张文治
- 作品数：116 被引量：421H指数：10
- 供职机构：天津市神经病学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 体外定向诱导人骨髓基质细胞分化为神经元样细胞三种方法的比较
- 2003年
- 目的观察比较不同的体外定向诱导培养方法对人骨髓基质细胞(骨髓间充质干细胞)分化为神经元样细胞的影响。方法分离、扩增培养人骨髓基质细胞,分别采用人重组纤维母细胞生长因子(FGF-2)和人重组脑源性神经营养因子(BDNF)、2-巯基乙醇(2-ME)以及硫代甘油(TG)等3种不同的诱导剂,诱导骨髓基质细胞分化为神经元样细胞。用神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学方法对已分化的神经元样细胞进行鉴定和分化率分析。结果经3种诱导剂诱导的人骨髓基质细胞均出现神经元样细胞的分化,胞体呈神经元状,伸出较长轴突样和树突样突起且有分支。免疫组化鉴定显示,诱导分化后的神经元样细胞NSE染色呈阳性,GFAP免疫组化染色均呈阴性,其中FGF-2+BDNF诱导组神经元样细胞分化率为(68.220±5.743)%;2-ME诱导组为(50.700±3.374)%;TG诱导组为(32.240±3.800)%,3组之间差异具有显著性意义(P<0.05)。结论人骨髓基质细胞能够在诱导剂的诱导下发挥横向分化能力,3种体外诱导培养方法均可诱导人骨髓基质细胞分化为神经元样细胞。
- 张文治苏心秦进喜
- 关键词：成纤维细胞生长因子骨髓细胞神经组织蛋白质类
- 脑缺血再灌注损伤大鼠尾静脉移植脐带间充质干细胞的安全性被引量：5
- 2012年
- 背景:尾静脉移植干细胞穿过血脑屏障到达宿主脑损伤区域内的具体机制尚不明确。目的:观察尾静脉移植人脐带间充质干细胞治疗脑缺血再灌注损伤大鼠的效果及安全性,并探讨其作用机制。方法:通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法获取人脐带间充质干细胞并以BrdU标记。Sprague-Dawley大鼠以改良线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,移植A组在造模后第7天、移植B组在造模后第14天通过尾静脉移植人脐带间充质干细胞,模型组不做处理。结果与结论:①移植后7,14,28,35,42,49,56d,2个移植组mNSS评分低于模型组(P<0.05)。移植后7,14,28,35,42,49d,移植A组mNSS评分低于B组(P<0.05)。模型组在造模后第35天、移植A组在第42天、移植B组在第49天时mNSS评分进入平台期。②2个移植组大鼠脑组织未见到CD11b、MPO单染阳性细胞,可见Brdu+Nestin、Brdu+MAP-2、Brdu+GFAP、Brdu+FⅧ,Brdu+VEGF双染阳性细胞。结果表明人脐带间充质干细胞经尾静脉途径移植可以在宿主脑内存活,通过生成神经元样和神经胶质样细胞、促进新生血管形成并分泌神经营养因子等因素促进大鼠神经功能恢复,且未发现明显免疫排斥反应及异常分化细胞,具有较高的安全性。
- 张培培刘慧纯阎晓玲王世民孔繁明张文治
- 关键词：尾静脉细胞移植人脐带间充质干细胞脑缺血
- EGF和FGF-2促神经干细胞增殖与分化研究被引量：5
- 2002年
- 目的 建立人胚胎大脑神经干细胞的分离培养方法并观察在不同诱导因子作用下细胞分化的生物学特性。方法 将经培养的人胚胎大脑神经干细胞分为4组,在不同培养液中培养、分化:(1)DMEM/F-12标准培养液组;(2)标准培养液+表皮生长因子(EGF)组;(3)标准培养液+碱性成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)组;(4)标准培养液+表皮生长因子+碱性成纤维细胞生长因子-组。用定量RT-PCR方法及免疫组织化学染色方法鉴定神经干细胞的原始特性、端粒酶活性以及不同诱导因子对神经干细胞分化特性的影响。结果 于培养第6d,标准培养液中的脑细胞死亡;而在加入EGF和FGF-2的培养液中则形成神经干细胞球体,而且增殖细胞核抗原染色和神经干细胞巢蛋白表达均呈阳性反应;其端粒酶活性为63％,低于瘤细胞而高于正常脑组织。神经干细胞分化后经胶质纤维酸性蛋白、神经微丝、突触素、微管相关蛋白-2及神经细胞核抗原染色显示,分化的神经元最高值达(18±2.5)％。不同诱导因子对不同传代的细胞球体内神经干细胞的促增殖作用差异有显著性意义(均P<0.05)。结论 EGF和EGF-2均具有促进神经干细胞存活、增殖和分化的作用。
- 张文治苏心秦进喜孔繁明王新平只达石
- 关键词：EGFFGF-2神经干细胞细胞分化神经损伤
- 大鼠成体干细胞食管下段移植的实验研究被引量：6
- 2006年
- 目的研究成体干细胞注射至食管下段的可行性,探索利用成体干细胞[骨骼肌卫星细胞(SC)和骨髓间充质干细胞(MSC)]移植治疗胃食管反流病(GERD))的新方法。方法选取体质量 160～240 g的Wistar大鼠,雌雄各半,不同实验组分别于体外培养并扩增骨骼肌SC或MSC, 5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记后,经腹腔将大鼠自体骨骼肌SC悬液植入食管下段肌层;MSC悬液植入同种异体大鼠食管下段肌层。1周和4周后分批处死动物,取食管下段组织并使用组织学方法评价植入细胞生长分化情况。结果 BrdU的细胞标记率接近100％。接受干细胞移植的大鼠生长良好。干细胞移植后第1周和第4周,SC组和MSC组大鼠食管下段均可见大量分化为骨骼肌细胞的 BrdU阳性细胞,SC组第4周较第1周BrdU阳性细胞核数显著增多(P<0．01)。MSC组第4周较第1周 BrdU阳性细胞核计数增多,但差异无统计学意义(P>0．05)。SC组与MSC组比较,第1周BrdU阳性细胞核数差异无统计学意义(P>0．05),第4周SC组较MSC组显著增多(P<0．05)。注射局部未见炎症反应,与对照组病理学分析无差异。结论成体干细胞移植至大鼠食管下段安全、可行,能在食管下段长期存活并分化为骨骼肌。骨骼肌SC或MSC移植可能成为治疗GERD的新方法。
- 陈鑫王邦茂曹晓沧张文治苏心
- 关键词：食管卫星细胞间充质干细胞
- 诱导成人骨髓基质细胞成为神经干细胞及其分化的实验研究被引量：20
- 2002年
- 目的 体外诱导成人骨髓基质细胞 (BMSCs)转化为神经干细胞 (NSCs)进而分化为神经元和胶质细胞。方法 以含有碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)或表皮生长因子 (EGF)加 b FGF或 b FGF、EGF加全反式维甲酸 (ATRA)的培养液培养 BMSCs,进行显微镜观察 ,纤维连接蛋白 (fibronectin)、I型胶原 (collagen )和神经上皮干细胞蛋白 (nestin)免疫组织化学染色和神经元特异烯醇化酶 (NSE) ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫荧光染色。结果 经诱导物诱导 72 h后 ,fibronectin和 collagen I免疫阳性细胞减少。nestin免疫阳性细胞增多。 7d后 ,其又减少。同时 NSE和 GFAP免疫阳性细胞增多。细胞分化后 ,NSE阳性细胞最多占细胞总数的 2 4 .76 %±2 .72 % ,同时 GFAP阳性细胞占细胞总数的 36 .5 8%± 3.2 6 %。结论 EGF、b FGF、ATRA及适宜的培养液可使BMSCs定向 ,转化为 NSCs,进而分化为神经元和胶质细胞。
- 张卉王纪佐孙红宇张文治
- 关键词：骨髓基质细胞神经分化神经干细胞神经系统损伤
- 血管抑制素对血管内皮细胞系ECV-304的抑制作用
- 2002年
- 目的 观察血管抑制素 (Angiostatin)对血管内皮细胞系ECV 3 0 4的抑制作用。 方法 利用MTT法分析结果 ,实验分为 :1 .将血管抑制素与细胞同时加入 ;2 .先接种细胞 ,培养 2 4h后再加血管抑制素。结果 血管抑制素对ECV 3 0 4的抑制作用呈典型的量效关系。结论 血管抑制素对血管内皮细胞有显著的抑制作用。
- 苏心张文治
- 关键词：血管抑制素血管内皮细胞系MTT法ECV-304肿瘤
- 人参养荣汤改善老龄鼠小肠绒毛形态的作用研究被引量：5
- 2001年
- 目的 观察人参养荣汤对老龄小鼠小肠绒毛形态的作用。方法 选用 SAM- P/8快速老化鼠 ,观察小肠粘膜形态学变化及人参养荣汤对肠粘膜老化样改变的治疗作用。结果 SAM- P/8老化鼠 ～ 正常型绒毛比率有所减少 ,上皮细胞脱落再生加剧 ;肠绒毛萎缩 ,肠吸收面积显著性减少。灌胃人参养荣汤后可改善肠绒毛形态 ,提高绒毛面积 ,减缓肠上皮细胞异常的脱落再生。结论 人参养荣汤通过气血双补改善肠粘膜形态 。
- 宋巧梅谢肄聪王峥张文治苏心秦进喜唐方
- 关键词：人参养荣汤小肠绒毛动物实验抗老化
- 骨髓间充质干细胞治疗脑梗死的研究进展被引量：2
- 2007年
- 研究发现，骨髓间充质干细胞在适宜条件下可分化为神经元样细胞，并对脑梗死后神经功能缺损有明显的改善作用。文章就骨髓间充质干细胞的生物学特性、作用机制、存在的问题及其在脑梗死应用方面的研究进展做了综述。
- 张向群王新平张文治
- 关键词：骨髓间充质干细胞脑梗死
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导向神经元分化被引量：21
- 2005年
- 目的 探讨大鼠中胚层来源的骨髓间充质干细胞(MSCs),在诱导因子的诱导下体外向神经元方向分化的能力。方法 贴壁法分离的MSCs,用NIM诱导,相差显微镜观察细胞形态变化,神经元特异抗体NeuN,MAP2,NSE免疫组化染色鉴定转化情况。结果 在诱导后30～40min即开始形态变化,形成神经元样的细胞,免疫组化染色神经元样细胞表达NeuN(50.83%±3.43%),NSE(59.83%±9.24%)和MAP2(45.17%±8.42%)。结论 MSCs在体外诱导下可以分化为神经元样的细胞,表明它是有别于一般成体干细胞的多能干细胞。
- 王宁杨树源张文治赵钧铭秦进喜
- 关键词：神经元体外诱导免疫组化染色分化NSE
- 叶酸对体外胎鼠神经干细胞增殖分化的影响被引量：9
- 2007年
- 目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法采用无血清悬浮培养方法分离培养NSCs,光镜下观察不同时间点各组NSCs形态变化,并采用MTT法、生长曲线法检测叶酸对细胞增殖和功能的影响。培养6天后用含5%胎牛血清的培养基进行分化培养,于分化第7天用免疫荧光技术做Nestin/BrdU双标染色,共聚焦显微镜下观察,每组随机选择8个非重叠视野,计数做统计处理。结果MTT结果显示,两叶酸干预组NSCs增殖较对照组快(P<0.05),分化后免疫荧光双标试验中,两叶酸干预组NSCs增殖率高于正常对照组,且差异有显著性(P<0.05)。结论叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进NSCs的生长与分化。
- 姬长珍黄国伟张文治苏心
- 关键词：叶酸神经干细胞体外NESTINBRDU
