张文锋
- 作品数：12 被引量：33H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高强度聚焦超声不完全消融对体外培养肝癌细胞的影响被引量：8
- 2015年
- 目的通过高强度聚焦超声不完全消融筛选残留肝癌细胞,探讨其生物学行为改变及对血管形成的影响。方法在声功率5 W下,获得高强度聚焦超声辐照肝癌细胞的温度-时间关系,在某一温度下筛选出高强度聚焦超声不完全消融最佳肝癌细胞亚系并继续培养获得稳定子代。细胞活性实验检测细胞增殖率及热耐受性;划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测迁移和侵袭能力;观察内皮细胞管腔形成的变化。结果随着高强度聚焦超声照射时间增加,温度增加,细胞死亡率增加,在48℃及以上温度肝癌SMMC7721细胞基本全部死亡,而47℃筛选出的SMMC7721肝癌细胞亚系增殖率、热耐受性较正常肝癌细胞增强(P<0.05),运动能力、侵袭能力无明显变化(P>0.05);并能促进内皮细胞增殖、迁移和管腔形成(P<0.05)。结论高强度聚焦超声能够杀灭肿瘤细胞,然而高强度聚焦超声不完全消融会促使肝癌细胞生物学行为转变并能促进血管形成。
- 张映林陈蛟吴涯昆张文锋周世骥李生伟
- 关键词：肝癌高强度聚焦超声血管形成
- 慢性胰腺炎致胰周假性动脉瘤诊疗的研究进展
- 2023年
- 胰周假性动脉瘤是指胰腺周围各种原因引起的假性动脉瘤,而慢性胰腺炎为该疾病的常见病因。胰周假性动脉瘤发病率低,患者会因为无法及时准确诊断而延误治疗,导致该疾病的总体致死率极高。目前,暂无针对胰周假性动脉瘤的临床指南或专家共识。经腹部增强计算机断层扫描确诊后,及时地进行介入栓塞治疗,预后较好。但罕有特殊部位血管或特殊人群的胰周假性动脉瘤诊疗的详细总结。该文对胰周假性动脉瘤患者的诊疗进展进行了综述。
- 牛珺纬张文锋曾尤松李生伟
- 关键词：慢性胰腺炎假性动脉瘤介入治疗
- Kupffer细胞在非酒精性脂肪肝病发生机制中的作用
- 2013年
- 非酒精性脂肪性肝病是与胰岛素抵抗和遗传易感相关的代谢性肝脏损伤,其发生机制主要与依附于肝脏血窦周围的Kupffer细胞介导的炎症反应密切相关。Kupffer细胞在非酒精性脂肪性肝病发生发展过程中的主要作用:内毒素与结合激活jun激酶/转录因子-κB信号传导途径;游离脂肪酸、游离胆固醇晶体通过Toll受体4或者转录因子-κB调节因子激活转录因子-κB;氧化应激和内质网应激反应磷酸化激活jun激酶;肝细胞脂肪变性导致机体的固有免疫和细胞因子等不平衡。
- 张文锋吴传新龚建平
- 关键词：NAFLDKUPFFER细胞信号传导通路
- PI3K/AKT通路和S1PR2在急性梗阻性胆管炎诱导大鼠全身炎症反应中的作用
- 2019年
- 目的研究急性梗阻性胆管炎(AOC)大鼠模型中外周血单个核细胞(PBMCs)中磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/AKT通路和鞘氨醇-1-磷酸受体2(S1PR2)的激活情况以及其对大鼠全身炎症反应的影响。方法①体外实验:分离和培养清洁级大鼠PBMCs,然后将其分为磷酸盐缓冲溶液对照组、单独PI3K抑制剂LY294002处理组、脂多糖处理组和脂多糖+LY294002处理组4组,收集各组细胞的上清液和总蛋白,检测细胞上清液中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平以及细胞中PI3K、AKT磷酸化水平和S1PR2蛋白的变化。②体内实验:60只清洁级SD大鼠被随机分为假手术组、单独PI3K抑制剂LY294002处理组、AOC模型组及AOC模型+LY294002处理组4组,记录大鼠存活情况,检测大鼠血清中肝功能丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平及血清中TNF-α和IL-6的水平以及大鼠PBMCs中PI3K、AKT磷酸化水平和S1PR2蛋白的变化。结果①体外实验结果:脂多糖+LY294002处理组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平均明显低于脂多糖处理组(P<0.050),PI3K、AKT磷酸化水平和S1PR2的蛋白水平亦明显低于脂多糖处理组(P<0.050)。②体内实验结果:AOC模型+LY294002处理组大鼠的生存率高于AOC模型组,血清中肝功能ALT、AST、TBIL和炎性因子TNF-α和IL-6水平均明显低于AOC模型组(P<0.050),PI3K和AKT磷酸化水平及S1PR2蛋白表达水平也明显低于AOC模型组(P<0.050)。结论抑制AOC模型大鼠中PBMCs中PI3K/AKT通路的活化,可降低S1PR2的表达,且能抑制AOC诱导的大鼠全身炎症反应。
- 余伍勇张文锋程瑶龚建平
- 关键词：急性梗阻性胆管炎外周血单个核细胞
- Kupffer细胞在肝移植后缺血再灌注损伤的作用及研究现状被引量：4
- 2015年
- 缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)是肝脏手术过程中常见的并发症之一,也是肝移植后肝脏主要发生的病理生理过程。肝移植后IRI主要包括肝脏局部缺血性损伤和炎症介导的再灌注损伤两个相互关联的过程。缺氧以及再灌注过程中缺少生物刺激因子使得再灌注组织缺乏氧供被认为是这两个不同阶段主要损伤机制,并相互促进缺血及再灌注损伤的发展。Kupffer细胞(kupffer cells,KCs)是肝脏常驻巨噬细胞,被认为在缺血期由病原体相关分子受体激活的,通过不同的信号传导通路产生氧化应激和促炎因子如肿瘤坏死因α、白介素1β,白介素12等发挥作用。KCs是调节肝脏缺血再灌注损伤机制中固有免疫和适应性免疫交叉作用网络的关键因素。
- 张博李敏张文锋
- 关键词：缺血再灌注损伤氧化应激KUPFFER细胞肝移植
- 携带miRNA质粒的新型聚乙烯亚胺纳米凝胶抑制大鼠Kupffer细胞核因子κB的表达
- 2015年
- 目的用新型聚乙烯亚胺纳米凝胶(PEI-NP)携带小RNA(miRNA)质粒沉默大鼠Kupffer细胞(KC)核因子κB(NF-κB)的表达。方法凝胶电泳检测PEI-NP装载miRNA质粒的容量;PEI-NP/miRNA质粒转染RAW264.7细胞后分别采用CCK-8法检测细胞毒性,annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡和转染率,实时定量PCR(qRT-PCR)检测RAW264.7细胞NF-κB mRNA水平,Western blot法检测RAW264.7细胞NF-κB蛋白水平,透射电镜观察阳离子聚合物在RAW264.7细胞和肝组织KC内的分布;免疫组织化学技术检测KC内NF-κB的表达。结果 PEI-NP/miRNA质粒质量比为20∶1时载荷率接近100%,体外转染RAW264.7细胞48 h,转染率为(33.63±1.94)%。与对照组相比,PEI-NP/miRNA转染的RAW264.7细胞NF-κB蛋白含量显著降低,透射电镜观察到RAW264.7细胞内有大量PEI-NP。肝脏组织透射电镜只在KC内观察到PEI-NP分布;与对照组相比,免疫组织化学染色结果显示,KC内NF-κB蛋白水平明显降低。结论 PEI-NP携带miRNA质粒能成功转染体外培养的巨噬细胞和体内肝脏KC并沉默NF-κB的表达。
- 张文锋郭世朋龚建平
- 关键词：KUPFFER细胞MICRORNA核因子ΚB
- 苦龙胆酯苷对热消融不全的残存肝癌干细胞的影响及机制初探
- 2023年
- 目的探讨苦龙胆酯苷(Amarogentin)在热消融不全的残存肝癌细胞对肝癌干细胞的影响及其作用机制。方法水浴法建立HepG2肝癌细胞热消融不全的残存模型,流式细胞术检测细胞中CD133阳性细胞比例,qRT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞中CD133的mRNA和蛋白的表达水平。分别用低、中和高剂量的苦龙胆酯苷处理上述HepG2细胞24 h后,流式细胞术分别检测细胞中CD133阳性肝癌细胞比例、肝癌细胞的增殖率和凋亡率,qRT-PCR和蛋白印记法检测肝癌细胞中CD133、TBC1D15和p53的mRNA和蛋白的表达水平。结果随培养时间的延长,热消融不全的残存肝癌细胞中CD133阳性细胞比例、CD133和TBC1D15 mRNA和蛋白的表达水平显著提高,而p53磷酸化水平显著下降。苦龙胆酯苷处理后,热消融不全的残存肝癌细胞中CD133阳性细胞比例、细胞增殖率以及肿瘤干细胞相关分子CD133和TBC1D15的mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);凋亡率和p53磷酸化水平提高(均P<0.05)。结论苦龙胆酯苷可降低热消融不全的残存肝癌干细胞的比例和肿瘤细胞的增殖,促进细胞的凋亡,这可能与其提高肝癌干细胞p53磷酸化和抑制TBC1D15蛋白相关。
- 刘彦秦凡博龚建平张文锋
- 关键词：肝癌干细胞P53
- 外周循环CK18及A-FABP联合诊断NAFLD的研究现状
- 2014年
- 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是与胰岛素抵抗和遗传易感因素相关的代谢性肝脏损伤疾病，疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相关肝硬化和肝细胞癌［1］。NAFLD的发生机制主要是“双重打击”学说。“第一次打击”为高糖和高脂饮食使血液中游离脂肪酸增加，肝细胞内毒素及脂质累积，使机体产生胰岛素抵抗作用。“第二次打击”是依附于肝脏血窦的巨噬细胞（Kupffer细胞）等受到过多的脂毒性和内毒素性刺激，产生一系列的炎症反应，促进肝细胞脂肪变性、纤维化等不可逆转的病变。目前NAFLD不仅仅在西方及日本、韩国发达国家中的发病率较高，并且随着国内城市居民生活条件的日益提高，高热量、高脂肪饮食习惯使 NAFLD已成为国内城市居民面临的新型慢性肝脏疾病之一［2］。一方面，NAFLD预防知识的普及程度远远不如其他慢性肝脏疾病，很难引起人们对 NAFLD的重视；另一方面，由于目前诊断 NAFLD的临床方法准确性及灵敏性欠佳，使得临床对 NAFLD的诊断水平偏低。因此，定期身体检查以及尽早准确的诊断，对 NAFLD所致肝脏脂肪变性的转归以及早期预防、护理指导和治疗有重要意义。
- 夏谨张文锋龚建平
- 关键词：细胞角蛋白18脂肪细胞脂肪酸结合蛋白
- 过表达RIP140的肿瘤相关巨噬细胞抑制肝癌细胞的侵袭和增殖被引量：2
- 2016年
- 目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中RIP140的表达对肝癌细胞侵袭、增殖的影响。方法慢病毒介导小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)RIP140的过表达,Western blot和Real-time PCR(q RT-PCR)分别检测PMs中RIP140蛋白以及核酸表达水平,流式细胞仪分析慢病毒转染率;Western blot、细胞免疫荧光和q RT-PCR检测肝癌条件培养基(HCM)刺激PMs后TAMs中RIP140的表达变化;HCM刺激PMs以及HCM刺激过表达RIP140的PMs,q RT-PCR检测TAMs极化指标以及NF-κB和IL-6的表达;Transwell实验和细胞流式凋亡实验检测肝癌细胞的侵袭和凋亡;肝癌细胞和PMs以4∶1比例注射于BALB/c裸鼠皮下,建立裸鼠皮下肝癌模型,成瘤癌组织HE染色和免疫组化评定肝癌组织大体生长情况和肝癌细胞增殖能力。结果慢病毒介导PMs RIP140的过表达,病毒转染效率高,RIP140过表达明显;HCM刺激PMs后,TAMs中RIP140呈低表达;HCM诱导TAMs呈M2型极化,并且与肿瘤生长密切相关的NF-κB-IL-6轴处于活化状态;TAMs可促进肝癌细胞侵袭和增殖,抑制肝癌细胞凋亡。TAMs过表达RIP140可抑制HCM介导的TAMs M2型极化并抑制NF-κB/IL-6通路的激活,减少IL-6的释放;除此之外,TAMs过表达RIP140可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖,促进肝癌细胞的凋亡。结论过表达RIP140的TAMs可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖。其机制可能与TAMs过表达RIP140后抑制TAMs M2型极化有关。
- 易竹君周赟张文锋陈浩赵伟刘作金龚建平
- 关键词：肝癌肿瘤相关巨噬细胞增殖
- 肿瘤异质性:肝癌干细胞有序的分化潜能被引量：5
- 2014年
- 肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，据《2012年中国肿瘤登记年报》报道，肝脏肿瘤在我国的发病率为28．71％，发病率位居恶性肿瘤第4位。肝癌恶性程度高，发展迅速，临床上早期诊断困难，患者出现症状时往往已经预示着肝癌晚期，大多数已经出现肝内转移及肝外转移，且肝癌对放疗及化疗均不敏感，术后极易复发，这是导致其病死率高居不下的主要原因。根据巴萨罗那肝癌分期方法与治疗原则，极早期肝癌患者手术切除可获得较满意的预后，而早中期肝癌患者则应该选择更加积极的方式如肝移植、射频消融术、经皮酒精注射、化学药物治疗或介入栓塞，而晚期及终末期患者可以尝试生物治疗或针对并发症治疗。
- 张文锋冯凯
- 关键词：肿瘤异质性肝癌干细胞分子标志物
