平芮巾
- 作品数：19 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 圣路易斯脑炎病毒样颗粒的真核表达、纯化与鉴定
- 2011年
- 目的 利用293T细胞表达、纯化圣路易斯脑炎病毒样颗粒（Virus like particles,VLPs）,为研制圣路易斯脑炎病毒免疫诊断试剂奠定基础.方法 构建含圣路易斯脑炎病毒PrM和E基因的重组质粒pcDNA5/FRT-SJME,瞬时转染293T细胞,表达并纯化重组蛋白,通过透射电镜、间接免疫荧光试验、Western-Blot和ELISA对其进行鉴定.结果 表达的重组蛋白形成50 nm的球型颗粒,能与抗圣路易斯脑炎病毒抗体产生特异性反应,与部分黄病毒属阳性血清发生交叉反应.结论 已成功在哺乳动物细胞中表达并纯化了圣路易斯脑炎病毒样颗粒,其具有良好的抗原性和完整的颗粒形态,为进一步研制圣路易斯脑炎病毒感染的免疫诊断试剂奠定了基础.
- 郭雪刑福彬咸庆杰王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾胡孔新
- 关键词：脑炎病毒荧光抗体技术酶联免疫吸附测定
- 快速检测日本脑炎病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立被引量：5
- 2009年
- [目的]建立一种能快速区分、简便诊断日本脑炎病毒的胶体金标记免疫层析试纸条方法，并对其进行评价。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，并标记日本脑炎病毒的NS1的抗体，制成免疫层析检测试纸条。对试纸条进行特异性和敏感性评价，并对三带喙库蚊进行模拟添加日本脑炎病毒检测。[结果]用三带喙库蚊研磨悬液上清、正常的昆虫细胞液进行测试，呈阴性反应；检测日本脑炎病毒的灵敏度均为1×10^5pfu／ml，对三带喙库蚊添加日本脑炎病毒进行检测也取得同样结果，并在10～15min即可得到结果。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测日本脑炎病毒的胶体金免疫层析方法，为进一步大规模应用奠定了基础。
- 杨鹏飞米超平芮巾张丽萍王静张乐胡孔新
- 关键词：日本脑炎病毒胶体金试纸条免疫层析法
- 基于症候群监测初步建立我国口岸入境人员传染病监测网络及其2009—2011年监测结果分析被引量：14
- 2011年
- 目的了解我国入境人群发热症候群和腹泻症候群的病原谱构成数据,促进我国入境传染病网络实验室监测网络技术平台建立和完善。方法通过口岸体温监测、医学巡查、主动申报、健康体检等手段,于2009年5月—2011年3月间,联合9个直属检验检疫局所属口岸建立监测哨点并对筛选出的入境发热及腹泻人员进行样本采集、统一病原谱检测及数据分析方法。结果 9个哨点口岸共采集来自包括5大洲36个国家及地区的1878例样本,其中,阳性样本数为964例,检测出20种阳性病原体,总病原检出率为51.33%。发热伴呼吸道症候群、腹泻症候群和其他症候群阳性检出率进行比较,差异有统计学意义;采集样本中季节性甲型流感病毒、乙型流感病毒和2009甲型H1N1流感各年龄组阳性样本率进行比较,差异有统计学意义,三者的阳性样本25-年龄组最高,60岁以上人群的阳性样本数较低;9个哨点口岸阳性样本检出率进行比较,差异有统计学意义;中国籍和外籍入境人员样本流感病毒与其他病毒检出率进行比较,差异有统计学意义。结论通过统一的传染病样本监测方法,初步建立我国入境口岸传染病监测网络技术平台。
- 胡孔新平芮巾刘胜牙师永霞莫秋华张建明张琦侯咏郭文秀朱京京王汉华孙肖红马雪征杨宇杨鹏飞张丽萍王宝麟
- 关键词：传染病监测网络症候群
- 应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法被引量：20
- 2012年
- 目的应用双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)技术建立同时检测日本脑炎病毒(JapaneseEncephalitisVirus,JEV)、黄热病毒(YellowFeverVirus,YFV)、西尼罗病毒(WestNileVirus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)和登革病毒(Dengue virus,DV)5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法。方法利用Primer Premier5.0软件设计5种病毒的特异性DPO引物,对引物浓度、Mg2+浓度和退火温度进行优化,测定多重RT-PCR反应的特异性和敏感性。结果应用DPO引物技术建立的多重RT-PCR方法可特异性扩增JEV、YFV、WNV、SLEV和DV的142 bp、293 bp、377 bp、630 bp和521 bp基因片段,灵敏度分别为5 000 PFU/ml、4 500 PFU/ml、2.3×105copies/μl、2.6×104copies/μl和1.37×104copies/μl,蚊虫模拟添加实验未发生非特异反应。结论应用DPO引物技术建立的针对5种蚊媒病毒的多重RT-PCR检测方法有良好的敏感性和特异性,可以同时对JEV、YFV、WNV、SLEV和DV进行检测。
- 徐焕洲平芮巾季汝武王琳杨鹏飞张丽萍岳启安胡孔新
- 关键词：多重RT-PCR日本脑炎病毒黄热病毒西尼罗病毒
- 哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
- 咸庆杰姜宝芹郭雪王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾岳启安胡孔新
- 关键词：西尼罗病毒293T细胞病毒样颗粒间接免疫荧光试验
- 一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽
- 本发明公开了一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽，该合成多肽的序列为：CVKNGTYDYPQYSEEARLNREEIS。本发明多肽合成过程简单快速，而且所得到的多肽偶联抗原就有较广泛的保护作用。对于亚单位疫苗的研制，...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 一种用于特异性检测新型H1N1流感病毒的合成多肽
- 本发明公开了一种用于快速检测新型H1N1流感病毒的特异性合成多肽，其序列为：CKYVKSTKLRLATGLRNVPS。本发明特异性合成多肽具有抗原制备简单，不存在生物安全问题，且比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强，检...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 表面活性剂处理炭疽杆菌的原子力显微镜研究
- 2009年
- 利用AFM观察经表面活性剂处理的炭疽杆菌繁殖体形态,研究不同表面活性剂对细菌的作用。用同一浓度的非离子型表面活性剂NP-40、Span-20、Span-80、Igepal CA-210、Igepal CA-520、Igepal CA-630,对完整的炭疽杆菌菌株进行处理,经AFM成像,观察不同表面活性剂对菌体形态的破坏程度。结果不同的表面活性剂对菌体破坏程度不一,但菌体形态均被破坏,表面形态变得不规则,菌体内部物质不均匀分布。表面活性剂作用后的炭疽杆菌微观形貌与正常菌体相比,因表面活性剂亲水亲油平衡值(HLB)不同而不同,随着HLB值的增加,菌体的破坏程度和表面粗糙度也在增加。本实验为研究炭疽杆菌对不同试剂的抗性提供了形态学方面的基础,也为不同表面活性剂作为消毒剂方面的研究提供了形态学基础,可提供一种较为温和的细菌裂解条件。
- 张丽萍张乐平芮巾杨鹏飞胡孔新岳启安
- 关键词：原子力显微镜炭疽杆菌表面活性剂
- 利用原子力显微镜进行生物标记检测的方法
- 本发明公开了利用原子力显微镜进行生物标记检测的方法，具体为：采用现有技术的方法制备用于标记的硬质颗粒材料；将样品载体玻片经过洗涤液超声洗涤后，再经过多聚赖氨酸处理；制备用硬质颗粒材料标记的生物样品片；将样品片固定到样品贴...
- 胡孔新张丽萍平芮巾
- 文献传递
- 快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立被引量：4
- 2010年
- [目的]建立一种能快速区分、简便诊断西尼罗病毒感染的胶体金免疫层析试纸条方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记西尼罗病毒NS1蛋白,采用双抗原夹心法制备胶体金免疫层析试纸条,对试纸条进行特异性和敏感性评价。[结果]该试纸条可在15min之内完成检测;在敏感性上,该试纸条对阳性血清的检测较美国Focus公司商品化的ELISA试剂盒检测低1个滴度;对89份阴性血清进行检测,试纸条检出9份阳性,ELISA试剂盒检出3份阳性,两种检测的符合率为86.52%,特异性为89.89%。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测西尼罗病毒的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础。
- 王彦芳姜宝芹邢福彬杨鹏飞张丽萍平芮巾咸庆杰胡孔新岳启安
- 关键词：西尼罗病毒胶体金试纸条免疫层析法
