吴有强 作品数:9 被引量:261 H指数:5 供职机构: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
花粉管通道(或运载)法转化的植株后代遗传表现及转化机理的探讨 被引量:80 1998年 追溯了花粉管通道法的起因和形成以及现在的应用情况 ,说明利用此法可以将报告基因、目的基因等转入植物 ,经Southenblot,Northernblot等法鉴定和对表达产物的检测 ,证明这是一个行之有效的转化方法 .作者实验室对小麦转基因植株后代连续 4代遗传表现的观察证明 ,转入的处源基因可以连续遗传 ,遗传规律与其他转化方法如农干菌法、基因枪法等所得结果相似 .在此基础上 ,作者从植物受精生物学的光学和亚显微结构的观察结果出发 ,探讨了此法的转化机理 ,证明受精前后的卵细胞类似未完全酶解的原生质体 ,因此其转化机理应与原生质体的转化相似 .最后总结了此法的优点 。 曾君祉 吴有强 王东江 张健 马铮嵘 周志勇关键词:转基因植株 花粉管通道法 作物 用花粉管途径获得小麦转基因植株 被引量:200 1993年 本文将带GUS标记基因的质粒pBI121用花粉管途径转化普通小麦(T. aestivum L)品种小山3号的小花。从结实的106粒种子中,经点杂交初步筛选,再经Southern分子杂交鉴定,选出5株转基因小麦,转化率为4.7%。同时用荧光法和X-Gluc染色法测试,检测到这些植株中有GUS基因的表达产物β-葡糖苷酸酶(GUS)存在,证明GUS基因已整合到小麦植株中,并能在植物体中表达。 曾君祉 王东江 吴有强 张健 周文娟 朱小平 徐乃正关键词:小麦 花粉管途径 转基因植株 抗甜菜坏死黄脉病毒单抗轻链可变区基因的克隆及全序列测定 被引量:1 1994年 The results showed that PCR product was 318 bp V L gene of monoclonal antibody against beet necrotic yellow vein virus, code 106 amino acids. V L gene belongs to a k chain subelass Ⅱ of mouse, frame region had 85% homogenous with the published sequencing of V L gene of mouse and was in accord with structural characteristics of V L of mouse. 李振甫 吴有强 刘喜富 黄华樑 蔡祝南关键词:甜菜 坏死黄脉病毒 轻链可变区基因 小麦愈伤组织的悬浮培养 1992年 京冬1号、科冬58等十多个品种小麦的幼穗、幼胚的愈伤组织经一年多的继代培养,从中挑选出胚性强,分散性好的组织块进行扩增。在这个过程中我们发现不同品种在同一培养基上培养形成胚性愈伤组织的效量和时间是不同的。AgNO3 、弱散射光和脯氨酸对某些品种形成胚性愈伤组织有效。这说明改变培养条件能克服品种问的差异。用 MS、改良 AA、B5 等培养基作为基本培养基,附加2,4-D。 吴有强 曾君社 王东江 朱小平 张健关键词:愈伤组织 基本培养基 幼胚 幼穗 继代培养 悬浮细胞 抗除草剂转基因小麦愈伤组织的获得 1992年 小麦是重要的粮食作物,但在植物基因工程的研究中其进展是较缓慢的。除 Lorz.H 在1985年报导获得转基因愈伤组织外,迄今未见有更多的报导.我们在1989—1991年先后将抗除草剂 Basta 的 Bar 基因和萤火虫荧光素酶(Luc)基因转入小麦悬浮细胞系徐州211和(中3×科冬58)F1 的原生质体中,获得转基因的多细胞团和愈伤组织,并从(中3×科冬58)F1 的转基因抗性愈伤组织中得到根的分化。 曾君祉 杨书礼 吴有强 田文忠 张健 王东江 朱小平 周文娟关键词:愈伤组织 转基因小麦 萤火虫荧光素酶 基因转入 染色体组 抗甜菜坏死黄脉病毒单链抗体表达载体的构建及其表达 被引量:5 2000年 用PCR方法以分泌抗甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)单克隆抗体的杂交瘤细胞的基因组为模板,扩增了编码BNYVV单抗的重链可变区(VH)基因。测序表明,该VH序列属于小鼠Ⅱ(A)亚类,全长为360bp,编码120个氨基酸。将其和先前克隆的轻链基因分别插入到一个含有连接VH和VL基因的连接序列的质粒之中,构建成单链抗体(scFv)基因的表达载体pTCscFv。将质粒在大肠杆菌中表达,ELISA法检测出表达产物有与BNYVV抗原结合的活性。 曾君祉 周志勇 吴有强 刘志萍 王文星 黄华梁 蔡祝南 于嘉林关键词:BNYVV 单链抗体 大肠杆菌表达系统 抗病育种 抗除草剂基因和荧光素酶基因在小麦愈伤组织中的稳定表达 被引量:7 1993年 用PEG介导法将抗除草剂基因和萤火虫荧光素酶基因转入小麦原生质体,在含50mg/L Basta的培养基上筛选出有抗性的愈伤组织。DNA分子杂交结果表明bar基因和luc基因都已整合到小麦细胞基因组中,萤火虫荧光素酶活性测定也检测到luc基因的表达。 杨书礼 曾君祉 吴有强 朱小平 王东江 张健关键词:小麦 荧光素酶 除草剂 基因 抗乙型脑炎病毒单克隆抗体重链可变区基因在烟草中的表达 被引量:9 1997年 自Hiatt等1989年首次报道了在植物中进行抗体基因的表达研究以来,至今短短数年,这类研究已日益广泛深入。目前,利用转基因植物和植物细胞表达工程抗体基因进行抗体的生产、作物抗病育种以及植物代谢调控和发育的研究已经成为生物技术中的一个新途径,新的生长点。这是免疫学和植物科学在分子水平上有机结合的产物。现有的证据表明,不仅高等植物,单细胞绿藻也可以表达抗体基因。高等植物不仅可以表达简单的单域抗体基因,也可以表达更加复杂的IgA-G杂合抗体基因,并在体内装配出双分子dIgA-G和带分泌组分(SC)的SIgA-G,利用转抗体基因植物进行抗病育种,植物代谢和发育的研究也取得令人瞩目的进展。 吴有强 熊曦明 曾君祉 张健 王东江 黄华梁关键词:单克隆抗体 重链可变区基因 抗甜菜坏死黄脉病毒单链抗体基因的构建和在细菌中的表达 1999年 曾君祉 周志勇 吴有强 刘志萍 熊英 黄华梁 蔡祝南 于嘉林关键词:甜菜坏死黄脉病毒 抗体基因 可变区基因 细菌 基因工程抗体