刘佳旭
- 作品数:7 被引量:5H指数:2
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金新疆生产建设兵团博士基金兵团博士基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒的构建
- 目的构建布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒,并检测其遗传稳定性和特异性表达情况,为今后研究布鲁氏菌的新型疫苗奠定基础。方法将扩增出的OMP31基因克隆到GTPV(Goatpoxvirus)重组载体上,经PCR、测序鉴定...
- 邵雪花陈创夫乔军张辉刘佳旭
- 关键词:羊种布鲁氏菌外膜蛋白
- 文献传递
- 布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒的构建
- 目的:构建布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒,并检测其遗传稳定性和特异性表达情况,为今后研究布鲁氏菌的新型疫苗奠定基础。
方法:将扩增出的OMP31基因克隆到GTPV(Goat poxvirus)重组载体上,...
- 邵雪花陈创夫乔军张辉刘佳旭
- 关键词:羊种布鲁氏菌外膜蛋白特异性表达山羊痘病毒免疫反应性
- 文献传递
- 中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究被引量:1
- 2009年
- 为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达。结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧光,表明已成功克隆了中国荷斯坦奶牛IL-18基因,并实现了该基因在真核细胞中的表达。
- 乔军孟庆玲陈创夫才学鹏刘佳旭任艳张辉
- 关键词:克隆真核表达中国荷斯坦奶牛
- 小反刍兽疫病毒重组抗原间接ELISA检测及初步应用被引量:2
- 2010年
- 为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法。结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRV蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带。本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考。
- 孟庆玲才学鹏倪伟任艳李贞刘佳旭乔军
- 关键词:小反刍兽疫间接ELISA竞争ELISA
- 荷斯坦奶牛IFN-γ基因的克隆、序列分析及表达研究
- 2010年
- 利用RT-PCR技术从荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增IFN-γ(ccIFN-γ)基因,克隆至pMD18-T载体进行测序。测序结果表明,ccIFN-γ基因全长501bp,编码166个氨基酸,其中前23个氨基酸残基构成信号肽序列,后面147氨基酸残基构成成熟肽,其中含有2个潜在的N-链糖基化位点。二级和三级结构预测发现,ccIFN-γ蛋白分子中存在7个的α-螺旋,中间由无规卷曲连接,折叠成由α-螺旋包绕的中空状结构。将ccIFN-γ成熟肽编码区序列进一步克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。经SDS-PAGE分析,表达出与预期大小(20.6KDa)相符的重组蛋白,占菌体蛋白18.6%。Western blot检测证实表达的融合蛋白为牛IFN-γ,这为进一步开展重组ccIFN-γ生物学活性的研究奠定了基础。
- 李贞陈创夫乔军任艳张辉杨明峰刘佳旭倪伟
- 关键词:荷斯坦奶牛Γ-干扰素基因原核表达
- O型口蹄疫病毒vp1基因重组痘苗病毒的构建与鉴定被引量:2
- 2011年
- 口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的牛、羊、猪、鹿等偶蹄动物的急性烈性接触性传染病,以口腔黏膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂为特征。疫苗接种是特异性预防FMD的有效手段,
- 刘佳旭陈创夫乔军张辉任艳胡圣伟
- 关键词:口蹄疫病毒VP1基因重组痘苗病毒偶蹄动物口腔黏膜
- O型口蹄疫病毒VP1基因及IL-18基因重组痘苗病毒的构建及免疫原性初步研究
- 口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要特征为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱,被世界动物卫生组织列为A类传染病之首。该病不仅影...
- 刘佳旭
- 关键词:O型口蹄疫病毒痘苗病毒免疫原性合成肽疫苗
- 文献传递