺炎球菌多糖-蛋白质结合物,并研究其抗原性和免疫原性。方法:将天然多糖降解,用EDAC直接缩合法验证多糖分子上氨基的反应活性。采用EDAC缩合法,利用降解多糖分子上的羧基与破伤风类毒素己二酸酰肼衍生物(TTAH)的氨基和肼基缩合,以CDAP活化降解多糖的羟基,并与破伤风类毒素(TT)或TTAH直接结合,纯化结合物并对结合物抗原性和免疫原性进行分析。结果:天然多糖重均相对分子质量由4.175×105g·mol-1降为8.917×104g·mol-1,其结构、特异基团含量和抗原性未改变;降解多糖与EDAC混合后,相对分子质量未增加;3种方法制备的结合物,其多糖抗原性未发生变化,免疫原性显著高于天然多糖(P<0.05),3针免疫后Ig G抗体水平均有剂次加强效应,呈T细胞依赖型免疫应答。不同方法制备的结合物,免疫原性无显著差异。结论:采用本研究的方法,可降解1型肺炎球菌多糖并保留天然多糖特性;多糖分子上的氨基无结合反应活性,羧基和羟基有结合反应活性;EDAC缩合法与CDAP活化法所制备结合物,赋予了多糖典型的T细胞依赖型抗原的特征,不同方法及制备的结合物免疫原性无显著差异。间隔剂在本研究中对结合物免疫原性无影响。
- 胡浩朱学喆李献林罗树权李阿妮刘佳刘爱萍赵志强谢贵林
- 关键词：免疫原性
- 小鼠血清中Hia荚膜多糖特异IgG含量间接ELISA检测方法的建立及验证被引量：1
- 2016年
- 目的建立间接ELISA方法检测小鼠血清中a型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type a,Hia）荚膜多糖（capsular polysaccharide,CPS）特异IgG含量,并对该方法进行验证。方法用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶-四氟硼酸盐（1-cyano-4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate,CDAP）活化Hia CPS制备酪胺化荚膜多糖（capsular polysaccharide-tyramined,CPS-Tyr）,经Sepharose CL-4B层析柱分析其与Hia CPS的相对分子质量分布范围;对包被条件、封闭条件及显色时间进行优化,以碱性磷酸酶标记的羊抗鼠Ig G作为二抗,4-硝基苯磷酸二钠盐作为显色剂,建立小鼠血清中Hia CPS抗体的间接ELISA检测方法,并对该方法的特异性、线性及精密度进行验证。结果 CPS-Tyr与CPS相比,相对分子质量分布未发生明显变化。优化后的检测条件：包被抗原为CPS-Tyr,包被浓度为5μg/ml;以Costar42592为检测酶标板;含1%（bovine serum albumin,BSA）的封闭液37℃恒温封闭2 h;显色2 h。Hia阳性血清经不同浓度的Hia CPS和CPS-Tyr吸收后,抗原吸收的抑制率与浓度依赖性明显,抑制率在0-100%之间。CPS-Tyr与CPS相比,抗原性保持一致,并且相同浓度的b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b,Hib）荚膜多糖抗原对阳性血清的抑制率为0;血清稀释倍数与抗体效价之间呈负相关,斜率为-1.094,R2为0.998;本方法的实验内和实验间变异系数分别为8.8%和10.9%。结论建立的间接ELISA方法特异性、线性及精密度均符合要求,适用于检测小鼠血清中抗Hia CPS特异IgG的含量。
- 苗鑫王欣茹赵志强刘佳刘月萍刘方蕾李燕婷戈钰雯谢贵林谭小梅
- 关键词：荚膜多糖免疫球蛋白G
