张巨源
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因及其应用
- 本发明公开了一种鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因、该基因的克隆方法及其应用。本发明鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，所编码的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明...
- 陈雯莉汪方奎支遥王莉张巨源
- 影响PVDF膜对蛋白吸附效率的主要因素被引量：2
- 2015年
- 通过结合有抗原的PVDF膜进行亲和纯化是小规模快速获取特异性抗体的一种重要手段。该方法的关键步骤之一是将抗原蛋白有效地吸附到PVDF膜上。尽管人们广泛使用PVDF膜亲和纯化抗体,但对影响PVDF膜吸附抗原蛋白的因素至今仍缺乏系统研究。以BSA为模型蛋白,检测在不同蛋白浓度、不同孵育时间、不同溶质溶液和不同pH值的情况下,PVDF膜吸附蛋白的效率。当蛋白溶液为PBS时,1cm2 PVDF膜与2mg·mL-1 BSA溶液孵育1h可达到其最大吸附率。常见的蛋白质缓冲液组分对PVDF膜的蛋白吸附率影响不一。其中,咪唑、Tris-HCl、NaCl、KCl在广泛的浓度范围内对PVDF膜吸附蛋白没有明显影响,而较高浓度的SDS、Triton-X 100、Tween-20、乙二醇、甘油、盐酸胍、尿素等可显著降低PVDF膜对蛋白的吸附效率,在pH为6.5~9.5的Tris-HCl中,随着pH的增高而吸附效率降低。
- 袁玉琦张巨源王莉陈雯莉
- 关键词：PVDF膜蛋白吸附
- 鱼腥蓝细菌PCC 7120中可控降解系统的构建
- 2018年
- 鱼腥蓝细菌PCC 7120中已有较为成熟的诱导表达系统,但缺乏可控的蛋白降解系统。本研究基于Mesoplasma florum中的Lon蛋白酶(mf-Lon),在蓝细菌中建立可诱导的蛋白降解系统,并通过该系统对关键基因编码产物进行可控降解以研究其生理功能。结果发现降解系统并无预期作用,需进一步改进。
- 王静张巨源王莉陈雯莉
- 关键词：RNASE
- 培养基中几种重要营养元素对Anabaena sp.strain PCC 7120及Synechocystis sp.strain PCC 6803生长的影响被引量：6
- 2016年
- 配制KNO3、KHCO3、NaHCO3、FeNa2-EDTA及Na2S2O3营养盐培养液,并按一定浓度添加至液体或固体培养基中,获得含有不同营养素、不同浓度的液体及固体培养基,检测无机氮(NO-3)、无机碳(HCO-3)、Fe及Na2S2O3对集胞蓝细菌Synechocystis sp.strain PCC 6803和鱼腥蓝细菌Anabaenasp.strain PCC 7120细胞生长的影响。结果显示,集胞蓝细菌Synechocystis sp.strain PCC 6803在10mmol/L硝酸盐生长较好,鱼腥蓝细菌Anabaena sp.strain PCC 7120在2mmol/L硝酸盐生长较好。不同浓度KHCO3及NaHCO3都会对蓝细菌的生长产生影响,可能是因为盐离子发挥了主要作用。此外,2种蓝细菌在10mmol/L Na2S2O3中生长较好,不同浓度的铁盐对蓝细菌的生长产生较大影响,在10μmol/L铁盐中生长最佳。
- 高良春张巨源王莉陈雯莉
- 关键词：蓝细菌培养基营养元素
- 甲醛固定对GFP发光特性的影响被引量：1
- 2015年
- 绿色荧光蛋白(GFP)能够作为报告分子对活体细胞中特定基因的时空表达进行实时追踪,因此广泛应用于生物学研究领域。在用GFP对细胞活动进行追踪的实验中,常有无法在取样后及时对样品进行荧光观察的情况,此时需要先将样品进行固定以便对其进行观测。然而,不恰当的细胞固定方法会导致胞内GFP荧光信号强度减弱、位置改变等后果。甲醛是最常用的细胞固定剂,也常被用于固定表达GFP蛋白的细胞样品。但对甲醛固定GFP样品的报道多是针对于真核细胞,且固定效果也存在较大差异。文章系统地探索了甲醛浓度、固定时间、固定缓冲液种类对两种细菌(E.coli及鱼腥蓝细菌Anabaena PCC7120)胞内GFP信号的影响。结果显示,较低浓度(≤1%)的甲醛处理2h后,细胞的荧光强度在1d后仍可保持80%以上,胞内荧光点无弥散现象发生。具有相近pH的几种常见缓冲液对荧光强度的影响无显著差异。随着甲醛浓度的增加、固定时间的延长、溶液pH的增加(中性至偏碱性),细胞中的荧光强度会逐渐降低。
- 刘娣张巨源陈雯莉王莉
- 关键词：甲醛固定
- 鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因及其应用
- 本发明公开了一种鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因、该基因的克隆方法及其应用。本发明鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，所编码的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明...
- 陈雯莉汪方奎支遥王莉张巨源
- 文献传递
- 鱼腥蓝细菌PCC 7120异形胞的分离被引量：1
- 2016年
- 鱼腥蓝细菌PCC 7120是一种光合自养型丝状蓝细菌。缺氮条件下,菌丝上5%-10%的营养细胞分化为异形胞,发挥固氮作用。异形胞是研究生物固氮和细胞分化的理想材料。为研究异形胞生理功能及其发育过程中的基因表达变化,需要从菌丝中分离高质量的异形胞。用2mg/mL溶菌酶与0.1%Triton X-100同时处理菌丝30min,得到了完整性好、纯度高的异形胞。
- 樊贵安张巨源陈雯莉王莉
- 关键词：异形胞
- 蓝细菌基因组比较分析：异形胞发育进化及3’，5’-二磷酸核苷酸酶HalA的功能研究
- 蓝细菌是地球上最为古老的物种之一。一些丝状蓝细菌在缺氮环境中，菌丝体上有部分细胞会分化成专门执行固氮功能的异形胞(heterocyst)。化石证据和地质学证据表明，异形胞大约出现在24亿年前，是地球上已知的最早出现的细胞...
- 张巨源
- 关键词：蓝细菌基因组比较异形胞
- 文献传递
- Synechocystis sp.strain PCC 6803定量PCR模板制备方法的改进被引量：2
- 2016年
- 以Synechocystis sp.strain PCC 6803为实验菌株,设计改良制备定量PCR模板的方法;同时,对Synechocystis sp.strain PCC 6803总RNA的Trizol抽提法进行优化。结果显示,利用改良方法抽提得到的RNA结构更完整;同时,利用改良方法制备的模板可以用于后续定量PCR实验;其中,只有高表达量基因适用于半定量PCR,低表达量基因则需要实时荧光定量PCR检测。
- 阳桂丹张巨源陈雯莉
- 关键词：定量PCRPCC6803
