尹美珺
- 作品数：26 被引量：53H指数：5
- 供职机构：北京大学深圳医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金深圳市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新生小鼠睾丸组织异体异位移植物中精子的生精功能初探
- 目的:探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植后所生成精子的受精能力。方法:以仅有原始生精细胞的新生小鼠睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体进行异体异位移植;并在8周后取出移植物,采用形态学染色和电镜技术对曲细精管及其中的生精细胞...
- 张芳婷于洁蔡志明房家智万汇涓叶静尹美珺
- 文献传递
- 受体激素水平对未成熟睾丸移植物中生精细胞的生长发育影响被引量：1
- 2009年
- 目的采用已建立的未成熟睾丸组织异体异位移植模型,研究受体小鼠激素水平变化对未成熟睾丸组织移植物生长发育的影响。方法以免疫缺陷小鼠为受体,将新生1～2d龄昆明小鼠睾丸移植到受体小鼠背部皮下。在移植后不同阶段取出移植物,进行组织形态学观察,分析移植物中生精细胞的发育情况,同时采用放射免疫分析法检测受体动物血清中睾酮(T)、促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平,并以同龄正常昆明小鼠作对照。结果受体小鼠血清中LH水平没有明显波动,而T和FSH浓度在移植的前8周呈逐渐上升趋势,从9周以后开始下降,且显著低于正常受体内睾酮和FSH浓度,与组织学中所观察到的生精上皮受损程度的增加是同步的。结论以上结果提示,应注意获取移植物中精子的最佳时间。对于小鼠来说,从新生小鼠睾丸移植物中获取精子的最佳时间是术后5～8周。
- 吴夏枫于洁尹美珺祝玉琴万汇涓张芳婷
- 关键词：激素类睾丸生精细胞
- 小鼠睾丸移植物中3种生精阶段特异性基因的表达被引量：5
- 2007年
- 目的采用逆转录-聚合酶链反应,探讨新生小鼠睾丸组织移植到裸鼠体内后,3种阶段特异性基因,缺失型无精子基因(Dazl)、磷酸甘油激酶2(Pgk2)和鱼精蛋白-2(Prm2)在不同发育阶段移植物中的表达情况。方法将180只出生1～2d昆明小鼠睾丸移植到60只7～12周去势雄性免疫缺陷小鼠背部;在移植后不同时间段(分为3d、1周～8周和12周10个组)取出移植物,对在发育不同阶段表达的3种基因出现的时间及表达情况进行分析测定,并与相应各年龄段正常小鼠睾丸中的基因表达相比较。同时进行组织形态学观察,对比各种基因出现的时间与小鼠睾丸发育周期的吻合性。结果在10个时间段取出的移植物中,所测定的3种基因表达趋势与在正常昆明小鼠睾丸中所见基本相同,并与小鼠发育周期基本吻合。结论新生小鼠睾丸组织移植到免疫缺陷小鼠体内后,生精细胞的发育在形态学和几种受试基因出现的时间上与在正常小鼠中表现均相似。从而对该睾丸组织移植模型用于生精细胞异体异位生长发育研究及基因调控机制研究的可行性提供了进一步的理论依据。
- 于洁蔡志明龙霞万汇涓叶静张芳婷尹美珺房家智
- 关键词：免疫缺陷小鼠
- 精原细胞体外增殖分化在辅助生育技术中的应用
- 于洁蔡志明房家智张芳婷叶静万汇涓尹美珺龙霞桂耀庭
- 该研究采用自制的睾丸组织营养液为生精细胞提供体外生长的微环境，使未成熟的生精细胞成功分化为精子细胞。采用免疫缺陷动物作为孵化器，使小鼠未成熟睾丸组织在异体异位成功发育、完成生精过程，并对移植物组织中的基因表达情况进行探讨...
- 关键词：
- 关键词：辅助生育
- 小鼠精原细胞体外分化为精子细胞的研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨在辅以外源生殖激素混合培养的小鼠睾丸细胞中，精原细胞向精子细胞的转化。方法采用7～8d龄小鼠睾丸组织，以组合酶消化法制备睾丸细胞，在含重组卵泡刺激素（r-FSH）和睾酮的培养基中进行体外培养；定期观察细胞的生长和形态变化；用分子生物学和流式细胞技术对生长各阶段细胞进行分析。结果培养5d即可观察到形态与大小类似于圆形精子细胞，7d后可见带有鞭毛与变形的精子细胞；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）结果显示，培养前细胞的睾丸特异蛋白激酶（TESK1）与鱼精蛋白2（Prm2）mRNA表达阴性，培养9与17d细胞TESK1与Prm2 mRNA表达均阳性；DNA倍体分析显示，培养5d细胞有单倍体峰出现，并随培养天数增加而增加。结论在体外混合培养的小鼠睾丸细胞中加入外源生殖激素可以使精原细胞转化为精子细胞。
- 叶静于洁龙霞张芳婷万汇涓尹美珺房家智蔡志明
- 关键词：精原细胞精子细胞单倍体鞭毛
- 睾丸组织异体异位移植生成成熟精子的动物模型建立被引量：9
- 2004年
- 目的：采用免疫缺陷小鼠作为孵化器，建立小鼠睾丸组织异体异位移植生成精子的实验模型。方法：以新生小鼠睾丸组织为供体，免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植；采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase pol-ymerase chain reaction，RT-PCR)对移植物中睾丸特异蛋白激酶(testis-specific protein kinase 1，TESK1)mRNA 表达进行检测，并应用组织形态学分析法对生精细胞的发育作进一步的验证。结果：分子生物学及组织学观察显示，移植物组织不仅可像正常小鼠睾丸组织一样表达 TESK1 mRNA，并且富含与正常成年小鼠睾丸组织中类似的精曲小管结构以及各级生精细胞和精子。结论：移植后的生精细胞可在异体异位继续发育生长，完成整个生精过程，最终发育精曲小管及成熟精子。
- 于洁叶静张芳婷万汇涓尹美珺房家智桂耀庭蔡志明
- 关键词：睾丸组织精子生精细胞异位移植动物模型建立反转录
- 人脐血细胞移植对高血糖模型小鼠的治疗作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨尾静脉移植人脐血细胞对糖尿病模型小鼠血糖的影响。方法选择60只昆明小白鼠,随机抽取5只作为对照组,其余55只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病鼠模型。成模后将小鼠随机分成移植组(26只)和糖尿病组(12只)。将分离的人脐血单个核细胞于对数增长期用PKH26标记后,以2×106/ml经尾静脉注射入移植组小鼠体内。于注射后第4天和第14天观察3组小鼠的血糖和胰岛素水平,并用流式细胞仪和荧光显微镜观察PKH26标记的人脐血单个核细胞在体内的分布。结果人脐血单个核细胞植入第4天,移植组小鼠血糖和胰岛素水平与糖尿病组、对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);移植第14天移植组小鼠血糖水平及胰岛素水平与糖尿病组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测发现移植第4天的糖尿病小鼠的胰、脾、肝、骨髓组织内均可见PKH26+细胞,而移植第14天上述各部位未发现PKH26+细胞,荧光显微镜观察上述部位的冷冻切片结果也支持这一结果。结论将人脐血细胞移植到未用免疫抑制剂的糖尿病小鼠体内可存活,并可以在一定时间内降低糖尿病小鼠的血糖水平。
- 张芳婷万汇涓叶静房家智尹美珺黄春桥于洁
- 关键词：脐血干细胞移植血糖
- 受体性别及完整性对睾丸组织移植物发育的影响被引量：7
- 2007年
- 目的以免疫缺陷小鼠为受体,探讨受体的性别及完整性对未成熟睾丸组织移植物生长发育的影响。方法将作为受体的免疫缺陷小鼠分为4组:雄性正常组、雄性去势组、雌性正常组和雌性去势组。移植供体组织均为新生1～2d的昆明小鼠睾丸,移植部位为受体背部皮下。移植7周后取材,计算移植物的回收率并称重,对各组移植物中生精小管结构和生精细胞的组成情况以及生精细胞的染色体进行观察分析。结果移植7周后,从4组受体中获得的移植物体积和重量与移植前相比均有明显增加。染色体观察显示,所有4组移植物中生精细胞染色体数量均为正常2倍体(40条)和单倍体(20条);HE染色结果显示,所有4组受体取出的移植物中均发现带有长形精子的生精小管,其中雄性正常组、雄性去势组、雌性正常组和雌性去势组分别有1、5、1和3只受体中观察到含有长形精子的生精小管。结论新生昆明小鼠睾丸组织分别移植到去势的、未去势的雄性和雌性免疫缺陷小鼠背部7周后,未成熟的生精细胞均可发育成为长形精子。
- 于洁房家智万汇涓张芳婷尹美珺
- 关键词：免疫缺陷小鼠
- 观察副肿瘤神经综合征患者抗Hu抗体对培养胎鼠神经细胞N-cadherin的表达及意义
- 2011年
- 目的观察副肿瘤神经综合征(PNS)患者自身抗体(抗Hu抗体)对胎鼠培养神经细胞的直接影响及N-cadherin的表达,探讨PNS免疫学的发病机制。方法实验组抗Hu抗体阳性PNS患者血清IgG、对照组血清IgG添加到由胎儿鼠脑分离出的培养神经细胞,观察细胞的变化,通过免疫组化观察N-cadherin的表达。结果实验组添加抗Hu抗体阳性IgG的培养神经细胞可见细胞互相融合,突起出现粗而长相互连接的形态变化,免疫组化发现大量N-cadherin的表达;而对照组未看到上述细胞形态的变化,免疫组化也未发现N-cadherin的表达;各组均未发现凋亡的神经细胞。结论抗Hu抗体可能通过诱导N-cadherin的表达,或者在抗Hu抗体IgG片段中存在着另外的某种物质,从而促进神经细胞聚集及突起的增粗伸长,因而影响了神经细胞的正常功能。这种效应推测抗Hu抗体不是直接与对应抗原发生了免疫反应引起发病,而可能是在血清抗体IgG片段中存在着抗体以外的致病因子参与了PNS的发病过程。
- 丁欣赵雷姜志茹王汐于洁尹美珺
- 关键词：副肿瘤综合征培养神经细胞
- 小鼠睾丸组织移植物二次移植后的生长发育研究被引量：3
- 2009年
- 目的通过将第一次移植后的移植物进行再移植,探讨二次移植的睾丸组织生长发育情况,为今后采用睾丸组织裸鼠移植模型探讨性成熟期较长动物(包括人类)睾丸组织的体外成熟提供实验依据。方法将1～2d龄昆明小鼠睾丸组织植入去势裸鼠背部,于移植后2周取出移植物,并将其立即移植到另一只去势裸鼠背部,并在二次移植4周后取出移植物,制作HE染色切片,在光镜下观察二次移植后睾丸组织的生长发育情况;同时采用检测鱼精蛋白-2 mRNA的方法对二次移植物的生长发育程度进行鉴定。结果移植2周后的小鼠睾丸组织再次移植后,仍可观察到移植物中的血管组织再生以及生精小管的继续发育:二次植入的44块组织经4周生长发育后收集到22个二次移植物,回收率为50%;在仅含有精原细胞和精母细胞的移植物二次移植后收集到的移植物中,观察到了圆形精子细胞甚至长形精子细胞,并在所有的二次移植物中检测到鱼精蛋白-2 mRNA的表达。结论新生小鼠睾丸组织移植物转移到另一只受体中后可继续存活并生长发育。
- 于洁尹美珺万汇涓龙霞张芳婷徐安平吴夏枫房家智
- 关键词：睾丸
