孙泽芳
- 作品数：40 被引量：322H指数：12
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人原发性肝癌中p16,p15基因CpG岛甲基化研究被引量：9
- 2002年
- 目的 检测人原发性肝癌中 p16和 p15基因 5’启动子区CpG岛的异常甲基化 ,并分析其与人原发性肝癌发生发展的关系 ,探索其在临床早期基因诊断和治疗中的意义 .方法 用敏感的甲基化特异性PCR检测 2 0例人原发性肝癌患者癌组织、癌旁组织和远癌正常组织中p16 ,p15基因5’CpG岛的甲基化状况 ,统计分析这两个基因 5’CpG岛甲基化与肝癌病理特征的相关性 .结果 2 0例原发性肝癌肝癌组织中 p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 6 5 %(13/2 0 )和 5 0 %(10 /2 0 )异常甲基化 ;癌旁组织中 p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 6 0 %(12例 )和 4 0 %(8例 )异常甲基化 ;远癌正常组织中p16和 p15基因 5’CpG岛分别有 35 %(7例 )和 2 5 %(5例 )异常甲基化 .p16 ,p15基因 5’CpG岛甲基化在癌组织和癌组织旁、癌组织和远癌组织中均有相关性 .两个基因 5’CpG岛异常甲基化与临床病理特征无显著相关性 .结论 p16和 p15基因 5’CpG岛异常甲基化在人原发性肝癌中频率很高 ,可能在肝癌发生发展中扮演了重要角色 ;而且这可能是一个早期事件 ,其临床早期诊断和基因治疗意义均值得进一步深入研究 .
- 刘建余覃扬孙芝琳孙泽芳
- 关键词：肝癌P16基因P15基因CPG岛
- 视网膜母细胞瘤易感基因在人肺癌中的缺失和突变研究
- 2006年
- 目的 研究视网膜母细胞瘤易感基因（Rb基因）在人肺癌中的缺失和突变情况。方法 采用PCR和限制性内切酶分析技术，对20例人肺癌组织DNA样品和3例正常人肺组织DNA样品Rb基因外显子14-16、22-23区域进行分析。结果 2例样品存在外显子14～16区域的缺失。结论 Rb基因在人肺癌，特别是小细胞肺癌中存在缺失，此为肺癌发病机制的研究积累了资料。
- 徐刚孙芝琳覃扬孙泽芳
- 关键词：肺肿瘤突变
- nm23-H1等位基因缺失与人非小细胞肺癌转移相关性研究被引量：27
- 1998年
- 目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因缺失与人非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）转移的关系。方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ技术检测４６例人ＮＳＣＬＣ组织、癌旁组织ｎｍ２３－Ｈ１等位基因缺失情况。结果４６例肺癌组织中１４例（３０．４３％）存在等位基因缺失。在伴有淋巴结转移者ｎｍ２３－Ｈ１等位基因缺失率为６２．５％（１０／１６），而无转移者为１３．３％（４／３０），两组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。ｎｍ２３－Ｈ１等位基因缺失与肺癌原发肿瘤大小、部位、组织学类型、病理分期及患者年龄等均无明显关系（Ｐ＞０．０５）。结论研究结果表明：ｎｍ２３－Ｈ１基因缺失与人ＮＳＣＬＣ转移有密切关系。
- 周清华陈军孙芝琳覃扬孙泽芳刘伦旭王允杨振华
- 关键词：等位基因缺失NM23基因非小细胞肺癌
- 肺癌组织和患者体液中P_(21)^(ras)表达的初步研究
- 1993年
- 作者首次利用水平式板状凝胶电泳分离蛋白质,不经过Western转移电泳,直接用抗P^(ras)_(21)单克隆抗体在凝胶上进行酶联免疫分析,研究了人肺癌组织及患者体液中P^(ras)_(21)的表达情况。9例肺癌中8例有P^(ras)_(21)表达,其中4例明显高于正常肺;18例肺癌患者血清和2例胸水中没有检查到P^(ras)_(21)。
- 林晞舒煦孙泽芳赵建升孙芝琳
- 关键词：P21^RAS肺肿瘤
- 端粒酶基因和bcl-2在肺癌组织和细胞株中的相关性研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株中端粒酶基因和抗凋亡基因bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因在肺癌的发生、发展中的表达及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理 .方法 采用TRAP ,RT PCR及LSAB的方法研究了 38例肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株的端粒酶活性、hTR ,hTERT及bcl 2的表达 .结果 82 .3%的肺癌组织及 3种肺癌细胞株均表达端粒酶阳性 ,而癌旁组织及人胚肺成纤维细胞株全为端粒酶阴性 .38例癌组织中 ,34例表达hTR(89.4 %) ,其中 9例hTR在肿瘤组织的表达比其相应的正常组织高 ,其bcl 2表达也较高 .36例表达hTERT(94 .7%) .而在相应的癌旁组织中 ,34例表达hTR ,但只有 3例表达hTERT(7.8%) ,且表达hTERT的 3例患者其癌旁组织的hTERT表达比其相应肿瘤组织低 .hTERT阳性的癌旁组织其bcl 2表达也高于hTERT阴性的癌旁组织 .肺癌细胞株中均有hTR和hTERT的表达 ,而人胚肺成纤维细胞株只表达hTR .结论 肺癌组织中具有较高的端粒酶活性 ,说明端粒酶在肺癌的发生发展中起着重要的作用 .hTERT的表达在肿瘤组织和正常组织中有显著的差异 (P <0 .0 5 ) .hTR在正常组织和肿瘤组织均有较高的表达 ,bcl 2的表达与端粒酶基因有着较高的相关性 .
- 陈蔚蔚周宏远熊小熊覃扬孙芝玲刘渊周清华孙泽芳
- 关键词：端粒酶基因抗凋亡基因肺癌
- 胰癌组织p15、p16抑癌基因CpG岛甲基化被引量：1
- 2002年
- 目的:检测胰腺癌中p15、p16基因CpG岛的异常甲基化情况,分析其与胰腺癌发生、发展的关系;探索其在临床早期基因诊断和治疗中的意义以及与胰腺癌病理生理特征的相关性.方法:运用甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP),对29例胰腺癌和3例慢性胰腺炎的石蜡组织、2例正常肝组织、以及12例正常成人外周血白细胞DNA的p15、p16抑癌基因启动子区CpG岛甲基化状态进行了检测.结果:对照组p16、p15基因CpG岛甲基化扩增均呈阴性,非甲基化扩增均阳性.胰腺癌中p16、p15基因CpG岛甲基化阳性率分别为37.9%和27.5%,p16、p15基因CpG岛甲基化总检出阳性率为:44.8%.癌组织中同时存在p16、p15基因CpG岛异常甲基化为6例.结论:胰腺癌p15、p16基因CpG岛甲基化是早期事件,可试作为早期基因诊断的分子标志,有可能尝试进行基因治疗.p16、p15基因CpG岛异常甲基化,同患者的病理特征无明显的相关关系.
- 董科李波覃杨李承志刘建余孙芝琳孙泽芳
- 关键词：P15基因抑癌基因CPG岛甲基化
- 检测CK19 mRNA和MUC1 mRNA诊断非小细胞肺癌淋巴结微转移被引量：19
- 2004年
- 目的 探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)淋巴结微转移的基因诊断方法 ,并分析CK19mRNA、MUC1mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法 应用巢式逆转录聚合酶链反应 (nestedRT PCR) ,对 3 1例NSCLC的 119枚淋巴结中的粘蛋白 1(MUC1)mRNA、角蛋白 19(CK19)mRNA表达情况进行检测 ;对照组为 10例肺良性病变患者的 3 5枚淋巴结。结果 3 1例NSCLC患者的 119枚淋巴结中 ,66枚 ( 5 5 .5 %)淋巴结存在CK19mRNA阳性表达 ,65枚 ( 5 4.5 %)存在MUC1mRNA阳性表达 ;肺良性病变患者 3 5枚淋巴结中CK19mRNA和MUC1mRNA表达均为阴性 ,与肺癌组比较均有显著性差异。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT PCR法检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标志物 ,两者联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移。
- 牛中喜周清华孙芝琳孙泽芳朱文王艳萍车国卫秦建军陈晓禾
- 关键词：非小细胞肺癌淋巴结微转移MUC1基因
- 人原发性肝癌中p16基因表达及CpG岛甲基化状态的研究被引量：11
- 2002年
- 目的 进一步探讨人原发性肝癌中 p16基因 m RNA转录水平变化与其基因启动子区 Cp G岛甲基化的关系 ,及其在肝癌发生中的意义。方法 采用狭缝印迹杂交检测 2 0例人原发性肝癌及相应的癌旁、远癌组织及 2例正常人肝组织中 p16基因 m RNA表达水平 ,以甲基化特异性 PCR分析各组织中 p16基因启动子区 Cp G岛的甲基化状况 ,并进行统计分析。结果 2 0例人原发性肝癌中 14例 (70 % ) p16 m RNA水平比远癌组织显著降低 ;13例 (6 5 % )显示 p16基因启动子区 Cp G岛甲基化 ,其中 84 .6 % (11例 )伴 p16 m RNA转录水平降低。结论 人原发性肝癌中存在高频率的 p16基因表达失活 ,其主要机制可能是启动子区 Cp G岛甲基化抑制了基因的转录 ,在人原发性肝癌的发生发展中有重要作用。其临床诊断和治疗意义有待进一步深入研究。
- 刘建余覃扬李波孙芝琳孙泽芳
- 关键词：人肝细胞癌P16基因CPG岛甲基化
- 外源性FHIT基因表达对肺腺癌细胞株A549恶性表型的逆转作用被引量：9
- 2002年
- 目的 探讨 FHIT(fragile histidine triad)基因表达在肺癌细胞增殖、凋亡、成瘤性中的作用。方法 应用脂质体转染法构建能高效表达外源性 FHIT基因的 A5 49- FHIT细胞和作为空载体对照的A5 49- vector细胞 ,裸鼠皮下接种构建肺癌移植瘤动物模型 ,应用逆转录 - PCR、Western杂交、免疫组化、流式细胞计数等技术检测外源性 FHIT基因转录、表达及对肺癌细胞株增殖、凋亡、成瘤性等的影响。结果 A5 49- FHIT细胞的生长曲线、克隆形成率、移植瘤体积和重量均显著低于 A5 49- vector和亲本 A5 49细胞 ;A5 49- FHIT细胞凋亡水平显著高于 A5 49- vector和亲本 A5 49细胞 ;与两个对照组相比 ,A5 49- FHIT细胞G0 / G1 比例显著增高。结论 外源性 FHIT表达基因能够显著抑制肺癌细胞增殖和分裂 ,诱导其凋亡 ,抑制其成瘤性 ,提示 FHIT基因在肺癌中具有抑癌基因的功能。
- 王允周清华覃扬袁淑兰孙芝琳王燕萍陈小禾孙泽芳宋毅杨妍
- 关键词：肺腺癌细胞株A549恶性表型FHIT基因基因表达
- nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌细胞L9981转移表型的分子机制被引量：17
- 2005年
- 背景与目的:nm23-H1基因已被证明是转移抑制基因,转染野生型nm23-H1基因可以逆转肿瘤的恶性转移表型,但是nm23-H1基因抑制或逆转肺癌转移的分子机制却知之甚少,我们在建立转nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1的基础上,进一步探讨nm23-H1基因抑制肺癌转移的分子机制。方法:应用MTT法和改良的Boyden小室法分析转基因前后细胞的体外增殖能力及体外侵袭力的变化,体内实验分析转基因前后细胞在裸鼠体内的成瘤性及肺转移能力的改变,同时应用RT-PCR和Westernblot分别检测各组细胞中转移相关基因β-catenin、E-Cadherin、CD44S、CD44V6、MMP-2、TIMP-1、VEGF、基因mRNA及蛋白表达水平。结果:(1)转基因细胞株L9981-nm23-H1的体外增殖能力[(0%vs.(19.5±2.9)%]、克隆形成能力(10.3±0.7vs.21.7±1.3)及侵袭力显著低于L9981细胞(31.0±3.0vs.151.0±6.3)(P<0.01);(2)nm23-H1基因在裸鼠体内的抑瘤率显著增高(82.6%vs.0%),且转染nm23-H1基因的L9981细胞裸鼠体内移植瘤肺转移显著降低(0%vs.100%)(P<0.01);(3)nm23-H1基因能够上调β-catenin、E-Cadherin、TIMP-1基因mRNA及蛋白表达,下调VEGF、CD44V6和MMP-2基因mRNA及蛋白表达(P<0.01);(4)nm23-H1表达上调CD44S基因mRNA表达(P<0.01),而对其蛋白表达?
- 车国卫周清华朱文王艳萍覃杨刘伦旭陈晓禾孙艺琳孙泽芳
- 关键词：NM23-H1基因转移表型肿瘤转移相关基因
