宋钢
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 一种新型重组葡激酶及其制备方法
- 本发明属生物技术领域，具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析，设计了新型葡激酶分子结构。通过PCR定点突...
- 宋后燕宋钢
- 文献传递
- 一种新型重组葡激酶及其制备方法
- 本发明属生物技术领域,具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶(RGD/KGD－Sak)的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析,设计了新型葡激酶分子结构。通过PCR定点突...
- 宋后燕宋钢
- 文献传递
- 重组人纤溶酶原基因的酵母表达、产物纯化及鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的：研究重组人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶结构域（rhPLG-SP）的酵母表达、纯化及理化性质。方法：采用7.5 L发酵罐对巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌rhPLG-SP/GS115进行高密度培养、甲醇诱导表达rhPLG-SP,培养液经三步纯化：超滤、Sephacryl S-100、SP-Sepharose FF,将活性组分透析后冷冻干燥。等点聚焦电泳、HPLC、质谱分别检测rhPLG-SP等电点、纯度和分子量;纤维蛋白平板、肽底物S-2403分别测定rhPLG-SP激活后的纤维蛋白溶解和酰胺水解活性。结果：7.5 L高密度发酵可获得约为400mg/L培液的表达量,经三步纯化后制备的rhPLG-SP纯度大于96%。理化分析显示rhPLG-SP的等电点为7.57.8,分子量：27 877 Da,比活性：23.6U/mg。结论：初步建立了rhPLG-SP酵母工程菌的高密度培养、表达及纯化工艺,所制备半成品活性与血浆提取的PLG相近,具备放大生产和应用的潜力。
- 陈武莫炜张艳玲宋钢宋后燕
- 关键词：巴斯德毕赤酵母纤溶酶原纯化
- 人纤溶酶原kringle区缺失突变体的毕赤酵母表达、产物纯化及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的研究人纤溶酶原kringle区缺失突变体（PLGAK）的毕赤酵母（Pichia pastoris）表达、产物纯化及理化性质鉴定。方法采用7．5L发酵罐对工程菌PLG△K／GS115进行高密度培养、甲醇诱导表达，培液经离心、超滤、离子交换层析、凝胶滤过、透析后冷冻干燥。等电聚焦电泳、HPLC、质谱分别检测PLG△K等电点、纯度和分子量；纤维蛋白平板、肽底物S-2403分别测定PLG△K激活后的纤维蛋白和酰胺水解活性。结果7．5L高密度发酵可获得约为400mg／L培液的表达量，经三步纯化后制备的PLG△K纯度大于96％。理化分析显示PLG△K的等电点为7．5～7．8，分子量：27．787kD，比活性：23．6U／mg。结论初步建立了PLG△K的酵母高密度发酵及纯化工艺，所制备半成品活性与血浆提取的PLG相近，具备放大生产和应用的潜力。
- 陈武莫炜张艳玲宋钢宋后燕
- 关键词：毕赤酵母纤溶酶原缺失突变体纯化
- 人纤溶酶原激活剂模拟肽及其制备方法
- 本发明属生物技术领域，具体涉及一种人纤溶酶原激活剂模拟肽及其制备方法和应用。本发明基于蛋白质分子之间相互作用的关键表位理论，根据链激酶和葡激酶的溶栓作用机制，通过噬菌体随机多肽库表面展示技术，以人纤溶酶原为靶蛋白，经生物...
- 宋后燕张宇杲宋钢
- 文献传递
- 重组葡激酶的蛋白质工程研究
- 重组葡激酶(r-Sak)是一种正在临床试用中的新型溶栓剂.该文运用X射线晶体衍射、计算机辅助分子模拟等方法建立了Sak、Sak·mplg、Sak二聚体的空间结构模型,结合功能信息合理设计新型Sak分子,并利用基因工程和蛋...
- 宋钢
- 关键词：溶栓剂葡激酶蛋白质工程
- 文献传递
