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刘庆友: 作品数：179 被引量：249H指数：7; 供职机构：广西大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>

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一种受精卵胞质内注射DNA生产转基因水牛的方法: 一种受精卵胞质内注射DNA生产转基因水牛的方法。体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精IVF后，将携带有增强绿色荧光蛋白EGFP基因的转基因载体pEGFP-N1质粒DNA直接显微注射到水牛受精卵胞质中，制作水牛转基因胚胎，然后...; 陆凤花石德顺孟凡丽刘庆友韦英明李湘萍罗婵蒋建荣; 文献传递

一种利用显微授精技术生产转基因兔的方法: 一种利用显微授精技术生产转基因兔的方法，通过假阴道法采集精液或从附睾收集的精液用PBS上游，经离心洗涤后，分装到冷冻管中，投入液氮中保存；进行显微操作之前，从液氮中取出装有精子的冷冻管，室温下解冻，加入外源DNA质粒与冻...; 陆凤花石德顺张顺刘庆友罗婵李湘萍; 文献传递

碱性成纤维细胞生长因子促进水牛类胚胎生殖干细胞形成的初步研究: 本研究主要通过碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)特异信号阻断剂阻断下游相关的信号通路,对bFGF在水牛类胚胎生殖干细胞(EG-like)形成过程中的作用和机理进行了初步研究。首先,对bFGF在水牛PGCs重编程形成EG-...; 汪彩珠杨素芳陈思蓓邓彦飞刘庆友罗婵石德顺; 关键词：原始生殖细胞碱性成纤维细胞生长因子重编程; 文献传递

铁蛋白Ferritin原核表达和纯化及纳米颗粒胞外自组装被引量：3: 2018年; 旨在使用原核表达系统表达幽门螺杆菌铁蛋白Ferritin,获得具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,从而通过表面修饰等方法应用于疾病治疗和抗原呈递等研究。将铁蛋白氨基酸序列按照大肠杆菌常用密码子进行优化,合成重组铁蛋白基因并克隆至原核表达载体。使用镍柱进行亲和层析纯化重组蛋白,并在透析复性后利用透射电子显微镜对体外自组装纳米颗粒进行鉴定。结果显示,本研究成功构建了pET-32a-Ferritin原核表达载体,并使用IPTG进行诱导表达获得His-Ferritin重组铁蛋白,且主要以包涵体形式存在。通过镍柱进行亲和层析纯化获得纯度为96%的重组蛋白,使用脱盐柱将重组蛋白梯度透析至2mol·L-1尿素缓冲液中进行复性后,使用电子显微镜观察胞外自组装重组蛋白为粒径在12~20nm的均一的纳米结构,与天然铁蛋白纳米粒子类似。本研究成功建立了Ferritin蛋白原核表达体系,通过诱导表达、亲和层析纯化及复性获得了具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,为其在生物医药领域的应用奠定基础。; 李志鹏刘福航崔奎青石德顺刘庆友; 关键词：铁蛋白原核表达

一种利用慢病毒载体生产转基因水牛的方法: 一种利用慢病毒载体生产转基因水牛的方法，其步骤为：首先进行高滴度慢病毒的包装及浓缩，对水牛胎儿成纤维细胞进行感染与筛选，采用显微注射法制作水牛转基因嵌合胚胎，将阳性胚胎移植到受体水牛。采用本发明的方法，成功获得了转外源基...; 李湘萍石德顺孟凡丽刘庆友陆凤花罗婵蒋建荣; 文献传递

脯氨酸对雌性胎猪胎盘GR表达的影响及其分子机制: 引言/目的脯氨酸(pro)在蛋白合成及新陈代谢、伤口愈合、抗氧化反应和免疫反应发挥重要的作用,对胎盘、胚胎及胎儿的发育至关重要。本试验采用分组对照的方法,研究添加1%的脯氨酸对环江香猪繁殖性能的影响,并探讨其分子机制。材...; 陈秋萍尚月丽石德顺刘庆友

影响兔胚胎细胞核移植效率的因素被引量：4: 2005年; 对兔胚胎细胞核移植(NT)的有关影响因素进行了系统研究。结果发现电场强度100V·mm-1,脉冲时间15μs,电脉冲3～4次的融合率显著高于其它组(P<0.05);融合前激活卵母细胞,分裂率和囊胚率显著高于融合后激活(P<0.05);当用8～16-细胞胚胎的卵裂球作供核时,卵裂率和囊胚率显著高于致密桑椹胚卵裂球为供核组;当重组胚在含3%发情牛血清(OCS)的TCM199中培养48h后,转入含10%FCS的TCM199中继续培养,卵裂率和囊胚率显著高于一直在3%OCS或10%胎犊血清(FCS)中培养的重组胚(P<0.05)。将22枚2～4-细胞期重组胚移入同期发情的受体母兔输卵管内,34d后产下NT仔兔1只。结果表明,电融合参数和供体胚胎的发育阶段以及受体卵母细胞的状态对NT效果有显著影响,在NT胚胎的不同发育阶段采用不同的血清种类和浓度可提高其胚胎发育能力。; 崔奎青刘庆友谢英韦精卫石德顺; 关键词：兔胚胎囊胚率卵裂球融合率桑椹胚细胞期

一种融合电极针: 本实用新型公开一种融合电极针，包括针头和针管，导电良好金属丝一端为针头，另一端与纯铜导线相连接，并置于玻璃针管内固定，玻璃管固定于显微操作仪操作臂上，纯铜导线与融合仪连接，胚胎置于两电极之间。本实用新型的有益效果是，可以...; 刘帅崔奎青刘庆友石德顺; 文献传递

乳腺特异性表达水牛PRL基因载体、构建及其应用: 本发明公开了一种乳腺特异性表达水牛PRL基因载体、构建及其应用，利用β-酪蛋白启动子启动水牛PRL基因，构建了乳腺特异性表达水牛PRL基因载体，并将该载体转入动物基因组中获得乳腺特异性表达水牛PRL蛋白的转基因动物，其乳...; 刘庆友石德顺任艳萍李湘萍陆凤花

增殖细胞核抗原在水牛腔前卵泡中的表达与卵巢组织定位: 2013年; 【目的】探讨在水牛中增殖细胞核抗原(PCNA)参与卵泡发生的时期及其在卵巢组织不同时期卵泡中的表达定位;【方法】采用石蜡切片结合免疫组化的方法对PCNA在卵巢组织中进行定位,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术检测PCNA在腔前卵泡中的表达情况。【结果】免疫组化结果显示:原始卵泡中的卵母细胞能检测到PCNA的表达,但颗粒细胞并未观察到PCNA的免疫染色;初级卵泡到次级卵泡,卵母细胞和颗粒细胞中均可检测到PCNA的表达,且在颗粒细胞中的表达有增强的趋势;有腔卵泡中,颗粒细胞、卵泡膜细胞及包围卵母细胞的卵丘细胞中都能观察到很强的免疫染色。定量表达检测结果显示:PCNA在原始卵泡、初级卵泡及次级卵泡中的表达呈上升趋势,并且有显著差异(43.50333±0.138338 vs 1.633804±0.093796 vs 1±0.012219,P<0.01);【结论】从初级卵泡开始在颗粒细胞中能检测到PCNA的表达,并且其表达随着卵泡的发育有明显的增强趋势,腔前卵泡中PCNA表达的QRT-PCR测定结果与免疫组化结果相一致,研究结果为阐明PCNA参与卵泡发生的分子调控机制奠定了基础。; 马帆周宇高亚可朱鹏雷小灿刘庆友石德顺; 关键词：水牛 PCNA