目的研究5-氟尿嘧啶磁性白蛋白微球(5-fluorouracil magnetic albumin microspheres,5-FU-MAMS)的制备及其联合恒定外磁场体外对人胰腺癌PC-3细胞的生长抑制作用。方法乳化热固化技术制备5-FU-MAMS并检测其理化性质,MTT比色分析法观察5-FU-MAMS联合恒定磁场体外对人胰腺癌细胞的抑制作用。结果5-FU-MAMS平均粒径为200~1000nm,呈球形,磁响应性良好,载药量为每毫克微球含5-FU50μg;单纯磁场组和各种浓度的空白MAMS对肿瘤生长无影响;相应药物浓度的5-FU-MAMS与5-FU抑制率(inhibition ratio,IR)相似,差异无统计学意义(P〉0.05);相应药物浓度的5-FU-MAMS联合恒定外磁场与单纯的5-FU-MAMS和游离5-FU相比,IR明显提高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论MAMS可作为安全的药物载体;5-FU-MAMS制备方法和剂型的改变不影响5-FU的抗癌活性;联合恒定外磁场5-FU-MAMS的肿瘤细胞抑制效应显著增强。
目的:研究小干扰RNA(small interfering R N A,s i R N A)沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞中叉头框蛋白C1(fork head box C1,FOXC1)基因对胰腺癌细胞增殖能力的影响及作用机制.方法:以胰腺癌细胞、原发胰腺癌组织为研究对象,实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及组织中的表达情况;将人胰腺癌细胞分为2组:FOXC1s i R N A组(实验组)、N C s i R N A组(阴性对照组),脂质体转染法将FOXC1 si RNA转染入胰腺癌细胞,q RT-PCR、Western blot技术检测胰腺癌细胞FOXC1 m RNA及蛋白表达变化,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,Ed U)细胞增殖法检测各组胰腺癌细胞增殖情况;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测各组胰腺癌细胞的周期分布,Western blot技术分析周期相关蛋白P21、P53、Cyclin D1蛋白表达情况.结果:q RT-PCR结果提示:相比正常胰腺上皮细胞和癌旁胰腺组织,FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及胰腺癌组织中表达较高(P<0.05);q RT-P C R及Westernblo t结果显示FOXC1 si RNA有效沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因的转录和表达,E d U细胞增殖实验提示:沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因表达后,胰腺癌细胞胞的增殖能力明显下降,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);F C M结果显示:沉默了胰腺癌细胞FOXC1基因表达后胰腺癌细胞被阻滞在G0/G1期,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:较阴性对照组,P21、P53表达水平无明显变化,Cyclin D1表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FOXC1 si RNA能够有效沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞FOXC1基因的表达,抑制其增殖,将细胞周期阻滞于G0/G1期,提示FOXC1影响细胞增殖可能是通过调控细胞周期实现的,其机制可能是部分通过调控细胞周期蛋白Cyclin D1的表达而实现.