- 压力灌注对不同程度积水肾损伤的评价被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨急性肾盂内压升高对不同程度积水肾损伤的情况。方法:采用腰大肌包埋法分别建立新西兰大白兔轻度和重度肾积水模型,轻度积水组分为M0、M1、M2和M3组,重度积水组分为S0、S1、S2和S3组,每组6只。对应分别以0,20,60,100mmHg压力进行灌注,48h后取标本分别检测组织中富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)和肾损伤因子-1(Kim-1)的表达情况,并观察组织细胞的微观形态变化。结果:随灌注压力升高,轻度和重度积水肾组织均表现为肾小管细胞坏死的比例升高。轻度积水组经100mmHg灌注后(M3),组织中Cyr 61和Kim-1的表达评分分别为4.50±0.37和4.39±0.35,和对照组(M0)相比均有显著升高(P<0.05),但M1和M2组变化不明显(P>0.05);与对照组(S0)相比,重度积水组经60和100mmHg灌注后(S2和S3),Cyr 61表达评分分别为4.20±0.42和4.58±0.53,Kim-1表达评分分别为4.38±0.32和4.45±0.37,均有显著升高(P<0.05),但S1与S0比较无显著改变(P>0.05)。结论:肾盂灌注压力的升高会导致积水肾缺血损伤,不同程度积水肾耐受灌注压力的大小存在差异。
- 余伟民曹智修姚小兵饶婷袁润李维程帆张孝斌
- 关键词：肾积水肾损伤富含半胱氨酸蛋白61
- 环孢素A对积水肾脏急性压力灌注损伤的保护被引量：2
- 2015年
- 目的 在不同程度肾脏积水的前提下,观察线粒体渗透性转换孔（MPTP）抑制剂环孢素A（CsA）对于急性压力灌注所致损伤的保护作用.方法 健康新西兰大白兔20只,随机分为轻度积水组（M组,n=10）和重度积水组（S组,n=10）,肾脏轻度积水及重度积水模型采用输尿管套扎法构建.M组及S组分为M1、M2、S1、S24个亚组,分别予以60、100、20、60 mmHg（1mmHg=0.133 kPa）压力灌注.灌注前M组及S组均给予CsA灌胃1周.灌注后48 h取标本,检测标本中超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量,JC-1染色检测线粒体膜电位（MMP）的变化.结果 M1、M2、S1、S2各组SOD活力分别为（30.11±2.23）、（28.41 ±2.26）、（44.82±6.61）、（40.31±5.21） U/mg,M1与M2之间SOD活力差异无统计学意义（P＞0.05）,S1与S2之间SOD活力差异无统计学意义（P＞0.05）;MDA的含量分别为（0.61 ±0.17）、（0.60±0.15）、（0.95 ±0.26）、（0.80±0.32） nmol/mg,M1与M2之间MDA含量差异无统计学意义（P＞0.05）,S1与S2之间MDA含量差异无统计学意义（P＞0.05）.JC-1染色橙红色阳性细胞百分比分别为（67.16±9.47）％、（60.75±11.89）％、（41.08 ±4.50）％、（42.36 ±3.44）％.M1与M2比较,S1与S2比较,阳性细胞百分比差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 CsA对于积水肾脏因急性压力灌注所致的损伤有一定的保护作用.在经皮肾镜及输尿管镜治疗结石前给予MPTP抑制剂可有效减轻压力灌注所致损伤.
- 万鸿君姚小兵余伟民程帆李文
- 关键词：肾积水灌注压力线粒体渗透性转换孔
- 急性压力灌注对不同程度肾积水模型兔肾脏的损伤被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨输尿管套扎法建立兔肾积水模型的可行性及急性压力灌注对不同程度积水肾肾脏损伤的影响,为临床经皮肾镜和输尿管镜过程中灌注压力的选择提供依据。方法:健康新西兰大白兔45只,随机分为正常组(N组,n=5)、轻度积水组(M组,n=20)和重度积水组(S组,n=20)3组。轻度积水及重度积水组模型采用套管法构建。轻度积水组与重度积水组分别于结扎后3,7d行彩色多普勒超声检查以判别积水程度。M组和S组随机分为M0-M3和S0-S3 4个压力灌注亚组,M0-M3和S0-S3分别行0,20,60,100mmHg压力灌注,N组行100mmHg压力灌注。术后48h取肾脏标本,免疫组化检测标本中TNF-α及IL-8的表达。结果:输尿管套扎法模型构建成功率达90%,与正常肾脏相比,结扎后3d行彩色多普勒超声检查,M组可见集合系统分离,有少量液性暗区;结扎后7d检查,S组可见集合系统分离明显,肾皮质变薄,液性暗区占据肾脏大部分区域。M组行0,20,60mmHg灌注时IL-8、TNF-α表达量均无明显变化(P>0.05),行100mmHg灌注时IL-8及TNF-α表达量明显增加(P<0.05);S组行0,20mmHg灌注时IL-8、TNF-α表达量均无明显变化(P>0.05),行60,100mmHg灌注时IL-8、TNF-α表达量明显增加(P<0.05);N组行100mmHg灌注时IL-8、TNF-α表达量与M0、S0相比无明显差别(P>0.05)。结论:输尿管套扎法建立兔肾积水模型具有可行性,不同程度积水肾对急性压力灌注的耐受能力不同,高灌注压力更容易对积水程度重的肾脏造成损伤,在经皮肾镜和输尿管镜治疗结石过程中应尽量减少过高压力灌注以保护积水肾脏。
- 姚小兵程帆曹智修余伟民饶婷张孝斌李维
- 关键词：动物模型肾积水灌注压力
- 不同程度积水肾对CO2气腹压的耐受被引量：1
- 2013年
- 目的 观察新西兰大白兔肾脏在轻度和重度积水时对CO2气腹压的耐受能力.方法 套管法建立左侧轻、重度肾积水模型,56只雄性新西兰大白兔随机分为3组：无积水处理组（N组,n=16）、轻度积水组（M组,n=20）、重度积水组（S组,n=20）.N组行6、9、12、15 mm Hg（1 mmHg=0.133 kPa）,M、S组分别行0、6、9、12、15 mmHg气腹加压处理1h.术后24h切取左侧肾脏,检测超氧趋化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量和肾脏组织细胞凋亡指数（AI）.结果 N组行气腹加压时各压力下SOD活力分别为：（17.46±1.17）、（17.40±0.83）、（16.92±1.53）、（12.91 ±1.30） U/mg,15 mmHg组SOD活力较6、9、12 mm Hg组明显降低（P＜0.05）;MDA含量分别为：（0.13±0.03）、（0.14±0.02）、（0.13±0.01）、（0.38±0.04） mmol/g；AI值分别为：（5.23 ±1.05）、（5.51±0.90）、（6.13 ±0.90）、（41.60±3.62）％,15 mmHg组MDA含量和AI值较6、9、12 mm Hg组明显增加；M组SOD活力分别为：（17.17±1.33）、（16.55 ± 1.53）、（16.27±2.02）、（15.98±1.10）、（11.84±0.86） U/mg;MDA含量分别为：（0.15 ±0.01）、（0.15±0.02）、（0.15 ±0.01）、（0.16±0.02）、（0.44±0.04） mmol/g;AI值分别为：（7.83±1.19）、（8.43±1.05）、（8.63±0.70）、（9.60±1.58）、（43.03±4.39）％,S组SOD活力分别为：（16.52 ±0.68）、（16.43±0.87）、（10.54 ±0.59）、（10.26±0.69）、（10.13±0.79）U/mg;MDA含量分别为：（0.18±0.01）、（0.18±0.03）、（0.44±0.06）、（0.46±0.05）、（0.47±0.04） mmol/g; AI值分别为：（10.53±2.05）、（11.68±1.69）、（44.73 ±3.46）、（47.33 ±6.22）、（48.28±2.85）％,M组和S组气腹加压分别到达15 mm Hg和9 mm Hg时SOD活力显著降低（P＜0.05）,MDA含量显著升高（P＜0.05）,AI值升高（P＜0.05）.结论 重度积水肾脏行气腹手术处理时,应尽量减小气腹压力以防止肾脏进一步损伤.
- 李维夏中元孟庆涛曹智修余伟民姚小兵饶婷夏越程帆
- 关键词：肾积水气腹压耐受
- 环孢素A对肾盂灌注下积水肾的保护作用
- 2015年
- 目的观察环孢素A（CsA）对不同程度的积水肾在受到外界压力灌注时的保护作用。方法取48只新西兰大白兔，分为两组，每组24只分别建立轻度（M）和重度（s）肾积水模型，每组再随机分为4个亚组，两组中取12只分别行CsA灌胃，1周后M组分别行60和100mmHg（1mmHg=0．133kPa）灌注，s组分别行20和60mmHg灌注，灌注后48h取肾行肾脏损伤评定，苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织变化，免疫组织化学测中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）表达，Westernblot检测细胞色素C（CytC）和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达，透射电镜下观察。肾组织超微结构改变。结果（1）药物干预组HE染色评分分别为M1’：12．8±3．3；M2’：13．1±4．4；S1’：18．8±3．6；S2’：21．1±1．9，分别与对照组（M1：24．2±5．5；M2：36．5±4．9；s1：39．2±4．8；S2：56．2±4．1）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）透射电镜下可见肾小管细胞线粒体肿胀明显减轻。（3）药物干预组CytC表达分别为M1’：0．44±0．02；M2’：0．45±0．01；S1’：0．71±0．0l；S2’：0．73±0．01，分别与对照组（M1：0．59±0．01；M2：0．78±0．02；S1：0．83±0．01；S2：0．88±0．01）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Caspase-3表达水平分别为M1’：0．43±0．01；M2’：0．49±0．01；S1’：0．74±0．02；S2’：0．75±0．01，分别与对照组（M1：0．71±0．02；M2：0．85±0．02；S1：0．87±0．01；s2：0．98±0．01）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）药物干预组NGAL表达分别为M1’：2．67±0．51；M2’：3．17±0．41；S1’：3．33±0．52；S2’：3．50±0．55，分别与对照组（M1：4．51±0．55；M2：5．50±0．54；S1：5．67±0．81；s2：6．66±0．51）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CsA可减轻积水肾肾盂灌注时的损伤�
- 周本正程帆余伟民姚小兵张孝斌张大虎
- 关键词：肾盂积水环孢素A肾盂灌注肾脏损伤
- 压力灌注对不同程度积水肾线粒体损伤的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 观察急性肾盂内压升高对不同程度积水肾线粒体损伤的影响.方法 采用腰大肌包埋法建立新西兰大白兔轻度和重度肾积水模型,轻度积水组分为M0、M1、M2和M3组,重度积水组分为S0、S1、S2和S3组,对应分别以0、20、60、100 mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）压力进行肾盂灌注,观察肾组织标本线粒体超微结构改变和线粒体膜电位的变化.结果 轻度积水组经100 mmHg灌注后（M3）,线粒体空泡化比例为（66.33 ±4.42）％,JC-1多聚体/单体荧光强度（Q2/Q4）的值为0.36±0.07,和对照组（M0）比较差异有统计学意义（P＜0.05）,但M1和M2组变化不明显（P＞0.05）;与对照组（S0）比较,重度积水组经60、100 mmHg灌注后（S2和S3）,线粒体空泡化比例分别为（85.67±8.61）％和（87.50±5.77）％,Q2/Q4的值分别为0.42±0.07和0.23±0.04,差异有统计学意义（P＜0.05）,但S1与SO比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 肾盂灌注压力的升高会导致线粒体空泡化和膜电位降低,不同程度积水肾对肾盂内压升高的耐受能力存在差异.
- 余伟民姚小兵曹智修饶婷李维程帆
- 关键词：肾积水线粒体损伤线粒体超微结构线粒体膜电位
- Exosome在急性肾脏损伤和肾纤维化的应用前景被引量：1
- 2018年
- 外泌体（exosome）作为细胞间交流的载体，能够传递蛋白质和核酸到受体细胞，其在急性肾损伤（acutekidneyinjury，AKI）和肾脏纤维化的过程中起着一定作用。尿液中eXOSOITIe含有的特定分子能够作为AKI和肾脏纤维化的诊断标志物，各种细胞来源的exosome对AKI和肾脏纤维化具有治疗作用。本文对exosome在AKI和’肾脏纤维化中的诊断价值和治疗前景作一综述。
- 周向军姚小兵袁润余伟民程帆
- 关键词：肾疾病急性病纤维化
- 压力灌注对不同程度积水肾氧化损伤的影响被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨急性肾盂内压升高与不同程度积水肾氧化损伤的关系.方法 采用腰大肌包埋法分别建立新西兰大白兔轻度和重度肾积水模型,轻度积水组分为M0、M1、M2和M3组,重度积水组分为S0、S1、S2和S3组,每组6只.对应分别以0、20、60、100 mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）压力进行灌注,48 h后取标本分别检测组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量,并检测组织细胞凋亡.结果 轻度积水组经100 mmHg灌注后（M3）,组织中SOD和MDA含量分别为（256.9±12.2） U/mg和（0.75±0.03） nmol/mg,细胞凋亡指数为0.66±0.07,和对照组（M0）比较差异有统计学意义（P＜0.05）,但M1和M2组变化不明显（P＞0.05）;与对照组（S0）比较,重度积水组经60、100 mmHg灌注后（S2和S3）,SOD含量分别为（142.0±13.4） U/mg和（138.3±10.2）U/mg,MDA含量分别为（1.01 ±0.01）nmol/mg和（1.03±0.03） nmol/mg,细胞凋亡指数分别为0.64±0.10和0.70±0.07,差异有统计学意义（P＜0.05）,但S1与S0比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 肾盂灌注压力的升高会引起积水肾的氧化损伤,不同程度积水肾对肾盂灌注压力升高的耐受存在差异.
- 敖劲松邱承俊姚小兵余伟民程帆张孝斌
- 关键词：肾积水超氧化物歧化酶丙二醛脱噬作用
- 长链非编码RNA NEAT1调控微小RNA-506/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶对肾癌786-O细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达,以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用,以及对微小RNA-506(microRNA-506,miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。方法:选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织及相应癌旁正常组织临床样本中lncRNA NEAT1的表达水平;使用在线数据库及采用荧光素酶实验验证NEAT1和miR-506以及EZH2和miR-506的靶向关系;采用噻唑蓝(MTT)法,双染法流式细胞术和细胞迁移侵袭(Transwell)实验观察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭水平的改变;采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)法分别测miR-506和EZH2蛋白的表达。组间比较采用t检验。结果:lncRNA NEAT1在肾癌组织中表达水平(4.45±0.31)高于癌旁组织(2.39±0.25),差异有统计学意义(t=8.959,P<0.05)。荧光素酶报告实验结果表明NEAT1序列上有miR-506的结合位点,且EZH2是miR-506的下游靶基因。si-NEAT1组24、48和72 h增殖率[(24.67±3.23)%、(40.82±5.03)%、(56.87±6.12)%]明显低于si-NC组[(62.63±4.35)%、(74.18±6.55)%、(87.45±7.21)%],差异有统计学意义(t=-12.135、-6.997、-5.601,P<0.01)。si-NEAT1组凋亡水平[(23.20±1.92)%]显著高于si-NC组[(9.65±1.34)%],差异有统计学意义(t=10.024,P<0.05)。si-NEAT1组迁移和侵袭数量[(52.35±4.76)、(21.63±2.05)个]显著低于si-NC组[(91.23±7.59)、(42.68±3.98)个],差异有统计学意义(t=-7.517,P<0.05;t=-8.144,P<0.05)。RT-qPCR结果显示,si-NC及si-NEAT1两组的miR-506 mRNA表达量分别为1.00±0.00、3.39±0.26,差异有统计学意义(t=15.922,P<0.05)。si-NEAT1组EZH2蛋白表达水平(0.15±0.02)明显低于si-NC组EZH2蛋白表达水平(0.32±0.03),差异有统计学意义(t=-8.167,P<0.05)。结论:LncRNA NEAT1在肾癌中高表达,其可能通过调控miR-506/EZH2信号途径改
- 柯炜周洪勇胡子好叶清姚小兵宁金卓
- 关键词：肾癌长链非编码RNA微小RNA
- 气腹压对不同程度积水肾的损伤作用
- 2017年
- 目的:研究不同大小的气腹压力对于不同程度的积水肾的损伤作用。方法:采用输尿管套扎法建立左侧轻、重度肾积水模型,54只新西兰大白兔随机分为三组:假手术组(N组,n=18),轻度积水组(M组,n=18),重度积水组(S组,n=18),每组再分为三个亚组,依次给予0,10,15mmHg气腹加压处理1h。术后48h取左侧肾脏,HE染色观察肾小管形态结构,测肾组织内活性氧(ROS),丙二醛(MDA),乳酸(LD)含量,TUNEL检测细胞凋亡,取血清检测血肌酐(Cr),尿素氮(BUN)。结果:对于假手术组和轻度积水组,当压力为15mmHg时,肾损伤明显加重(肾小管结构明显改变,凋亡指数明显增加,ROS,MDA,LD含量明显升高);对于重度积水组,当压力为10mmHg时,肾脏损伤即明显加重。各小组Cr及BUN的差异无统计学意义。结论:重度积水的肾脏更容易受到气腹压造成的进一步损伤,行腹腔镜手术时应适当控制气腹压的大小。
- 赵胜程帆李维饶婷阮远刘路袁润姚小兵
- 关键词：肾积水二氧化碳气腹压
