唐秀山
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金病毒学国家重点实验室开放研究基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备被引量：5
- 2007年
- 为了获得鸡CD8α/β蛋白及其多克隆抗体,进一步研究其结构与功能,本实验从三黄鸡cDNA文库中克隆了其CD8α/β胞外区片段,构建了pQE30/ChCD8α/β原核表达系统,并经诱导表达、亲和层析纯化,获得了纯化的重组蛋白(rChCD8α/β),然后用rChCD8α/β分别免疫Balb/c小鼠制备了其多克隆抗体。结果表明:本实验克隆的ChCD8α长483 bp、编码161个氨基酸、可在E.coliJM109中高效表达,蛋白质分子质量为24.0 ku,表达量占菌体蛋白量的25.0%,由该蛋白质所制备的多克隆抗体抗rChCD8α的ELISA效价为1∶1 024 000;另外,克隆的ChCD8β长447 bp,编码149个氨基酸,蛋白质的分子质量为18.5 ku,表达量占菌体蛋白量的20.0%,抗rChCD8β多克隆抗体ELISA效价为1∶64 000。本实验所得鸡CD8α/β的多克隆抗体将用于四聚体研究。
- 唐秀山王磊廖定为蒋一男夏春
- 关键词：CD8Α原核表达多克隆抗体
- 三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备
- 本实验室对鸡MHC Ⅰ(BF)、β2m、TCR和CD4进行了一系列研究，尤其是对BF2复等位基因和鸡β2m蛋白的二级结构及其复合体结合禽流感病毒多肽进行了研究。为了推进BF2-多肽-TCR以及CD8组装体的精细结构及其呈...
- 唐秀山
- 关键词：三黄鸡原核表达多克隆抗体
- 文献传递
- 三黄鸡CD4胞外区基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备
- 2007年
- 本研究根据鸡CD4分子胞外区基因序列设计合成一对引物,用PCR技术从三黄鸡的cDNA文库中克隆出了其CD4胞外区基因片段,大小为1 206 bp,将该片段插入pMAL-p2X表达载体中,转化大肠杆菌TB1感受态细胞后进行诱导表达,获得了分子量约为87.5 kD的融合蛋白。表达产物经Amylose树脂亲和层析柱纯化,得到了高纯度的鸡CD4胞外区的融合蛋白。利用此蛋白免疫小鼠,制备了高效价的鼠源抗鸡CD4胞外区的抗体,结果表明该蛋白具有良好的抗原性。
- 王成玉唐秀山王磊廖定为张冰
- 关键词：胞外区克隆原核表达
- 北京鸭CD8α分子克隆与表达及其多克隆抗体制备被引量：3
- 2008年
- 为了探讨鸭CTL免疫与病毒关系,本文用PCR技术从鸭cDNA文库中克隆了其CD8α基因(DuCD8α)。将DuCD8α成熟肽cDNA插入表达载体pQE30、构建了E.coliJM109(pQE30/DuCD8α)原核表达系。经诱导表达、蛋白纯化,制备了鼠抗DuCD8α多克隆抗体。结果表明DuCD8α成熟肽长645 bp,编码214个氨基酸。与已报道的DuCD8α在氨基酸水平上的同源性高达99.0%。SDS-PAGE证实重组DuCD8α(rDuCD8α)在JM109工程菌中的表达量可达15%。纯化的rDuCD8α分子量为26 kDa。ELISA结果显示鼠抗rDuCD8α多克隆抗体效价为1∶1 280 000。
- 廖定为唐秀山蒋一男张念之夏春
- 关键词：北京鸭CD8Α抗体
