孙耀飞
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属华山医院泌尿外科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Rs10993994对前列腺癌细胞MSMB基因转录的影响被引量：1
- 2014年
- 背景与目的:全基因组相关联研究发现了染色体10q11区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs10993994与前列腺癌的遗传易感性相关,本研究探讨rs10993994影响前列腺癌发病风险的可能机制,即研究rs10993994对前列腺癌细胞微精液蛋白β(microseminoprotein beta,MSMB)基因转录活性的影响。方法:化学合成MSMB基因的启动子序列,由于位于序列中间的SNP位点rs10993994有2种等位基因(T/C)可能,合成2条启动子MSMB promoter-T和MSMB promoter-C。将2条启动子通过酶切的方法导入荧光素酶报告基因载体(pGL3-basic vectors)中,筛选阳性克隆后,将携带启动子的质粒转染入前列腺癌细胞PC-3和LNCaP中,最后通过荧光检测仪检测重组质粒中启动子的转录活性。结果:成功合成2条启动子序列:MSMB promoter-T和MSMB promoter-C;分别将启动子序列与荧光素酶报告基因载体重组,形成重组质粒pGL3-MSMB promoter-T和pGL3-MSMB promoter-C。在前列腺癌细胞PC-3中,重组质粒MSMB promoter-C组的相对荧光度为2.27±0.39,显著高于重组质粒MSMB promoter-T组(0.57±0.13),差异有统计学意义(P<0.05);在前列腺癌细胞LNCaP中,重组质粒MSMB promoter-C组的相对荧光度为1.70±0.32,显著高于重组质粒MSMB promoter-T组(0.37±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组质粒pGL3-MSMB promoter-C的转录活性强于重组质粒pGL3-MSMB promoter-T的转录活性;rs10993994可以影响到MSMB基因启动子的启动转录活性,rs10993994位点上等位基因胞嘧啶(C)较胸腺嘧啶(T)更能促使MSMB基因转录。
- 孙耀飞郑捷方祖军熊祖泉丁强
- 关键词：启动子前列腺癌基因转录
- PEDF肽段44-mer对前列腺癌细胞PC-3分化作用的研究
- 2010年
- 目的观察色素上皮细胞衍生因子(PEDF)肽段44-mer(57-101)诱导激素非依赖性前列腺癌(PCa)细胞PC-3发生神经内分泌分化(NED),并探讨其对前列腺癌的治疗机理。方法体外合成44-mer并对PC-3的生长进行干预,以采用不同浓度44-mer诱导作为实验组,未用44-mer诱导作为对照组。从形态、标志物两方面证实部分细胞发生NED;采用水溶性四氮唑(WST-1)、流式细胞仪检测诱导后细胞的增殖情况及细胞周期。建立荷瘤裸鼠模型,实验组腹腔注射44-mer,定期测量肿瘤体积,并对标本进行免疫组化染色以检测嗜铬粒素A(ChrA)的表达情况;对照组腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS),并定期测量肿瘤体积。结果实验组PC-3中发生NED形态学改变的细胞所占的比率为18.65%±1.26%,明显高于对照组(3.62%±0.44%)(P<0.01);1、10、100 nmol/L44-mer分别诱导PC-3 3 d后培养液中的ChrA水平分别为(168.97±5.36)、(263.95±5.30)、(325.24±5.74)ng/mL,均高于对照组[(115.97±2.16)ng/mL](P均<0.01);免疫印迹法显示实验组PC-3神经特异性烯醇化酶(NSE)、ChrA的表达升高;实验组G0/G1期的细胞占79.24%±3.24%,明显高于对照组(65.18%±4.53%)(P<0.05);1、10、100 nmol/L44-mer诱导PC-3 6 d后WST-1实验的吸光度值分别为2.05±0.07、1.98±0.06、1.78±0.09,均低于对照组(2.54±0.08,P均<0.01)。与对照组肿瘤体积[(574.70±63.78)mm3]相比,实验组的肿瘤体积明显减小[(222.21±49.51)mm3](P<0.01),且标本中ChrA表达上升。结论 44-mer诱导PC-3发生NED,并抑制其在体内外的增殖。
- 孙耀飞方祖军关明郑捷童仕俊孙传玉
- 关键词：前列腺癌神经内分泌分化色素上皮细胞衍生因子肽段
- 抗毒蕈碱药物治疗膀胱过度活动症的研究进展
- 2010年
- 膀胱过度活动症（Overactive Bladder，OAB）是一种慢性疾病，抗毒蕈碱药物作为主要的治疗手段一直备受关注，关于此类药物的研究主要集中在阐明其作用机制，如何合理用药以及新药的研发。本文将对近几年关于抗毒蕈碱药物研究的现状及进展作一综述。
- 孙耀飞方祖军
- 关键词：膀胱疾病毒蕈碱
- 女性2型糖尿病患者中LUTS患病情况的初步探讨
- 目的：评价女性2型糖尿病患者中LUTS的患病率,并分析致使该人群中出现LUTS的可能因素.方法：对在我院住院的女性2型糖尿病病人行尿流率、残余尿和国际尿失禁咨询委员问卷之女性下尿路症状模块短型(ICIQ-FLUTS)评价...
- 方祖军郑捷孙耀飞丁强
- 关键词：T2DMLUTS女性
