目的:观察HH胶囊治疗HBV转基因小鼠抗乙肝病毒(HBV)疗效及其作用机制。方法:HBV转基因小鼠随机分为4组,苦参素组小鼠给予同体积含150mg·kg-1·d-1苦参素混悬液,高、低剂量HH胶囊组小鼠分别给予同体积含7、2g·kg-1·d-1HH混悬液,5周后,ELISA法检测血清及肝组织乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag),常规HE染色观察肝组织病理变化,定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、TANK结合激酶1(TKB1)m RNA、干扰素调控因子7(IRF7)m RNA表达。结果:高剂量HH胶囊可以改善肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,对肝组织炎细胞浸润未见明显缓解。与模型组比较,高剂量HH胶囊(7g·kg-1·d-1)可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBs Ag、HBVDNA水平,同时显著增强小鼠TKB1 m RNA、IRF7 m RNA表达,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:HH胶囊具有抗HBV作用,推测可能与增强TKB1 m RNA、IRF7 m RNA表达进而影响干扰素分泌有关。
目的:研究HH胶囊体外抗乙型肝炎病毒的作用及其对抗病毒蛋白2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-Oligoadenylate Synthetase,2'5'-OAS)、RAN依赖蛋白激酶(RAN-dependent protein kinase,PKR)的影响.方法:HepG2.2.15是目前最常用的乙型肝炎病毒感染的体外实验模型,将细胞随机分为空白对照组、阳性对照组(3TC)、不同浓度的HH胶囊组.用CCK-8检测药物细胞毒性,酶联免疫法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);荧光定量聚合酶链反应法检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA);用Westernblot、荧光定量PCR方法分别检测细胞内抗病毒蛋白2'5'-OAS、PKR及其mRNA水平.结果:HH胶囊的TC50是2.11g/L、312.00mg/L、156.00mg/L、78.00mg/L、39.00mg/LHH胶囊均可以降低细胞外HBeAg(0.285±0.007,0.462±0.008,0.565±0.009,0.733±0.008vs1.334±0.007)和HbsAg(0.834±0.008,1.021±0.011,1.347±0.017,1.548±0.015vs2.593±0.008)水平,312.00mg/L、156.00mg/LHH胶囊均可以减低细胞内乙型肝炎病毒DNA[(3.423±0.110)×109copies/L,(3.640±0.082)×109copies/Lvs(6.857±0.060)×109copies/L]、细胞外乙型肝炎病毒DNA(6547±87、7710±62vs24300±200),312.00mg/LHH胶囊可以增加细胞内OASmRNA(0.885±0.038vs0.688±0.068)、PKRmRNA(0.139±0.06vs0.058±0.005)表达及其OAS、PKR蛋白水平.结论:HH胶囊具有良好的抗乙型肝炎病毒作用,推测可能与增加细胞内OAS、PKR及其mRNA水平有关.
中医药抗乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)实验研究取得丰硕成果,总结出大量有效抗HBV方药,为以后筛选抗HBV药物提供思路;深研中医理论,挖掘中医中有关病毒性肝炎理论和方药,利用现代生物技术筛选抗HBV中药是最可靠的方法;借鉴民间流传的治疗病毒性肝炎的经验,从中筛选抗HBV药物也是一种捷径;利用现代技术方法筛选中药抗HBV有效成分有利于提高中药抗HBV研究水平;积极挖掘传统的非抗HBV药物的抗HBV作用,为研发抗HBV药物提供新思路。
