彭涛
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中国农业大学研究生科研创新专项基金国家重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 产酸克氏杆菌(Klebsiella oxytoca)钼铁蛋白α-423-Ile位点的突变导致固氮酶催化活性降低被引量：1
- 2014年
- 基于前期对固氮酶催化过程中存在两条电子传递通路的推论,探索从与P原子簇共价相连的β-93Cys出发至FeMoco之间重要的氨基酸位点.通过分析固氮酶钼铁蛋白的结构,利用体外定点突变和基因替代技术,将产酸克氏杆菌(Klebsiella oxytoca)固氮酶β-102Asn,α-431Lys和α-423Ile位点分别替换为β-102Ala,α-431His和α-423Pro,获得Nβ102A,Kα431H和Iα423P突变株.3个突变对细菌固氮生长有不同程度的影响,其中Iα423P突变株几乎无固氮生长,细胞乙炔还原活性显著下降;在42 L发酵罐中培养,其细胞最高固氮酶活性仅为野生型菌株的1/6;qRT-PCR检测发现此突变株nifD基因4倍的上调表达.分离纯化Iα423P钼铁蛋白,其最高C2H2和H+还原水平分别为野生型的13%和21%.根据以上研究结果推论,突变固氮酶的催化活性显著降低,或与直接打破α-423Ile与高柠檬酸长臂之间的氢键有关,推测α-423Ile是固氮酶催化底物还原过程中,电子经高柠檬酸长臂进入活性中心Mo位的入口氨基酸.
- 郭青娟彭涛常天驹张刚姜伟李颖李季伦
- 关键词：固氮酶定点突变质子
- α-423Ile在固氮酶底物还原过程中的作用
- 以Klebsiella oxytoca为材料，成功构建了Ia423P定位突变菌株，发现其固氮生长受到了影响，在细胞水平上对C2H2的还原活性显著降低。分别实现在7.5L和42L发酵罐上大规模厌氧培养、诱导固氮酶合成，Ia...
- 郭青娟彭涛常天驹姜伟李颖李季伦
- 关键词：生物固氮固氮酶
- 文献传递
- 深红红螺菌固氮酶调控机理验证实验设计及实践
- 2012年
- 从科学研究中汲取教学素材,根据实际情况优化条件,设计出一项适合微生物生理学教学的新实验,验证了光照和铵对深红红螺菌固氮酶合成和活性的调控。实验让学生认识了红螺菌代谢灵活性、营养及环境条件对其生长的影响,加深了解固氮酶的底物多样性、固氮酶的氧敏感性和固氮酶的调控机理;实验不仅有效激发了学生学习的兴趣,培养了严谨、认真的科研作风,还提高了分析问题、解决问题的能力。实践证明,科研成果转化为教学实验是提高教学水平、培养创新型人才的重要举措。
- 彭涛关国华姜伟李颖李季伦
- 关键词：深红红螺菌
