孟松树
- 作品数：33 被引量：238H指数：11
- 供职机构：扬州大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡传染性喉气管炎病毒DNA疫苗免疫效果观察被引量：39
- 2000年
- 将分别构建的含有鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gB、gC和gD基因的重组真核表达质粒及空载体质粒分组肌肉注射雏鸡 ,攻毒后观察免疫保护效果。结果表明 ,重组质粒诱导了免疫应答 ,免疫保护率为 79% 。
- 孟松树张绍杰童光志
- 关键词：传染性喉气管炎病毒DNA疫苗
- 传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达被引量：24
- 2000年
- 本试验首先用PCR方法扩增出ILTVgB基因 ,将其克隆到质粒pUC1 1 9中 ,并进行了序列分析。将克隆的gB基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中 ,然后 ,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,筛选蓝色的重组病毒 ,并对其进行了 6轮蚀斑纯化。该重组病毒通过PCR方法鉴定证明其基因组中含有完整的鸡传染性喉气管炎gB基因 。
- 张绍杰童光志王柳仇华吉倪建强孟松树于力王玫
- 关键词：重组鸡痘病毒ILTV基因表达
- 表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护性研究
- 将表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因重组鸡痘病毒(rFPV-ILTVgB)经翅皮下注射接种(5×105PFU/羽)六周龄的SPF鸡,免疫后4周以致死剂量鸡传染性喉气管炎病毒王岗强毒株进行喉内接种攻毒。结果该重组鸡痘病...
- 张绍杰童光志孟松树仇华吉王柳王云峰王玫
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒(PrV)糖蛋白gE基因在重组杆状病毒中的表达被引量：6
- 2000年
- 应用PCR方法扩增出 1 .8Kb的伪狂犬病毒糖蛋白gE基因 ,克隆到pUC1 1 9中形成重组质粒pRZE。经测序鉴定后再将gE基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1 392中 ,形成重组质粒pVLgE。将pVLgE与杆状病毒线性DNA(BAC_N_BlueDNA)共转染Sf9昆虫细胞 ,经三轮蚀斑纯化 ,获得重组病毒rpVLgE。通过PCR方法鉴定证明gE基因正确插入到杆状病毒基因组中 ,直接免疫荧光试验和WesternBlot结果表明gE基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中获得高效表达。表达的gE蛋白将作为伪狂犬病强毒和gE基因缺失弱毒疫苗鉴别诊断ELISA方法的抗原 。
- 倪建强张绍杰冉智光仇华吉王柳孟松树王玫童光志
- 关键词：糖蛋白E伪狂犬病PRV杆状病毒
- 传染性法氏囊病病毒DNA疫苗的免疫原性研究被引量：12
- 2002年
- 将传染性法氏囊病病毒弱毒株 (IBDV JD1)和强毒株 (IBDV ZJ2 0 0 0 )的基因组A节段全长cDNA、多聚蛋白 (VP2 /VP4/VP3)和主要宿主保护性抗原 (VP2 )基因 ,分别克隆入两种真核表达载体pCI和 pcDNA3,构建成 12种真核表达质粒。将制备的DNA疫苗以 2 0 0 μg的剂量经腿肌和皮下结合途径首免 14日龄SPF鸡 ,2 8日龄以相同的剂量二免 ,二免后 14d攻击IBDV标准强毒BC6 / 85株。结果表明 ,含A节段或多聚蛋白基因的表达载体均能诱导较高水平的中和抗体并能提供对强毒的免疫保护 ,多聚蛋白基因构建成的DNA疫苗与弱毒苗B87的免疫效果相当 ;编码VP2基因的DNA疫苗仅能诱导很低水平的中和抗体 ,几乎不能提供免疫保护 ;以 pCI为表达载体的免疫效果优于pcDNA3;源于ZJ2 0 0 0株基因构建成的DNA疫苗诱导的免疫反应优于JD1株 ,提示DNA疫苗的免疫效果与VP2蛋白的构象、表达载体的调控元件和毒株差异等因素有关。
- 于涟李建荣黄耀伟孟松树宋厚辉
- 关键词：传染性法氏囊病病毒DNA疫苗免疫原性VP2
- 传染性喉气管炎病毒(ILTV)gI-gE基因的PCR-RFLP分析被引量：1
- 2000年
- 根据 ＵＳＤＡ（美国农业部）标准攻毒株 ＩＬＴＶ ｇＩ－ｇＥ基因的序列，在 ＩＬＴＶ ｇＩ基因、ｇＥ基因及 ｇＩ－ｇＥ基因连接部的上下游分别设计了一对引物。以 ＳＤＳ－蛋白酶 Ｋ法提取的 ８株 ＩＬＴＶ ＤＮＡ为模板，分别用这 ３对引物进行 ＰＣＲ扩增，均获得了与预期片段大小一致的ＤＮＡ片段。然后，用４种限制性内切酶（Ａｖａ Ⅱ、ＨｉｎｆⅠ、ＤｄｅⅠ和ＨａｅⅢ）对所有ＰＣＲ产物进行ＲＦＬＰ分析。结果发现， ＨｉｎｆⅠ和 ＤｄｅｌⅠ可以分别将 ８株 ＩＬＴＶ ｇＥ基因的酶切图谱分为两类， ＨａｅⅢ可将 ８株 ＩＬＴＶ的ｇＩ－ｇＥ基因连接部的酶切图谱分为两类。这表明不同的ＩＬＴＶ毒株的ｇＥ基因变异较大，而ｇＩ基因则相对比较保守。
- 何召庆王云峰张绍杰孟松树童光志黄骏明
- 关键词：传染性喉气管炎病毒
- 鸡传染性喉气管炎病毒王岗株糖蛋白gB基因在重组杆状病毒中的表达
- 将克隆到pUC119中的鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因,通过EcoRI位点再亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,构建成重组杆状病毒转移载体rpVLgB。将rpVLgB转移载体质粒与杆状病毒DNA(Bac-N-B...
- 张绍杰倪健强孟松树王柳仇华吉王云峰童光志
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒重组杆状病毒
- 文献传递
- 我国地方品种萧山鸡白介素-2基因的克隆和分子进化分析
- 鸡白介素细胞2(cIL-2)是新近确定的非哺乳动物类细胞因子。建立了体外诱导鸡IL-2的最佳条件,从ConA激活的脾脏T淋巴细胞中克隆了我国地方品种鸡(浙江萧山鸡)IL-2cDNA。该基因全长737bp,编码143个氨基...
- 李建荣黄耀伟孟松树梁雪芽谢荣辉于涟
- 文献传递
- 人甲状旁腺激素基因的克隆与鉴定被引量：11
- 2000年
- 张伟辉宋纯孟松树赵松宋春芳
- 关键词：PTH克隆甲状旁腺功能低下症基因治疗
- 减毒沙门氏菌介导的小鼠肝炎病毒S1基因DNA疫苗的免疫特性分析被引量：3
- 2007年
- 根据GenBank公开序列自行设计一对引物,通过RT-PCR扩增出小鼠肝炎病毒的全长S1基因,并将其插入真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1。将重组质粒转染COS-7细胞,采用间接免疫荧光检测出S1蛋白的体外表达。将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,构建出运送DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1)。分别以5×108CFU、1×109CFU、2×109CFU剂量的重组菌口服接种6周龄BALB/c小鼠,试验结果表明,重组菌对小鼠具有良好的安全性。以1×109CFU剂量的重组菌口服免疫小鼠,抗体检测结果显示,在二免后两周和三免后两周,重组菌免疫组的血清抗体水平与SL7207(pVAX1)空载体免疫组间分别存在显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01)。在三免后两周重组菌免疫组出现了较高水平的肠黏膜抗体。
- 焦红梅焦新安殷月兰潘志明孟松树王禹蒋金金
- 关键词：小鼠肝炎病毒S1基因减毒沙门氏菌免疫特性
