周丽
- 作品数：4 被引量：56H指数：3
- 供职机构：浙江大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学理学生物学更多>>
- 家蚕蛋白质双向电泳的样品制备方法被引量：32
- 2003年
- 进行蛋白质组研究的关键是要尽可能完整地获得一个基因组在一个生物体或一个组织器官的特定时期表达的蛋白质的种类和数量 ,双向电泳技术是分离组织和器官蛋白质的核心技术 ,而蛋白质样品的制备是双向电泳的基础。以家蚕胚胎、中肠、皮肤、丝腺等组织器官为材料 ,采用磷酸缓冲液或Tris HCl缓冲液抽提蛋白质样品 ,用 6种不同的蛋白质溶解缓冲液溶解蛋白质 ,经蛋白质双向电泳和蛋白质图像软件分析 ,结果表明用磷酸缓冲液抽提、蛋白质溶解缓冲液E溶解是制备家蚕蛋白质双向电泳样品的较好方法。蛋白质磷酸抽提缓冲液 (PBS)的组成为 :32 5mmol/LK2 HPO4,2 6mmol/LKH2 PO4,4 0 0mmol/LNaCl,pH 7 6。蛋白质样品溶解缓冲液E的组成为 :8mol/L尿素 ,2mol/L硫尿 ,4 %CHAPS ,2 0mmol/LTrisbase,30mmol/LDTE ,2 %Pharmalyte(pH 3～ 10 )。
- 钟伯雄颜海燕沈飞英李建科周丽
- 关键词：家蚕蛋白质双向电泳器官
- 利用转基因家蚕在蚕丝中表达重组人表皮生长因子
- 2021年
- 人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)具有刺激细胞增殖的强大能力,是伤口愈合的关键因子。利用转基因技术,在家蚕后部丝腺利用丝素轻链基因(fibroin light chain,FibL)启动子驱动FibL-hEGF融合蛋白的表达。借助piggyBac转座子将FibL-hEGF融合基因导入到家蚕基因组,利用荧光检测总共获得8个转基因阳性卵圈,转基因阳性率为36.36%。PCR和反向PCR检测证明外源融合基因FibL-hEGF已被成功整合到家蚕基因组中,且随机插入到家蚕染色体的5个位点。Western blotting检测表明FibL-hEGF融合蛋白在家蚕后部丝腺中表达且成功分泌到蚕茧中,进一步证实了转基因家蚕的产生。本研究中利用piggyBac转座子介导的转基因技术成功获得了转基因家蚕并得到重组hEGF蚕丝,该蚕丝可用于制造伤口敷料。
- 吴美玉叶小刚周丽阮靖华赵硕钟伯雄
- 关键词：转基因家蚕人表皮生长因子
- 家蚕胚胎发育关联的初始蛋白质研究被引量：16
- 2004年
- 以人工孵化卵、滞育卵和未受精卵为材料 ,通过蛋白质双向电泳分析和图谱比较分析 ,发现受精后的人工孵化卵和滞育卵 ,第 2、4、5和 6号蛋白斑点的表达量较未受精卵有所增加 ,人工孵化处理后的蚕卵第 2、3号蛋白斑点的表达量较滞育卵有所增加。推测这几种蛋白质可能在促使受精过程的完成以及促使胚胎解除滞育进入生长发育阶段方面发挥作用。
- 姚国华钟伯雄颜新培沈飞英陈齐龙周丽童小芬
- 关键词：家蚕蚕卵蛋白质电泳胚胎发育
