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EGR1促进前列腺增生上皮细胞系BPH-1的增殖被引量：3: 2013年; 早期生长反应基因1(early growth response gene 1,EGR1)属于锌指结构的转录因子,表达受多种因素调节,其蛋白至少参与对30种以上靶基因的调控.EGR1在前列腺癌中作为癌基因其表达量与肿瘤的恶性程度成正比,而在良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)中其机制和功能尚不明确.EGR1在大鼠和人BPH组织中表达升高,提示EGR1在BPH进程中发挥重要作用.通过构建EGR1表达载体,以及EGR1稳定转染的良性前列腺增生上皮细胞系BPH-1,可见过表达EGR1的BPH-1细胞增殖能力升高.通过转染siRNA将EGR1表达抑制,BPH-1细胞的增殖水平下降.雌激素在BPH疾病进程中发挥重要作用,在BPH-1细胞中,雌二醇(estradiol,E2)能促进EGR1的核迁移,从而激活其转录活性.在EGR1稳定转染的BPH-1细胞系中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)的表达上调,表明EGR1可以调控IGF2的表达.同时发现,E2可上调BPH-1细胞中IGF2的表达,而将EGR1敲除后上调效果消失,说明E2通过EGR1来调节IGF2的表达.E2对EGR1及其靶基因的调节可能是E2参与影响BPH的重要环节.本文为进一步研究E2和EGR1在BPH中作用奠定了基础.; 宁召臣石建党周颖杜小玲张琚; 关键词：早期生长反应基因1 雌二醇良性前列腺增生

携带白蛋白启动子小鼠SCP2基因表达载体的构建: 2011年; 胆汁中胆固醇的过多分泌伴随肝细胞浆内胆固醇的浓度显著增高是形成胆固醇结石的关键因素，其中固醇携带蛋白2（SCP2）是影响肝细胞中游离胆固醇浓度的主要因素。本实验旨在构建携带白蛋白启动子小鼠SCP2基因表达载体。; 贾岩峰崔云峰李东华崔乃强彭雁飞宁召臣张琚; 关键词：基因表达载体白蛋白小鼠胆固醇结石胆固醇浓度肝细胞

雌激素受体辅助抑制因子REA对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响: 2013年; 雌激素在前列腺癌转移中的作用已有报道,但其作用机制尚不清楚.研究了雌激素受体辅助抑制因子REA在前列腺上皮细胞和前列腺组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学功能的影响.发现在前列腺癌细胞和组织中随恶性程度增加REA的表达逐渐增强.划痕愈合实验证实了REA能够明显促进前列腺癌细胞的迁移,而且其促进作用与雌激素和ER存在着协同作用.这些研究结果为揭示雌激素效应及其受体亚型的表达水平在前列腺癌转移中作用机制的探讨奠定了实验基础.; 杜小玲于林宁召臣石建党杨小丽张琚; 关键词：雌激素前列腺癌雌激素受体Β

PGE2对芳香化酶的调节机制及雌激素效应基因EGR-1功能研究: 目的: 越来越多的证据表明，雌激素是影响良性前列腺增生（BenignProstatic Hyperplasia，BPH）和前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)发生发展的重要因素之一。本实验室之前的研究发现，...; 宁召臣; 关键词：雌激素芳香化酶生物学功能

固醇携带蛋白2腺病毒载体的构建与鉴定被引量：1: 2012年; 目的:构建携带白蛋白启动子SCP2基因腺病毒载体,研究其与胆固醇结石形成的关系。方法:(1)利用RT-PCR技术克隆小鼠SCP2基因,在其上游接入白蛋白(ALB)启动子,下游连接绿色荧光报告基因(EGFP),构建穿梭质粒pDC312-ALB-SCP2-IRES2-EGFP;(2)采用Ad Max TM Adenoviru5 Vector系统包装病毒,CsCl法纯化病毒、TCID50法测定滴度;(3)重组腺病毒感染小鼠hepa-1-6细胞,实时定量PCR检测mRNA的表达;Western印迹检测SCP2蛋白表达情况;结果:成功构建携带白蛋白启动子SCP2基因腺病毒载体;当SCP2基因过表达时,CYP7a1基因表达下调,(t=3.97,P<0.05)HMGCR基因基因表达上调,(t=3.23,P<0.05)。结论:当SCP2基因过表达时引起HMGCR、CYP7a1基因转录水平的变化,提示SCP2基因可能通过影响胆固醇和胆汁酸的代谢而参与胆固醇结石的形成。; 贾岩峰崔云峰崔乃强彭雁飞宁召臣张琚; 关键词：腺病毒载体胆固醇结石

类固醇激素受体辅助调节因子ARA55和TGFβ1在前列腺癌细胞中作用分子机制的研究: 2012年; 辅助调节因子是类固醇激素和配体结合后募集的转录调节因子,对类固醇激素受体的转录活性具有上调或下调作用,从而调节细胞的增殖、分化、凋亡等生物学表型.在研究的类固醇受体辅助调节因子中,ARA55的表达水平在前列腺癌细胞系中明显低于非癌细胞系;在前列腺癌组织中表达水平低于癌旁组织.这表明ARA55的表达下调与前列腺癌相关.MTT实验结果表明,ARA55过表达可以抑制DU-145细胞的增殖.实时PCR和ELISA结果显示,ARA55过表达可以上调TGFβ1的表达;而且ARA55对DU-145增殖的抑制作用可以部分被TGFβ1中和抗体阻断,这提示ARA55抑制增殖的作用是部分通过TGFβ1而实现,但可能还有其它途径.ARA55在前列腺癌中低表达;ARA55可上调TGFβ1的表达,ARA55又可通过促进TGFβ1的表达部分抑制前列腺癌细胞系DU-145的增殖.提示ARA55和TGFβ1在前列腺癌中进程中发挥作用.; 杜小玲宁召臣王春雨石建党张琚; 关键词：前列腺雌激素间质细胞

小鼠SCP2基因shRNA重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：3: 2012年; 目的构建小鼠SCP2基因shRNA重组腺病毒载体，进一步研究SCP2基因与胆囊胆固醇结石形成机制。方法（1）两步PCR法合成针对小鼠SCP2基因shRNA，并连接到质粒PDC312上；（2）采用AdMaxTMAdenoviru5Vector系统包装病毒，CsCl法纯化病毒、TCID50法测定滴度；（3）Western印迹检测SCP2蛋白验证重组腺病毒沉默效果，RT—PCR检测重组腺病毒在小鼠hepa-1～6细胞中SCP2、HMGCR、CYP7A1基因mRNA的表达。结果（1）腺病毒载体AdshlRNA和Adsh2RNA对SCP2均有抑制作用，在SCP2mRNA水平，与AdsshRNA组比较，Adsh1RNAtD1—9．056，P〈0．05，Adsh2RNAtD2—7．777，P〈0．05，差异均有统计学意义，蛋白水平与mRNA一致；（2）SCP2基因低表达时，CYP7A1mRNA表达升高，t=10．68，P％0．05，HMGCRmRNA表达下降，t=10．10，P％0．05，差异有统计学意义。结论成功构建小鼠SCP2基因的shRNA重组腺病毒载体。SCP2低表达时可能影响HMGCoA还原酶和CYP7-α1羟化酶的活性，导致胆固醇代谢的变化，从而减少胆固醇结石的形成。; 贾岩峰崔云峰李东华崔乃强彭雁飞宁召臣张琚; 关键词：腺病毒科胆结石基因

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宁召臣