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张南

作品数:13 被引量:14H指数:4
供职机构:第二军医大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划上海市基础研究重大(重点)项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 1篇学位论文

领域

  • 10篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 8篇乙型
  • 8篇小鼠
  • 8篇基因
  • 8篇肝炎
  • 8篇病毒
  • 7篇转基因
  • 6篇肝炎病毒
  • 5篇乙型肝炎
  • 4篇蛋白
  • 4篇乙型肝炎病毒
  • 4篇转基因小鼠
  • 4篇TGN
  • 4篇C57
  • 3篇全基因组
  • 3篇细胞
  • 3篇基因组
  • 2篇生物学
  • 2篇生物学特性
  • 2篇鼠肝
  • 2篇小鼠肝

机构

  • 13篇第二军医大学
  • 5篇郑州大学
  • 1篇宁夏医学院

作者

  • 13篇张南
  • 11篇胡以平
  • 8篇巴月
  • 8篇李建秀
  • 8篇訾晓渊
  • 7篇姚玉成
  • 7篇熊俊
  • 6篇张树忠
  • 6篇李文林
  • 6篇王新民
  • 4篇马凤云
  • 3篇田棣
  • 3篇朱海英
  • 3篇金彩霞
  • 3篇朱吉
  • 2篇黄洁
  • 2篇叶煦亭
  • 1篇丛文铭
  • 1篇何金
  • 1篇刘惠敏

传媒

  • 6篇第二军医大学...
  • 3篇癌变.畸变....
  • 1篇第五届国际转...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 3篇2006
  • 8篇2005
13 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
胰十二指肠同源盒基因-1逆转录病毒表达载体的构建及其在肝干细胞中的稳定表达
2006年
目的:通过克隆胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1),构建表达PDX-1的逆转录病毒表达载体和稳定表达PDX-1的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs),以研究肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。方法:通过PCR方法克隆PDX-1基因全长,将其构建到pMSCVpuro逆转录病毒载体中获得pMSCV PDX-1 puro载体。将该载体导入Phoenix包装细胞系,进而采用乒乓转染的方法感染包装细胞PT67,获得高滴度稳定产毒的PT67细胞系。结果:成功构建了pMSCV PDX-1 puro载体,并转染PT67细胞。利用PT67细胞系产生的病毒上清可以高效的感染体外培养的肝干细胞LEPCs,获得稳定表达PDX-1基因的LEPCs(LEPCs PDX-1)。结论:PDX-1逆转录病毒表达载体的成功构建和稳定表达PDX-1的肝干细胞系的获得为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化奠定了基础。
金彩霞李文林朱吉田棣张南胡以平
关键词:逆转录病毒科干细胞
HBV转基因在C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU3小鼠基因组中的整合分析被引量:4
2005年
目的:分析HBV转基因在乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系基因组中的整合特征.方法:以F6~F17代乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、Southern印迹和DNA测序的方法,分析HBV转基因在该品系转基因小鼠基因组中的整合特征.结果:PCR分析显示,F6~F17代乙肝转基因小鼠基因组中均已稳定整合了相同拷贝数的HBV转基因,整合的HBV DNA可通过生殖系在世代间稳定遗传.整合在转基因小鼠基因组中的HBV DNA含有HBVpres、s、c、x基因,Southern印迹证实HBV转基因含有全长HBV基因组DNA,DNA测序结果表明,该品系转基因小鼠所整合的转基因为adr亚型的HBV DNA.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠基因组中均整合有adr亚型的全长HBV基因组DNA,从DNA水平证实该转基因小鼠品系已具备了乙肝实验动物模型的基本条件.
訾晓渊张南巴月张树忠姚玉成熊俊李建秀王新民胡以平
关键词:病毒乙型肝炎转基因
HBV病毒蛋白在C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠中的表达被引量:4
2005年
目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和组织中病毒蛋白的表达及其特征.方法:以138只F6~F17代C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系的转基因小鼠为研究对象,采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法分析病毒蛋白在转基因小鼠中的表达.结果:转基因小鼠血清中HBsAg和HBeAg的阳性率分别为55.18%和25.00%,血清中HBsAg的出现时间多在3个月龄之前(占93.33%),且持续时间在9个月以上(占95.56%),个体之间具有一定差异.转基因小鼠肝组织中至少可检测到一种病毒蛋白,HBsAg、HBcAg和X蛋白的检出率分别为85.82%、58.24%和49.61%.HBsAg分布于肝细胞质中,HBcAg和X蛋白既可分布于肝细胞核中,也可分布干肝细胞质中.HBsAg的表达具有细胞特异性(门管区周围的肝细胞)和组织特异性(肝和肾),X蛋白除在肝脏和肾脏中表达外,还可在脑组织中表达.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和肝肾等组织中有病毒蛋白的表达,病毒蛋白的分布具有组织细胞特异性和个体差异.
訾晓渊巴月熊俊张树忠姚玉成张南李建秀王新民马凤云叶煦亭丛文铭胡以平
关键词:肝炎病毒乙型小鼠病毒蛋白质类
C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达模式分析
2005年
目的:分析C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠的月龄、性别和遗传背景与其血清和肝组织中HBsAg表达模式的关系.方法:采用血清ELISA检测和免疫组织化学的方法检测转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达,统计学方法分析转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达与小鼠的月龄、性别、遗传背景的相关性.结果:转基因小鼠在出生后1~3个月时,血清中HBsAg的表达较低或甚至不表达,8个月龄左右时最高,此后逐渐降低,但肝组织中HBsAg的表达相对稳定在较高水平,能真实反映转基因小鼠中HBsAg的表达.雄性小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达量高于雌性小鼠(P<0.05).转基因小鼠与C57BL/6品系、DAB品系和129s品系正常小鼠交配后的子代,其血清和肝组织中HBsAg表达量均未发生变化.血清阳性的小鼠中肝组织HBsAg阳性率为94.05%,两者呈正相关关系(r=0.257,P<0.01).结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU'3号'品系转基因小鼠血清和肝组织中HBsAg的表达具有发育调节和性别差异.
訾晓渊熊俊张南张树忠巴月姚玉成李建秀王新民马凤云胡以平
关键词:小鼠转基因HBSAG
C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU转基因小鼠肝脏的组织病理学观察被引量:4
2005年
目的:研究乙型肝炎转基因小鼠品系C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏的组织学及免疫病理学特征。方法:以168只SPF级乙肝转基因小鼠及15只正常C57BL/6小鼠为研究对象,取肝组织连续切片,常规H E染色,并选取20 例有明显单个核细胞肝内浸润的肝标本,免疫组化原位鉴定白细胞分化抗原的肝内分布。结果:37.5%的转基因小鼠肝脏出现人慢性轻度乙型肝炎样的病理改变,病变率随月龄增大显著增高;32.7%有更轻微的非特异性炎症反应;肝内浸润的单个核细胞多数为CD3+、CD4+细胞,未发现CD57+、CD8+细胞浸润。结论:乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU肝脏可出现不同程度的病理改变,与人慢性轻度乙肝组织学相类似。
徐军訾晓渊余宏宇何金刘惠敏姚玉成李建秀张南巴月胡以平
关键词:乙型小鼠转基因病理学
HBV preS2-S DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答
2005年
目的:构建HBV表面抗原preS2 S 基因表达质粒,并探讨其在小鼠体内的表达及诱导体液免疫应答的能力。方法:采用PCR方法,以PBR322 HBV2.0(adr亚型)质粒DNA为模板获得HBV preS2 S 基因,并将其重组进入pcDNA3.0表达载体中,转染7721细胞系进行稳定表达;以此重组质粒免疫小鼠,ELISA方法检测免疫小鼠抗HBs抗体浓度。结果:构建了HBV preS2 S 基因的表达质粒pcDNAS2 S,该表达质粒可在7721 细胞中稳定高效表达;免疫接种小鼠2 周后抗HBs抗体浓度明显升高,接种后第4周布比卡因处理组小鼠抗HBs抗体的浓度达到峰值161.4 mIU/ml,布比卡因非处理组第5周抗HBs抗体的浓度可达133.7 mIU/ml。结论:所构建的pcDNAS2 S表达质粒能有效表达并诱导小鼠体液免疫应答。
巴月訾晓渊张南熊俊张树忠李文林李建秀吴逸明胡以平
关键词:肝炎病毒乙型抗体生成
乙肝病毒X蛋白诱导HeLa细胞和转基因小鼠肝细胞凋亡的研究被引量:4
2007年
背景与目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白在细胞凋亡中的作用。材料与方法:采用基因重组技术构建乙型肝炎病毒x基因的真核表达载体pcDNA3-HBx。脂质体FuGE NE6转染HeLa细胞,并用蛋白印迹检测pcDNA3-HBx在HeLa细胞中的表达。流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:成功构建了可在真核细胞中稳定表达X蛋白的HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。稳定转染pcDNA3-HBx DNA的HeLa-Xs细胞的凋亡率为9.8%,较空白HeLa细胞的凋亡率(0.4%)以及对照细胞HeLa-Vs细胞的凋亡率(1.3%)高;两只转基因小鼠肝细胞的细胞凋亡率分别为54.4%和40.4%,较正常小鼠肝细胞的细胞凋亡率(6.8%)明显增高。结论:X蛋白可在体外和体内诱导细胞凋亡。
张南訾晓渊熊俊姚玉成李文林巴月朱海英李建秀王新民胡以平
关键词:乙型肝炎病毒X蛋白转基因小鼠
乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠病毒蛋白表达模式的研究
本课题通过对我们实验室建立的全基因组乙肝转基因小鼠C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU“3号”品系在不同发育阶段的病毒转录水平、病毒蛋白表达水平、肝脏病理学变化和体液免疫对肝细胞损伤作用的研究,得出以下结论:该品...
张南
关键词:乙型肝炎病毒转基因技术蛋白表达病理学
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胰十二指肠同源盒基因-1启动子在肝干细胞分化研究中的应用
2006年
背景与目的利用报告基因监测肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。材料与方法通过PCR从小鼠基因组中克隆胰十二指肠同源盒基因-1(Pancreaticduodenalhomeobox-1,PDX-1)启动子片段,构建PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体(pPDX-1EGFP),并利用报告载体标记的肝原始细胞系(Liverepithelialprogenitorcells,LEPCs)观察肝干细胞向胰腺细胞的转分化潜能。结果获得PDX-1启动子调控的绿色荧光蛋白报告载体及报告载体标记的LEPCs。结论pPDX-1EGFP报告载体的成功构建为研究LEPCs向胰腺细胞的转分化提供了简捷的分子工具。
金彩霞李文林朱吉张南田棣胡以平
关键词:肝干细胞转分化绿色荧光蛋白
Hes1基因诱导小鼠肝原始细胞分化为胆管上皮细胞(英文)被引量:1
2008年
背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs),应用RT_PCR和Real-timePCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β,肝细胞分子标志物GS、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCs细胞系荧光强度的变化。结果:成功构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1。RT-PCR和Real_timePCR检测均表明胆管细胞分子标志CK19、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强。结论:初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子。
田棣李文林攸璞金彩霞朱吉张南胡以平
关键词:HES1分化胆管上皮细胞
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