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甲型副伤寒沙门菌spaO—ompA融合基因构建及其表达产物免疫保护作用: 2012年; 目的构建甲型副伤寒沙门菌spaO—ompA融合基因及其原核表达系统，确定重组表达产物rSpaO—OmpA免疫保护作用。方法采用柔性肽序列连接spaO与ompA基因，构建spaO-ompA人工融合基因及其原核表达系统。采用SDS-PAGE和Bio—Rad凝胶图像分析系统检测目的重组表达产物rSpaO—OmpA表达情况及其产量。采用免疫扩散法、微量肥达和Westernblot法鉴定rSpaO—OmpA抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rSpaO—OmpA对甲型副伤寒沙门菌致死性感染的免疫保护作用，实验中采用重组表达的SpaO（rSpaO）及OmpA（rOmpA）作为对照。结果所构建的spaO-ompA融合基因与spaO或ompA单基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％。所构建的原核表达系统EcoliBk21DE3pET42a-spaO-ompA能高效表达重组融合蛋白rSpaO-OmpA。rSpaO-OmpA能与甲型副伤寒沙门菌全菌抗血清结合并产生阳性杂交信号，免疫家兔后可产生特异性抗体。100汕g或2006xgrSpaO—OmpA对甲型副伤寒沙门菌感染小鼠的免疫保护率分别为66．7％（8／12）和83．3％（10／12），明显高于等量rSpaO及rOmpA（P〈0．05）。rSpaO—OmpA免疫小鼠血清与不同副伤寒沙门菌H抗原的凝集效价为1：5～1：40、与rSpaO和rOmpA及rSpaO—OmpA免疫双扩散效价为1：1～1：16。结论人工融合重组抗原rSpaO—OmpA免疫原性和免疫保护作用较等量rSpaO或rOmpA更强。; 蒋锦琴孙一帆岳文燕严杰阮萍; 关键词：甲型副伤寒沙门菌免疫保护性

甲型副伤寒沙门菌spaO-ompA融合基因构建及其表达产物免疫保护作用: 目的构建甲型副伤寒沙门菌spaO-ompA融合基因及其原核表达系统,确定重组表达产物rSpaO-OmpA免疫保护作用。方法采用柔性肽序列连接spaO与ompA基因,构建spaO-ompA人工融合基因及其原核表达系统。采用...; 蒋锦琴孙一帆岳文燕阮萍严杰; 关键词：甲型副伤寒沙门菌免疫原性免疫保护性; 文献传递

甲副伤寒OmpA-SpaO融合双抗原原核表达产物免疫保护性研究: 目的确定甲型副伤寒朴菌OmpA-SpaO融合双抗原原核表达产物rOmpA-SpaO免疫原性和保护作用,检测甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA、SpaO基冈携带率。方法采用柔性肽序列连接ompA与spaO基因,构建ompA-s...; 蒋锦琴孙一帆孙爱华阮萍严杰; 关键词：甲型副伤寒杆菌免疫原性免疫保护性; 文献传递

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孙一帆

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