孟庆艳
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:天津科技大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达被引量:1
- 2011年
- 将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX19-Tat-GFP成功地构建并转化。用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况。结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX19-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分。
- 于长燕郑秀朱燕孟庆艳王梦晓高强
- 关键词:信号肽融合基因
- 一种产异丁醇的运动发酵单胞菌基因工程菌及其构建方法
- 本发明涉及产异丁醇的运动发酵单胞菌(Zymomonasmobilis)ATCC10988基因工程菌及其构建方法。本发明克隆得到乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)1.2829中的2-酮异戊酸脱羧酶基因(kiv...
- 高强朱燕孟庆艳潘超强
- 文献传递
- 一种产异丁醇的运动发酵单胞菌基因工程菌及其构建方法
- 本发明涉及产异丁醇的运动发酵单胞菌(<i>Zymomonas?mobilis</i>)?ATCC?10988基因工程菌及其构建方法。本发明克隆得到乳酸乳球菌(<i>Lactococcu...
- 高强朱燕孟庆艳潘超强
- 文献传递
- 产异丁醇关键基因在大肠杆菌中表达的研究被引量:2
- 2012年
- 【目的】改造大肠杆菌缬氨酸合成途径,使其能够代谢合成异丁醇。【方法】将乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)1.2829的2-酮异戊酸脱羧酶基因(kivD)和醇脱氢酶基因(adhA)串联克隆到大肠杆菌DH5α宿主中表达。【结果】经过改造的宿主菌发酵24 h后异丁醇产量为0.12 g/L。酶活测定实验发现,kivD和adhA基因在宿主菌中均得到表达,但由于KivD的低表达量导致宿主菌最终的异丁醇合成能力偏低。通过研究温度和pH对KivD和AdhA酶活的影响,最终选定二者的最适温度为30°C,最适pH为6.5。【结论】通过向宿主菌导入外源异丁醇合成基因能够改造其自身代谢途径,从而合成异丁醇。
- 潘超强高强郑春阳孟庆艳段强冯少龙
- 关键词:醇脱氢酶异丁醇